Изучение влияния нового сульфопроизводного пиримидин-4(1 Н)-она на нейродеградацию в условиях хронической травматической энцефалопатии

Finding: the research was carried out with the financial support of the RFBR in the framework of scientific project No. 20-315-90062.

Хроническая травматическая энцефалопатия (ХТЭ) является прогрессирующей нейродеге-неративной патологией, основной причиной формирования которой являются сотрясения головного мозга (СГМ) [1]. Клинические проявления ХТЭ непосредственно связаны с деградацией клеток коры больших полушарий головного мозга, выражаются комплексом когнитивных, сенсомоторных, неврологических дисфункций [2].

Учитывая современный технический прогресс и политическую ситуацию в мире, наблюдается увеличение числа черепно-мозговых травм, вызванных воздействием взрывов при военных конфликтах, на производствах, в быту, дорожнотранспортных происшествиях, что создает угрозу жизни и здоровью для всего населения без привязки к какой-либо конкретной сфере деятельности [3]. В настоящее время единственным способом постановки диагноза ХТЭ является посмертный анализ мозга больного с целью выявления маркеров нейродеградации, одними из которых являются глиально-фибриллярный кислотный белок (GFAP) и бета-амилоид (Аβ) [4]. На сегодняшний день не существует ЛС для достаточно эффективной терапии ХТЭ, что делает актуальным поиск средств, обладающих цереб-ропротекторной активностью, в частности среди соединений, в структуре которых содержится ядро пиримидина, в связи с наличием у данного класса веществ широкого спектра фармакологической активности [5, 6].

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Определить степень влияния введения нового производного пиримидина на процессы нейродеструкции в условиях экспериментальной ХТЭ.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование произведено на 100 крысах-самцах (линия Wistar, масса животного 230–260 г). Манипуляции, проводимые с животными, строго соответствовали стандарту ГОСТ 33044-2014 «Принципы надлежащей лабораторной практики». Воспроизводили ХТЭ с помощью методики «Blast wave» . Для достижения эффекта СГМ схожего с человеческим предварительно наркотизированных крыс (хлоралгидрат, 350 мг/кг) фиксировали в установке, имитирующей действие взрывной волны. Воздействие на животных проводилось однократно [7]. Исследуемым соединением выступало новое сульфопроизводное пиримидин-4(1Н)-она – 4-(2-метил-6-этил-

4-оксо-5-фенил-4H-пиримидин-1-ил)-бензсульфа-мид (брутто формула – С 19 H 19 N 3 O 3 S) под лабораторным шифром Com1. Препаратами сравнения выступали холина альфосцерат («Церепро», Верофарм, РФ) и гопантеновая кислота («Пантогам», «ПИК-ФАРМА ПРО», РФ). Референтные препараты и исследуемое соединение вводили перорально в дозе 100 мг/кг однократно спустя 30 мин после моделирования патологии [8, 9].

Содержание изучаемых показателей Аβ и GFAP устанавливали по прошествии 1 и 14 суток после воспроизведения патологии с помощью твердофазного иммуноферментного анализа с использованием реактивов компании Cloud Clone Corp . (США). Содержание Аβ устанавливали в надосадочной жидкости гомогената головного мозга, GFAP определяли в сыворотке крови.

Полученные данные подвергались статистической обработке при использовании STATISTICA 6.0 (StatSoft, Inc.), в ходе анализа данных был применен критерий сравнения Ньюмена-Кейсла.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯИ ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В ходе оценки концентрации Аβ спустя 24 часа после моделирования патологии установлено ее значение у крыс группы ПК на уровне (22,100 ± 0,362) пг/мл (рис. 1).

В то же время у группы животных НК содержание изучаемого показателя возросло в 22 раза (р < 0,05) по сравнению с данными группы ПК. На фоне введения в качестве фармакологической поддержки холина альфосцерата и гопантеновой кислоты отмечалось снижение уровня Аβ в 2,2 (р < 0,05) и 2,9 (р < 0,05) раза соответственно относительно крыс группы НК. Применение Com1 позволило сократить концентрацию Аβ в 3 раза (р < 0,05) по сравнению со значением группы животных НК.

