Этиопатогенез, клиника, морфология при гипотрофии козлят

Условия и методы исследования

Производственные опыты для изучения распространения, этиопатогенеза, клиникоморфологического проявления, посвященные разработке лечебно-профилактических мероприятий при гипотрофии новорожденных козлят, нами проведены в период 2013–2014 гг., в компаний «Бэлэн-Эрдэнэ», Монголия. Экспериментально-клинические опыты по электрогастрографии и гематологии проводились в клинике кафедры терапии и клинической диагностики БГСХА и в лаборатории фармакологии и токсикологии Института ветеринарной медицины МГАУ им. В. П. Горячкина.

В качестве подопытных животных служили матки, новорожденные козлята-гипотрофики и нормот-рофики. В течение 15–30 минут после рождения козлят производили взвешивание новорожденных, т. е. определяли коэффициент катаболизма по методике И. С. Егошина (1984).

Морфофизиологическую оценку уровня развития и жизнеспособности козлят в определенные сроки через 3 часа, 3, 5, 15, 30, 45 и 60 суток после рождения проводили по методике, предложенной К. М. Курносовым (1975).

Также в эти сроки проведен весь комплекс клинико-гематологических, клинико-биохимических и электрогастрографических исследований у козлят-гипотрофиков и нормотрофиков в сравнительном аспекте.

Коэффициент катаболизма определяли путем деления живой массы новорожденного через 24 часа жизни до очередного кормления на живую массу козленка при рождении до первого сосания. При этом учитывались все народившиеся козлята, в том числе и мертворожденные. В течение 30 минут после рождения проводили взвешивание. Козлята, имевшие коэффициент менее 0,9 при рождении, относили в группу гипотрофиков.

Перед началом опытов животные выдерживались на сбалансированном по питательным веществам рационе. Состав рациона: сено люцерновое — 1,5 кг, силос — 2,0 кг, дерть ячменная, обогащенная премиксом полиминеральных кормовых добавок — из расчета 0,5 г на 1 кг массы тела животных, соль-лизунец и вода вволю.

Установлено, что при экспериментально вызванной манифестирующей форме кетоза суягных маток нарушается по сравнению с контролем развитие плода, козлята рождаются с меньшей живой массой (гипотрофики), индекс катаболизма ниже 0,9. Всего было получено 250 козлят, 35 голов имели живую массу менее 2 кг, что составляет 14 %, из которых 24 имели живую массу в пределах 1,92,0, что соответствует 68,5 %, 9 — 1,7–1,8 кг (25,6 %) и 2 козленка — менее 1,7 кг (5,7 %).

Результаты исследований

Для изучения клинико-гематологического статуса у козлят-нормотрофиков и гипотрофиков мы проводили клиническое обследование и гематологические исследования новорожденных животных. Клиническому обследованию было подвергнуто по 20 козлят-нормотрофиков и гипотрофиков.

Основываясь на предварительно выявленных клинических признаках, характеризующих общее состояние новорожденных козлят, различали нормотрофию и гипотрофию I, II, III степени.

Козлята-нормотрофики вскоре после рождения (в течение 30 минут) вставали на ноги и начинали активно передвигаться в поисках матери. Они имели крепкое телосложение с хорошо развитой мускулатурой и подкожным жировым слоем, устойчиво держались на ногах. Кожа у них была гладкой, а голос сильным. Характерным для этой группы козлят было то, что начиная буквально с первых часов жизни они активно реагировали на различного рода раздражители, в том числе и на зов матери. Козлята-нормотрофики имели живую массу при рождении 2,0–2,4 кг.

Козлята с гипотрофией I степени при рождении имели живую массу 1,8–1,9 кг, удовлетворительное общее состояние. На первый взгляд, они ничем не отличались от нормотрофиков, кроме как сниженным индексом катаболизма. Но при более тщательном обследовании выявлено снижение подкожного жирового слоя на туловище и животе, эластичности кожи. Основные физиологические показатели, присущие этому периоду жизни (рефлекс сосания, голосовой, сон и т. д.), сохранены или в некоторых случаях не- 49

значительно нарушены. Видимые слизистые оболочки анемичны или желтушные. Установлено, что индекс катаболизма у козлят с гипотрофией I степени при рождении составляет менее 0,85, то есть живая масса гипотрофиков составляла 80–85 % от живой массы нормотрофиков.

