Ядрышковыи аппарат и скорость клеточной пролиферации при предраковых заболеваниях и раке молочной железы

Алтайский филиал ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН Кафедра патологической анатомии АГМУ, г. Барнаул

Рост опухоли связан с появлением новых клонов, отличающихся по своим свойствам от исходных клеток ткани. Компьютерное микро-спектрофотометрическое изучение ДНК является наиболее распространенным и надежным методом выявления новых клеточных клонов с изменившимися биологическими свойствами и оценки пролиферативной активности. Изменения уровня экспрессии аргирофильных белков ядрышка (AgNORs) в фазах клеточного цикла характеризуют кинетику клеточного роста. Так, высокие значения числа AgNORs указывают на то, что большая часть клеток находится в S-G2-фазе клеточного цикла, что, в свою очередь, свидетельствует о быстром прохождении клетками G1-фазы и всего клеточного цикла. Низкий уровень экспрессии AgNORs, напротив, обозначает медленное прохождение клеточного цикла (Райхлин Н.Т. и др., 2006; Derenzini М., 2000).

Целью исследования явилось определение активности AgNORs и плоидности на одном и том же клеточном ядре в различных клеточных популяциях неизмененной ткани, при предраковых заболеваниях и раке молочной железы.

Материалом для исследования послужили 30 образцов патологически измененной ткани молочной железы и 5 неизмененной. Средний возраст больных составил 45,8 ± 3,7 года. Активность AgNORs определяли по методу W.M. Howell и D.A. Black (1980). Ядра окрашивались 0,2 % водным раствором метилового зеленого предварительно тщательно очищенного хлороформом. Плоидометрию ядер проводили с помощью компьютерной программы UTHSCSA Image Tool 3.0. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью пакета программ STATISTICA 6.0.

Результаты проведенного исследования показали, что экспрессия AgNORs и плоидность наиболее сильно коррелировали между собой при раке молочной железы (r=0,74), умеренно коррелировали при пролиферативной форме железисто-фиброзной мастопатии (r=0,40) и не коррелировали в неизмененной ткани и непролиферативной форме железисто-фиброзной мастопатии (r = 0,19).

В неизмененной ткани молочной железы клетки, имеющие плоидность 2с ДНК, содержали 2,5 ± 0,1 АgNORs на 1 ядро, 3–4с – 5,3 ± 0,15. При непролиферативной форме железистофиброзной мастопатии клетки с набором 2с ДНК содержали 3,2 ± 0,1 AgNORs на 1 ядро, 3–4с – 5,6 ± 0,1. При МИН – Ι появлялись новые клеточные клоны, содержащие 5с и 6с ДНК, имеющие 5,5 ± 0,05 и 7,8 ± 0,1 AgNORs на 1 ядро, клетки с набором 3–4с содержали 5,2 ± 0,1 AgNORs на 1 ядро. При МИН – ΙΙ отмечалось появление высокозлокачественного клона, содержащего 7с ДНК и выше, число AgNORs в клетках которого было 13,3±0,5. Клетки, содержащие 6с ДНК, при МИН – ΙΙ содержали 9,4 ± 0,1 AgNORs, содержащие 5с и 3–4с ДНК – 7,5 ± 0,2 и 5,5 ± 0,3 AgNORs. В клетках carcinoma in situ клоны, имеющие хромосомный набор 7с ДНК, содержали 15,7 ± 0,75AgNORs на 1 ядро, 6с – 10,4 ± 0,2 AgNORs; 5с – 8,7 ± 0,2 AgNORs; 3–4c – 7,6 ± 0,7 AgNORs. При инвазивном протоковом раке количество гранул AgNORs в клонах 3–4с составило 20,7 ± 2,2; 5с – 21,2 ± 4,9; 6c – 29,0 ± 3,8; 7с и выше – 38,3 ± 1,2.

Выводы. Таким образом, число AgNORs на 1 ядро взаимосвязано с плоидностью, т.е.

отражает пролиферативную активность клеток при предраковых заболеваниях и раке молочной железы. При этом отмечается тенденция к увеличению числа гранул AgNORs в клеточных клонах одинаковой плоидности в цепочке изменений от нормы до рака, что связано с возрастанием скорости пролиферации. Отсутствие корреляции с плоидностью и низкий уровень экспрессии AgNORs в неизмененной ткани и непролиферативной форме мастопатии обусловлены медленным клеточным обновлением. Сочетанное исследование экспрессии AgNORs и плоидности может дать более полное представление о кинетике опухолевого роста при предраковых заболеваниях и раке молочной железы.