При изучении содержания Аβ по прошествии 14 суток после воспроизведения патологии установлено, что у животных группы ПК его значение составило (20,600 ± 1,211) пг/мл. При этом уровень Аβ у крыс группы НК повысился по сравнению с животными группы ПК в 21 раз (р < 0,05). Применение холина альфосцерата и гопантеновой кислоты позволило сократить значение исследуемого показателя по отношению к крысам группы НК в 1,1 и 1,3 раза (р < 0,05) соответственно. Введение Com1 позволило сократить концентрацию Аβ по отношению к животным группы НК в 2,1 раза (р < 0,05).

Содержание GFAP по прошествии 24 часов после моделирования патологии у животных группы ПК было на уровне (290,300 ± 8,254) пг/мл (рис. 2).

Исследуемые группы крыс

□ Спустя 1 сутки в Спустя 14 суток

Рис. 1. Динамика содержания Аβ у крыс в условиях ХТЭ и ее коррекции:

статистически значимо (критерий Ньюмена – Кейлса) относительно ПК группы животных (* – р < 0,05), относительно крыс НК группы (∆ – p < 0,05). ПК – группа крыс положительного контроля; НК – группа крыс негативного контроля; ХА – группа крыс, получавшая холина альфосцерат; ГК – группа крыс, получавшая гопантеновую кислоту; Com1 – группа крыс, получавшая исследуемое соединение Com1

Исследуемые группы крыс

• □ Спустя 1 сутки    □ Спустя 14 суток

Рис. 2. Содержание GFAP у крыс в условиях ХТЭ и ее коррекции: статистически значимо (критерий Ньюмена – Кейлса) относительно ПК группы животных (* – р < 0,05), относительно крыс НК группы (∆ – p < 0,05). ПК – группа крыс положительного контроля; НК – группа крыс негативного контроля; ХА – группа крыс, получавшая холина альфосцерат; ГК – группа крыс, получавшая гопантеновую кислоту; Com1 – группа крыс, получавшая исследуемое соединение Com1

Концентрация изучаемого показателя у крыс группы НК увеличилась в 12,8 раза (р < 0,05) относительно значения группы крыс ПК. Введение холина альфосцерата и гопантеновой кислоты позволило сократить уровень GFAP относи- тельно группы НК в 1,9 (р < 0,05) и 1,8 (р < 0,05) раза соответственно.

Применение Com1 способствовало снижению концентрации GFAP в 4,3 раза (р < 0,05) по отношению к животным группы НК.

По прошествии 14 суток после моделирования ХТЭ установлена концентрация GFAP на уровне (301,100 ± 6,362) пг/мл у группы животных ПК. У группы крыс НК содержание GFAP увеличилось по сравнению с животными группы ПК в 14,3 раза (р < 0,05). Введение крысам холина альфосцерата и гопантеновой кислоты способствовало снижению уровня GFAP относительно животных группы НК в 2,4 (р < 0,05) и 2,3 (р < 0,05) раза соответственно. При введение Com1 отмечалось снижение концентрации GFAP в 3 раза (р < 0,05) по сравнению со значением крыс группы НК.

Установленное церебропротекторное действие нового сульфопроизводного пиримидин-4(1Н)-она Com1, вероятно, связано со способностью данного класса соединений восстанавливать функции эндотелия сосудов головного мозга и митохондриальные функции клеток головного мозга, что, в свою очередь, поддерживает физиологически необходимый уровень метаболизма, тем самым снижая уровень нейродеградации [10, 11].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проанализировав результаты исследования, можно сказать, что новое сульфопроизводное пиримидин-4(1Н)-она Com1 обладает церебропротекторной активностью, которая, в свою очередь, выражается достоверно значимым снижением процессов нейродеградации относительно животных, лишенных фармакологической поддержки в условиях экспериментальной ХТЭ.

(In Russ.). https://doi : 10.30906/0869-2092-2019

82-11-11-14.