У козлят с гипотрофией II степени характерными признаками являлись прогрессирующее угнетение общего состояния и резкое снижение аппетита. Больные козлята неохотно поднимаются на ноги, большее время лежат, не могут самостоятельно передвигаться. Без посторонней помощи не могут сосать своих матерей, полусонные, слабо реагируют на внешние раздражители, болевая и тактильная чувствительность нарушены. Цвет кожи имеет бледную окраску с синюшным оттенком, эластичность кожи снижена, она легко собирается в складки, отмечается резко выраженное истощение. Коэффициент катаболизма у козлят с гипотрофией II степени при рождении составлял менее 0,80, то есть их живая масса составила 75–80 % от живой массы нормотрофиков.

Установлено, что козлят с гипотрофией III степени индекс катаболизма менее 0,75 от живой массы нормотрофиков. Козлята при рождении не могут самостоятельно освободиться от околоплодных оболочек и в течение долгого времени (до 3–5 часов) не могут передвигаться, при этом отличается сильное дрожание мускулатуры. Часть козлят с III степенью гипотрофии рождаются без видимых признаков жизни. Наиболее характерными для козлят этой группы в первые часы жизни являются продолжительная неподвижность, отсутствие какой-либо реакции на различного рода раздражители.

У гипотрофиков отмечается истощение, большеголовость, короткая или изреженная шерсть. У таких козлят при рождении меньше шести резцов, низкий мышечный тонус, слабовыраженный сосательный рефлекс. Видимые слизистые оболочки анемичны. Кожа имеет бледную окраску с синюшным оттенком, легко собирается в складки. У гипотрофиков также отмечалась дисфункция желудочно-кишечного тракта. Клинически эти отклонения проявлялись диареей и запаздыванием отхождения мекония. Живая масса к 15 дню у таких козлят не превышает 3–3,4 кг.

В период исследований нами установлены различия в показателях температуры тела, частоты пульса и дыхания, данные морфологического состава крови и электрофизиологических исследований, как по возрастным группам, так и между козлятами-нормотрофиками и гипотрофиками.

Температура тела козлят-гипотрофиков в день рождения была в пределах физиологических границ (39,1±0,4 0С) и существенно не отличалась от среднеарифметической температуры тела козлят-гипотрофиков всех степеней (Р<0,001). Такая же закономерность продолжала наблюдаться до двухмесячного возраста подопытных животных. Показатели температуры тела к 60-дневному возрасту у козлят-нормотрофиков были 38,9±0,05 0С, у козлят-гипотрофией I степени — 38,5±0,05 0С, II степени — 38,2±0,05 0С, III степени — 38,0±0,05 0С.

Частота пульса в первые часы жизни была ниже у козлят-гипотрофиков, соответственно, 169,2±3,3; 165,2±12,3; 162,1±4,4 в минуту по сравнению с нормотрофиками — 168,1±11,9 сердечных сокращений в минуту. В течение первых 5 суток частота пульса у козлят всех групп увеличивалась. В последующие дни, с 15-дневного возраста к двухмесячному, у гипотрофиков по сравнению с нор-мотрофиками отмечено уменьшение частоты пульса (Р<0,05). Это объясняется снижением сократительной способности миокарда, что подтверждается морфологическими изменениями сердечной мышцы.

Показатели частоты дыхания у козлят-гипотрофиков достоверно ниже (Р<0,001), чем у козлят нормотрофиков, и, соответственно, равнялись у гипотрофиков I степени 56,7±2,8; II степени — 49,7±1,7; III степени — 48,1±1,8 против 65,9±1,5 дыхательных движений в минуту у нормотрофиков. Затем дыхание учащалось у козлят-гипотрофиков до 5-дневного возраста и составило 63,8±1, а у нормотрофиков с первых дней имели тенденцию к снижению (Р<0,001). Значительное уменьшение частоты дыхательных движений у козлят-гипотрофиков в первые часы жизни свидетельствует о наличии значительных изменений в дыхательной системе (наличие застойных и ателектических очагов в легких, недоразвитости мышц грудной клетки и т. д.), все это, несомненно, приводит к гипоксическим явлениям в организме.

Данные морфологического состава крови козлят-гипотрофиков в сравнении с нормотрофиками показывают, что количество гемоглобина в первый день у гипотрофиков всех степеней этот показатель был несколько ниже. Сравнение содержания гемоглобина в крови у нормотрофиков и гипотро-фиков показывает, что имеющаяся разница статистически достоверна (Р<0,001). Такая закономерность сохранялась до двухмесячного возраста козлят.

