Экспрессия активной формы каспазы-3 не является достоверным показателем индукции апоптоза в стимулированных CD4+ Т-лимфоцитах
Автор: Сайдакова Евгения Владимировна, Власова Виолетта Викторовна
Журнал: Вестник Пермского университета. Серия: Биология @vestnik-psu-bio
Рубрика: Иммунология
Статья в выпуске: 3, 2019 года.
Бесплатный доступ
Цель настоящей работы - анализ экспрессии активной формы каспазы-3 в стимулированных CD4+ Т-лимфоцитах и сопоставление ее с другими широко используемыми маркерами апоптоза и активности CD4+ Т-клеток. В процессе исследований мононуклеарные клетки периферической крови человека стимулировали анти-CD3/анти-CD28 антителами в течение 48 ч. и определяли экспрессию активной формы каспазы-3, маркеров активации (CD25), пролиферации (Ki-67) и апоптоза (PO-PRO/PI и AnnexinV/PI) методом проточной цитометрии. Было установлено, что под влиянием стимулятора доля каспаза-3-позитивных лимфоцитов среди CD4+CD45RA- Т-клеток увеличилась в 5.7 раз (P 0.05). Относительное количество клеток, экспрессирующих активную форму каспазы-3, было связано с параметрами активации (R = 0.878; P 0.05). Исходя из полученных данных можно заключить, что использование активной формы каспазы-3 в качестве единственного маркера при исследовании апоптоза стимулированных CD4+ Т-лимфоцитов приводит к ложноположительным результатам, во многом отражающим активацию клеток. Для получения достоверных данных требуется введение дополнительных параметров, учитывающих как индукцию программируемой клеточной гибели, так и активность лимфоцитов.
Cd4+ т-лимфоциты, апоптоз, каспаза-3, проницаемость цитоплазматической мембраны, асимметрия цитоплазматической мембраны, активация, проточная цитометрия
Короткий адрес: https://sciup.org/147227098
IDR: 147227098 | DOI: 10.17072/1994-9952-2019-3-353-358
Список литературы Экспрессия активной формы каспазы-3 не является достоверным показателем индукции апоптоза в стимулированных CD4+ Т-лимфоцитах
- Akbar A.N. et al. Loss of CD45R and gain of UCHL1 reactivity is a feature of primed T cells // J. Immunol. 1988. Vol. 140. P. 2171-2178.
- Alam A. et al. Early activation of caspases during T lymphocyte stimulation results in selective substrate cleavage in nonapoptotic cells // J. Exp. Med. 1999. Vol. 190. P. 1879-1890.
- Alnemri E.S. Mammalian cell death proteases: a family of highly conserved aspartate specific cysteine proteases // J. Cell Biochem. 1997. Vol. 64. P. 33-42.
- Belloc F. et al. Flow Cytometry detection of caspase 3 activation in preapoptotic leukemic cells // Cytometry. 2000. Vol. 40. P. 151-160.
- Brancolini C. et al. Dismantling cell-cell contacts during apoptosis is coupled to a caspase-dependent proteolytic cleavage of beta-catenin // J. Cell Biol. 1997. Vol. 139. P. 759-771.
- Carracedo J. et al. Caspase-3-dependent pathway mediates apoptosis of human mononuclear cells induced by cellulosic haemodialysis membranes // Nephrol. Dial. Transplant. 2002. Vol. 17. P. 1971-1977.
- Carson D.A., Ribeiro J.M. Apoptosis and disease // The Lancet. 1993. Vol. 341. P. 1251-1254.
- Fan J. et al. Circulating Peptidome and Tumor-Resident Proteolysis // Enzymes. 2017. Vol. 42. P. 1-25.
- Fernando P. et al. Caspase 3 activity is required for skeletal muscle differentiation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. Vol. 99. P. 11025-11030.
- Janicke R.U. et al. Caspase-3 is required for DNA fragmentation and morphological changes associated with apoptosis // J. Biol. Chem. 1998. Vol. 273. P. 9357-9360.
- Kennedy N.J. et al. Caspase activation is required for T cell proliferation // J. Exp. Med. 1999. Vol. 190. P. 1891-1896.
- Kook S. et al. Caspase-dependent cleavage of tensin induces disruption of actin cytoskeleton during apoptosis // Biochemical and Biophysical Research Communications. 2003. Vol. 303. P. 37-45.
- Lamkanfi M. et al. Caspases in cell survival, proliferation and differentiation // Cell Death. Differ. 2007. Vol. 14. P. 44-55.
- Lowe S.W., Lin A.W. Apoptosis in cancer // Carcinogenesis. 2000. Vol. 21. P. 485-495.
- O'Reilly L.A., Strasser A. Apoptosis and autoimmune disease // Inflamm. Res. 1999. Vol. 48. P. 5-21.
- Santos N.F.G.D. et al. Active caspase-3 expression levels as bioindicator of individual radiosensitivity // An. Acad. Bras. Cienc. 2017. Vol. 89. P. 649-659.
- Vaux D.L., Strasser A. The molecular biology of apoptosis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. Vol. 93. P. 2239-2244.
- Wilhelm S., Wagner H., Hacker G. Activation of caspase-3-like enzymes in non-apoptotic T cells // Eur. J. Immunol. 1998. Vol. 28. P. 891-900.
- Woo M. et al. Caspase-3 regulates cell cycle in B cells: a consequence of substrate specificity // Nat. Immunol. 2003. Vol. 4. P. 1016-1022.
