Экспрессия металлопротеиназ и их эндогенных ингибиторов при раке гортани

Цель исследования . Определить экспрессию металлопротеиназ 1, 2, 9 и ингибиторов металлопротеиназ 1, 2 в различных опухолевых структурах и стромальных элементах при раке гортани.

Материал и методы. Проводилось иммуногистохимическое исследование операционного материала от 32 пациентов с раком гортани в возрасте от 43 до 75 лет (средний возраст – 60,2 года). Все пациенты получали предоперационную химиолучевую терапию. Исследовались: металлопротеиназа 9 (MMП9), металлопротеиназа 1 (ММП1), тканевой ингибитор металлопротеиназы 1 (TИMП1), металлопротеиназа 2 (ММП2), тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 (ТИМП2). Экспрессия маркеров в опухоли изучалась в шести типах опухолевых структур. 1-й тип – структуры с ороговением в центре (формирующие «жемчужины»), 2-й – состоящий из клеток шиповатого типа, 3-й – состоящий из базальных клеток – базалоидный тип, 4-й тип – низкодифференцированные структуры, 5-й тип – поверхностный многослойный плоский эпителий, 6-й – комплексы клеток. Для иммуногистохимического исследования использовались антитела фирмы «Новокастра» ММП9, ММП1, ТИМП1, ММП2, ТИМП2. Инкубацию с первыми антителами проводили 60 мин при температуре 25 С°. Использовали систему визуализации фирмы «Dako» LSAB2 System – HRP, в качестве хромогена – ДАБ, препараты докрашивали гематоксилином. Экспрессия маркеров определялась как слабая, средняя (умеренная) и выраженная. Результаты обработаны с помощью t-критерия Стьюдента.

Результаты. При исследовании тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 в эпителиальных клетках опухоли отмечалась средняя и выраженная экспрессия маркера. Причем в клетках базального слоя опухолевых структур 1, 2 и 3-го типов отмечалась неоднородная реакция – в части клеток была низкая экспрессия или присутствовали клетки с негативной реакцией. В большинстве остальных опухолевых клеток экспрессия была выраженной. Как правило, такая же экспрессия определялась в клетках, формирующих «жемчужины», в структурах 1-го типа. Экспрессия ТИМП1 в клетках стромы (фиброциты, лейкоциты и т.д.) была также достаточно выраженной (отмечалась средняя и выраженная экспрессия). При сравнении экспрессии ТИМП1 в различных типах опухолевых структур достоверная разница отмечалась между 1-м и 2-м типом структур (р= 0,009).

В ткани опухоли ММП9 экспрессировалась гетерогенно, от отрицательной реакции до выраженной (в 2 случаях). Отмечались случаи, когда маркер определялся только в некоторых клетках опухолевых структур. Причем эти клетки со слабой или умеренной экспрессией могли располагаться беспорядочно по всей структуре. Клетки стромы, как инфильтрирующие ее лейкоциты, так и фибробласты, в основном давали среднюю и выраженную реакцию, но присутствовал пул отрицательных лейкоцитов. При сравнении различных типов структур между собой значимые различия получены между 2-м типом структур и комплексами клеток (р=0,004). Вероятно, экспрессия ММП9 в 4-м типе опухолевых структур связана с метастазированием в регионарные лимфоузлы (р=0,06).

В 24 случаях наблюдалась негативная реакция на ММП2 в ткани опухоли, слабая экспрессия отмечалась только у 8 пациентов. Следует отметить, что в небольших комплексах клеток, отдельно лежащих в строме (6-й тип опухолевых структур), экспрессия маркера (в 5 из 8 случаев) была умеренная и слабая, в то время как остальная опухолевая ткань оказалась полностью негативна. Основная масса клеток стромы (лейкоциты, фибробласты и тд.) экспрессировали маркер умеренно и слабо. Подобная экспрессия прослеживалась и при исследовании ТИМП2. Только в 7 случаях отмечалась слабая реакция в опухолевой ткани, остальные случаи были негативны. Экспрессия ТИМП2 клетками стромы была подобна экспрессии ММП2. При сравнении экспрессии ТИМП2 в различных типах структур достоверные различия определены между 2-м типом структур и комплексами клеток (р=0,019), а также наблюдается тенденция к различию между 1-м типом опухолевых структур и комплексами клеток (р=0,0509). Зависимость между экспрессией металлопротеиназ и их эндогенных ингибиторов и стадией заболевания Т не выявлена, но наблюдается некоторая тенденция: при увеличении стадии отмечается высокая экспрессия ТИМП1 в клетках первого типа опухолевых структур (р=0,07).

Выводы. Экспрессия исследуемых металлопротеиназ 1, 2, 9 и их эндогенных ингибиторов 1, 2 в опухолевых структурах находится в зависимости от вида эпителиальных клеток, входящих в состав опухолевых структур, что требует дальнейшего изучения прогностической значимости этого феномена.