Изменения количества эритроцитов в крови козлят-нормотрофиков и гипотрофиков повторяют в некоторой степени динамику содержания гемоглобина. Количество лейкоцитов в крови козлят в период новорожденности имеет широкое индивидуальное колебание в пределах 7,8–14,2 тыс/мм3. У козлят-нормотрофиков повышенное содержание лейкоцитов в крови отмечается на пятый день жизни (14,2±0,38 тыс/мм3), по сравнению с их количеством при рождении — 12,03±0,30 тыс/мм3. К 15-дневному возрасту количество лейкоцитов в крови козлят-гипотрофиков всех групп снижается по сравнению с их количеством при рождении (Р<0,001), и уже в первые часы жизни наблюдаются различия в показателях содержания лейкоцитов у козлят различных групп.

В 60-дневном возрасте содержание лейкоцитов в крови козлят в группах с гипотрофией было значительно ниже, чем в группе козлят-нормотрофиков.

Изменение соотношения лейкоцитарных клеток у козлят-гипотрофиков, по сравнению с таковыми у нормотрофиков, в период новорожденности, по нашим данным, имеет некоторые особенности, характеризующие общее состояние организма в целом и защитные силы в частности. У козлят-гипотрофиков снижалось количество базофилов на 0,5 %, а у козлят с III степенью гипотрофии в период до 60-дневного возраста их вообще не обнаружено. У козлят со II и III степенями гипотрофии эозинофилы появляются только к 30-м дням жизни.

С возрастом число нейтрофилов начинает снижаться, в то время как уровень лимфоцитов неуклонно растет. Темп этих двух взаимообусловленных процессов у различных групп козлят имеет уже существенные различия. Так, у козлят-нормотрофиков соотношение нейтрофилов к лимфоцитам изменяется в пользу последних (52,8 против 44,7 %). В то время как рост соотношения нейтрофилов с лимфоцитами у козлят-гипотрофиков значительно задерживается. Значительные сдвиги, связанные с возрастом, наблюдали мы и в соотношении отдельных форм нейтрофилов в крови козлят-гипотрофиков.

В первые три дня жизни достоверные различия в содержании палочкоядерных форм нейтрофилов отмечаются только в группе козлят с гипотрофией III степени (16,4±1,6 против 10,8±0,4 % у нор-мотрофиков). В динамике содержания количества сегментоядерных нейтрофилов прослеживается тенденция к снижению их у козлят всех групп. При рождении их количество колебалось у козлят-гипотрофиков в пределах 40–45 %, а к 60-дневному возрасту средние цифровые показатели их содержания по группам снизились до 25–30 %.

Моноциты не имели столь выраженных колебаний, как другие формы лейкоцитов, как у козлят-гипотрофиков, так и у козлят-нормотрофиков.

Биохимические показатели крови у козлят-нормотрофиков и гипотрофиков приведены в таблице 1. Содержание общего белка в сыворотке крови козлят-нормотрофиков составило 5,5±0,12 г %, а в группах козлят с гипотрофией, соответственно, I степени — 4,12±0,16 г%, II степени — 4,08±0,10 г%, III степени — 4,02±0,51 г%. Содержание альбуминовой фракции у козлят-нормотрофиков составило 41,5±0,31 %, а по группам козлят с гипотрофией, соответственно, I степени — 40,4±0,24 %, II степени — 39,6±0,35 %, III степени — 36,8±0,42 %.

Таблица 1

Иммунобиохимические показатели крови у козлят-нормотрофиков и гипотрофиков

Показатели	Нормотрофики	Гипотрофики I степени	Гипотрофики II степени	Гипотрофики III степени	Р≤
Общий белок, %	5,5±0,12	4,12±0,16	4,08±0,10	4,02±0,51	0,05
Сахар, мг%	44,1±1,25	35,6±0,10	34,0±0,12	31,0±0,05	0,05
Неорг. фосфор, мг%	10,2±0,21	8,8±0,12	7,0±0,44	6,1±0,16	0,05
Кальций, мг%	11,7±0,05	9,4±0,20	8,9±0,07	7,3±0,24	0,05
Резервная щелочность, об% СО 2	42,8±1,36	22,7±0,41	20,1±0,05	18,6±0,32	0,05
Альбумин, г%	41,5±0,31	40,4±0,24	39,6±0,35	36,8±0,42	0,05
Гамма-глобулины, %	39,1±2,31	18,5±1,43	17,5±2,42	15,0±1,51	0,05
Т-лимфоциты, %	40,8±3,42	33,4±1,62	20,6±2,72	17,5±1,32	0,001
В-лимфоциты, %	25,7±1,22	13,2±2,53	12,5±1,21	8,5±1,42	0,05

В 60-дневном возрасте разница в относительном содержании альбуминов в сыворотке крови козлят-гипотрофиков и нормотрофиков еще более увеличивается (Р<0,05).

