Экспрессия селенсодержащей глутатионпероксидазы при канцерогенном действии тетрахлорметана

Методы и материалы. Объектом исследования являлись самцы взрослых белых лабораторных крыс (Rattus rattus) массой 150–200 г. Тетрахлорметан вводили в виде 33% раствора в вазелиновом масле из расчета 64 мкл CCl4 на 100 г веса животного. Забой животных производили на 4-е сутки после введения канцерогенного агента. Контрольным животным вводили соответствующую аликвоту вазелино- вого масла. Эксперимент проводился в четыре этапа: экстракция тотальной РНК тризоловым методом, удаление примесей геномной ДНК из выделенной тотальной РНК, обратная транскрипция и ПЦР-амплификация в режиме реального времени на приборе АНК-32. Для проведения ПЦР использовали набор, содержащий интеркалирующий краситель SYBR GreenI фирмы «Синтол», и праймеры, подобранные с помощью программы Genamics Expression. Полученные значения пороговых циклов реакций (Ct) были нормализованы относительно Ct трех генов «домашнего хозяйства» и статистически обработаны с помощью программного обеспечения «Relative Expression Software Tool – 2008».

Результаты. Анализ экспрессии гена Gpx1с учетом эффективности амплификации позволил установить, что уровень этих транскриптов увеличивается при канцерогенном действии тетрахлорметана. Экспрессия Gpx1 возрастала в 2,5 раза относительно нормы.

Выводы. По-видимому, увеличение экспрессии Gpx1 при действии тетрахлорметана происходит благодаря реализации адаптивных процессов на клеточном уровне, направленных на лимитирование образования свободных радикалов, путем более интенсивного функционирования глутатионпероксидазной реакции в условиях окислительного стресса.

СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2010. Приложение № 1