Экспрессия и очистка четвертого меланокортинового рецептора
Автор: Южакова А.И., Горделий В.И.
Журнал: Труды Московского физико-технического института @trudy-mipt
Рубрика: Биология и медицина
Статья в выпуске: 2 (38) т.10, 2018 года.
Бесплатный доступ
Основной функцией четвёртого меланокортинового рецептора человека (MC4R) является регуляция пищевого поведения. Здесь мы описываем способ получения MC4R в необходимых для кристаллизации количествах. Показана экспрессия белка в клетках кишечной палочки и его очистка с помощью аффинной и гель-фильтрационной хроматографии. Очищенный белок был ренатурирован при помощи неопентил-гликоля (NG310). Также приводится анализ функциональности полученного белка при помощи экспериментов по связыванию лиганда.
Семиспиральные рецепторы, меланокортиновый рецептор, гетерологичная экспрессия
Короткий адрес: https://sciup.org/142215036
IDR: 142215036
Список литературы Экспрессия и очистка четвертого меланокортинового рецептора
- Gantz I., Fong T.M. The melanocortin system//AJP-Endocrynology. 2003. V. 284. P. E468-E474.
- Breit A. . Alternative G protein coupling and biased agonism: New insights into melanocortin-4 receptor signalling//Molecular and Cellular Endocrinology. 2011. V. 331. P. 232-240.
- Yang Y., Chen M., Loux T. . Molecular Mechanism of the Intracellular Segments of the Melanocortin-4 Receptor for NDP-MSH Signaling//Biochemistry. 2005. V. 44. N 18. P. 6971-6979.
- Progress in Molecular Biology and Translational Science. V. 88. G Protein-Coupled Receptors in Health and Disease, Part A//Chapter 6 Mutations in Melanocortin-4 Receptor and Human Obesity/ed. by Tao Y. Elsevier, 2009.
- Yun J., Kim M., Kim K. . Solution structure of the transmembrane 2 domain of the human melanocortin-4 receptor in sodium dodecyl sulfate (SDS) micelles and the functional implication of the D90N mutant//Biochimica et Biophysica Acta. 2015. V. 1484. P. 1294-1302.
- Boel G. . Codon influence on protein expression in E. coli correlates with mRNA levels//Nature. 2016. V. 529. P. 358-363.
- Reithmeier R. Structural biology of membrane proteins//Methods. 2007. V. 41, I. 4. P. 353-364.
- Gudim I., Lofstad M., Hammerstad M. . Measurement of FNR-NrdI Interaction by Microscale Thermophoresis (MST)//Bio-Protocol. 2017. V.7, I. 8.
- Schioeth H.B. . Discovery of novel melanocortin4 receptor selective MSH analogues//British journal of pharmacology. 1998. V. 124, I. 1. P. 75-82.
- Chae P., Rasmussen R., Rana R. . Maltose-neopentyl glycol (MNG) amphiphiles for solubilization, stabilization and crystallization of membrane proteins//Nature Methods. 2010. V. 7, I. 12, P. 1003-1008.
- Park T., Choi S., Gang G. . High-level expression and purification of the second transmembrane domain of wild-type and mutant human melanocortin-4 receptor for solid-state NMR structural studies//Protein expression and purification. 2008. V. 62, I. 2. P. 139-145.
- Kobilka B.K. . Use of fluorescence spectroscopy to study conformational changes in the beta 2-adrenoceptor//Methods Enzymol. 2002. V. 343. P. 170-182.
- Yang Y., Chen M., Lai Y. . Molecular determination of agouti-related protein binding to human melanocortin-4 receptor//Molecular pharmacology. 2003. V. 64, I. 1. P. 94-103.