Существенные различия в содержании гамма-глобулинов в сыворотке крови у козлят-нормотрофиков и гипотрофиков отмечались при рождении. В среднем их количество у козлят-нормотрофиков в этот период равнялось 39,1±2,31 %, а у козлят с гипотрофией, соответственно, I степени — 18,5±1,43 %, II степени — 17,5±2,42 %, III степени — 15,0±1,51 % (Р<0,05).

Содержание сахара в крови по группе козлят-нормотрофиков составило в период новорожден-ности 44,1±1,25 мг%, а в группах козлят с гипотрофией, соответственно, I степени — 35,6±0,10 мг%, II степени — 34,0±0,12 мг%, III степени — 31,0±0,05 % (Р<0,05).

В 60-дневном возрасте разница в содержании сахара в крови козлят-гипотрофиков I степени и нормотрофиков максимально уменьшается, а в остальных группах этот показатель еще более увеличивается (Р<0,05).

Содержание неорганического фосфора у новорожденных козлят-нормотрофиков составляет 10,2±0,21 мг%, а у козлят-гипотрофиков I степени — 8,8±0,12 мг%, II степени 7,0±0,44 мг%, III степени 6,1±0,16 мг% (Р<0,05).

В дальнейшем количество неорганического фосфора в сыворотке крови козлят всех групп идет к снижению.

Количество общего кальция в первый день у козлят-нормотрофиков колебалось в пределах 11,7±0,05 мг%, а гипотрофиков было в пределах от 7,30±0,24 до 9,40±0,20 мг%, т. е. достоверная разница составила (Р<0,05). К 60-дневному возрасту данные показатели у козлят-гипотрофиков значительно уменьшились.

Резервная щелочность сыворотки крови у козлят-нормотрофиков в первый день составляла 29,08±1,30 об% СО 2 , а затем ее концентрация постепенно нарастала и к 30-дневному возрасту составила 42,8±1,36 об% СО 2 (Р<0,05). В группе козлят с гипотрофией колебалась в пределах 18,6±0,32 до 22,7±0,41 об% СО 2 (Р<0,05).

Заметное изменение нами установлено в иммунологических показателях крови. По результатам иммунологических исследований крови у козлят-нормотрофиков и гипотрофиков можно заключить, что к 60-дневному возрасту количество Т-лимфоцитов в крови козлят с гипотрофией второй и третьей степени снизилось.

Количество В-лимфоцитов у козлят-нормотрофиков с возрастом имело тенденцию к повышению: от 23,4±1,12 до 25,7±1,22 %, а в группе козлят-гипотрофиков, наоборот, к снижению: I степени — 13,2±2,53 %, II степени — 12,5±1,21 %, III степени — 8,5±1,42 %.

В оценке морфофункциональной зрелости органов новорожденных животных большое значение имеет определение их абсолютной и относительной массы.

В этой связи нами проведены взвешивания паренхиматозных органов (сердца, печени, легких, селезенки, почек) и эндокринных желез (поджелудочная, щитовидная железы и надпочечники) у коз-лят-нормотрофиков и гипотрофиков в сравнительном аспекте.

Результаты исследования внутренних органов у козлят-нормотрофиков показали, что абсолютная масса сердца значительно больше, чем у козлят с гипотрофией I степени — 19,5 %, II степени — 28,7 %, III степени — 38,4 %. Так, у козлят с гипотрофией I степени — в пределах 0,85 %, II степени — 0,90 %, III степени — 0,92 %, тогда как у козлят-нормотрофиков — 0,80 %.

Абсолютная масса легких у козлят-нормотрофиков в первые дни жизни колебалась в пределах 23,5±0,5 г, а у козлят с гипотрофией I степени — 22,4±0,2 г, II степени — 16,5±0,2 г, III степени — 13,2±0,2 г. Существенные сдвиги отмечались при определении относительной массы легкого у козлят — нормотрофиков и гипотрофиков, соответственно, 22,6–22,08 %.

Абсолютная масса печени показывает, что в начале болезни у козлят с гипотрофией I степени абсолютная масса данного органа значительно ниже, чем у козлят-нормотрофиков, и разница составляет 6,4±0,0,05 г. Эти показатели у козлят с гипотрофией второй и третьей степени возрастают и достигают 12,1±0,16 — 14,9±0,14 г. Относительная масса печени у козлят-гипотрофиков по сравнению с козлятами-нормотрофиками меньше на 0,24 %.

