Эффективность противоопухолевого действия комбинаций сунитиниба и бортезомиба на клеточных линиях рака молочной железы человека

Результаты. К таргетным противоопухолевым препаратам обе клеточные линии РМЖ проявили сходную чувствительность - для сунитиниба IC50 составляет 1,1 x 10-5 для SKBR-3 и 1,3 x 10-5 для MDA-MB-231. При применении бортезомиба IC50 составляет 2,5 x 10-8 для SKBR-3, и немного больше активность бортезомиба в отношении клеточной линии MDA-MB-231-1,6 x 10-8 (р>0,05). Применение комбинации препаратов может синергически увеличить противоопухолевую активность и преодолеть специфическую резистентность клеточных или анти-апоптотических механизмов, в том числе и за счет ингибирования бортезомиб-индуцированной

NF-κB-зависимой транскрипционной активности. Бортезо-миб вносили в наиболее эффективных нецитотоксических концентрациях от 7,5–1нМ, которые подбирались, согласно значениям IC50 для каждой из исследуемых клеточных линий, концентрация сунитиниба варьировала в диапазоне от 0,1–10 мкМ.

Согласно полученным данным, добавление бортезомиба в нецитотоксической концентрации 5 нМ вызывает значительную гибель клеток ТНР линии MDA-MB-231 при нецитотоксических концентрациях сунитиниба 0,1–10 мкМ, в случае линии SKBR-3 потенцирование цитотоксического действия сунити-ниба было менее выраженным. Увеличение концентрации бор-тезомиба до 7,5 нМ усиливает цитотоксичность сунитиниба для линии SK-BR-3. В тоже время, бортезомиб в более низких концентрациях 1–2,5 нМ не вызывает выраженного изменения цитоксичности сунитиниба на обеих клеточных линиях РМЖ. Следует отметить, что концентрации бортезомиба 5–7,5 нМ, не проявляющие токсичность, вызывают гибель клеток при комбинировании с сунитинибом. Таким образом, бортезомиб является более сильным цитотоксическим ингибитором, который может потенцировать действие сунитиниба, при применении в концентрации 5–7,5 нМ in vitro.

Иммуноцитохимическое исследование показало, что обе линии РМЖ в достаточной степени экспрессируют рецепторные тирозинкиназы и имеют схожую высокую экспрессию VEGFR2, но линия MDA-MB-231 отличается более выраженной экспрессией рецепторов PDGFRα и с-Kit в сравнении с клеточной линей SKBR-3. Наименьшая экспрессия наблюдалась для рецептора PDGFRβ на обеих линиях. Для анализа действия сунитиниба на рецепторы тирозинкиназ сунитиниб брали в концентрации 1 мкM. Согласно полученным данным, под действием данного препарата значительно снижалась экспрессия маркеров VEGFR2, PDGFRα, а также c-Kit, экспрессия VEGFR1 незначительно снижалась на клеточной линии SKBR-3. Таким образом, сунитиниб в нецитотоксической концентрации вызывет снижение экспрессии рецепторных тирозинкиназ. Бортезомиб в концентрации 7,5нМ вызвал значительное снижение экспрессии всех исследуемых рецепторов, что может быть связано с ингибированием действия протеасомы 26S, регулирующей внутриклеточный обмен белков.

Заключение. Таким образом, наше исследование показало, что бортезомиб в нецитоксических концентрациях потенцирует действие сунитиниба, причем клеточная линия MDA-MB-231 проявила большую чувствительность к комбинации бортезомиба и сунитиниба in vitro. Бортезомиб и сунитиниб вызывают снижение экспрессии рецепторных тирозинкиназ VEGFR1, VEGFR2, PDGFRα, PDGFRβ и c-Kit.

Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант № 14–15–00528).

• № 4, Special Edition 1 – 2016 г. (21) • MALIGNANT TUMOURS 327