Абсолютная масса селезенки у козлят-гипотрофиков уменьшается с развитием болезни. В начале болезни I и II степени колебалась, соответственно, в пределах 1,04±0,02 — 0,85±0,04 г, а III степени — 0,68±0,05 г.

Существенных изменений в относительной массе селезенки у козлят-нормотрофиков и гипотро-фиков не установили.

Исследования показали, что абсолютная масса поджелудочной железы у козлят-нормотрофиков была в пределах 1,34±0,03 г. Эти показатели у козлят-гипотрофиков в зависимости от степени болезни постепенно уменьшаются и доходят до 0,86±0,04 г. Относительная масса поджелудочной железы у козлят-гипотрофиков тоже изменяется, но в сторону увеличения, и составляет в пределах 0,12 % против 0,10 % у козлят-нормотрофиков. Это говорит о неравномерном морфофункциональном изменении поджелудочной железы у козлят-гипотрофиков.

Абсолютная масса надпочечников у козлят-нормотрофиков равна 0,14±0,04 г, а у козлят-гипотрофиков постепенно уменьшается до 0,06±0,01 г. Независимо от уменьшения абсолютной массы надпочечников у козлят-гипотрофиков относительная масса органа почти одинаковая во всех степенях болезни.

Абсолютная величина щитовидной железы у козлят-гипотрофиков значительно ниже, чем у коз-лят-нормотрофиков. По мере развития болезни данный орган уменьшается от 0,23±0,01 г до 0,15±0,01 г. Относительная масса органа имеет значение, равное всего 0,02 %.

Патологические изменения органов показывают, что козлята-гипотрофики, погибшие в первые дни жизни, имеют низкую упитанность. Скелетная мускулатура дряблая, бледно -красного цвета. Суставы, сухожилия и связки без изменений. В подкожной клетчатке жировые отложения почти полностью отсутствует, и только у отдельных животных отмечается повышенная влажность тканей сальника и наличие около 25–50 мл прозрачной бесцветной жидкости. Серозные покровы влажные, мягкие, блестящие.

Легкие не спавшиеся. Окрашены неоднородно. На разрезе ткань легкого влажная, стекает кровянистая, слизистая масса. Консистенция легких дряблая.

Сердце незначительно увеличено, верхушка его закруглена. Неравномерно окрашена в серокоричневый цвет. На разрезе стенка сердца серо-желтоватого цвета, дряблой консистенции, влажная, отмечается отек эндокарда.

В печени постоянно и четко выраженные изменения. Макроскопически орган в той или иной степени уменьшен в объеме. Капсула напряжена, края притуплены. Часто отмечаются резкие напряжения в самой выпуклой части правой доли.

Поджелудочная железа расслаблена, капсула и междольковые перегородки отечны и гипереми-рованы. Иногда отмечаются кровоизлияния. Железистые ацинусы не всегда полностью дифференцированы. Местами в дольках ацинусы отсутствуют, ткань представлена крупными, изолированными, беспорядочно расположенными эпителиальными клетками с округлыми ядрами. Встречаются очаги микронекроза железистого эпителия с явлениями кариорексиса.

Щитовидная железа бледно-красного цвета, иногда с кровоизлияниями. Под микроскопом видно, что не всегда фолликулы содержат коллоид с умеренным числом резорбционных вакуолей. Коллоид бледно-розовый.

Надпочечники часто гиперемированы за счет утолщения коркового слоя. Они полнокровны. В капсуле, в клубочковой, пучковой и сетчатой зонах нередки кровоизлияния, иногда обширных размеров. Излившаяся кровь раздвигает клеточные комплексы.

Заключение

При оценке морфофункциональной зрелости органов новорожденных животных выявлено увеличение абсолютной массы сердца. Анализ относительной величины органа показывает, что по мере углубления патологического процесса она растет неравномерно. Абсолютная масса легких, печени, селезенки, поджелудочной железы уменьшается.

Относительная масса поджелудочной железы у козлят-гипотрофиков увеличивается и составляет в пределах 0,12 % против 0,10 % у козлят-нормотрофиков. Это говорит о неравномерном морфофункциональном изменении поджелудочной железы у козлят-гипотрофиков.

Заметное изменение нами установлено в иммунологических показателях крови. По результатам иммунологических исследований крови у козлят-нормотрофиков и гипотрофиков можно заключить, что к 60-дневному возрасту количество Т-лимфоцитов в крови козлят с гипотрофией второй и третьей степени снизилось. Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов в крови свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета в организме.

В результате морфологических и гистологических исследований паренхиматозных органов и эндокринных желез у козлят-гипотрофиков нами установлены дистрофические изменения в паренхиматозных органах и ателектазы в легких.