К механизму гематотоксического действия паклитаксела (митотакса)

Актуальность. Изучаемый в работе препарат Паклитаксел (Митотакс, Dr. Reddy’s Laboratories, Индия) относится к группе таксанов – противоопухолевых агентов природного происхождения прямого действия на цитоплазматические мишени (микротрубочки). Таксаны, нарушая динамическое равновесие между основными ингредиентами микротубулярного аппарата, препятствуют делению клеток. Так-саны являются фазоспецифическими (митогенными) цитостатиками, действующими на клетки опухоли в G2/М фазе клеточного цикла. В клинической практике таксаны применяются в режиме монотерапии или в комбинации с цисплатином (при раке яичников и немелкоклеточном раке легких) или с доксорубицином (при раке молочной железы). Наиболее важными побочными проявлениями химиотерапии таксанами являются миелотоксичность (развитие нейропении, тромбоцитопении и анемии), нейротоксичность, кардиотоксичность, гиперчувствительность к препарату.

Цель работы . Изучить ранние и отдаленные реакции кроветворных и лимфоидных органов экспериментальных животных на введение Митотакса и оценить механизм его гематоток-сического действия.

Материал и методы. Эксперименты проведены на 59 белых беспородных крысах и 44 мышах линии СВА/CaLac (питомник НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН). Митотакс вводили однократно в МПД: крысам внутривенно в дозе 4,6 мг/кг, мышам внутрибрюшинно в дозе 40,0 мг/кг. Контрольным животным вводили физиологический раствор. У крыс и мышей в ранние сроки (через 6, 24, 48 ч и на 5-е, 14-е сут после введения препарата) и у крыс в поздние сроки (на 90-х сут) в периферической крови определяли показатели форменных элементов на гематологическом анализаторе Abacus («Diatron», Австрия). После эвтаназии у животных определяли показатели костного мозга, тимуса и селезёнки (общее количество клеток и цитограмму). Цитологические препараты окрашивали азур II-эозином по Нохту. Для исследования цитогенетических особенностей действия препарата у мышей изучали состояние хромосом метафазных пластинок клеток костного мозга (% поврежденных метафаз, аберраций хромосом, полиплоидных клеток). Для анализа хромосомных повреждений в клетках костного мозга отбирали неразрушенные клетки (по 50–100 метафаз) округлой формы с хорошим разбросом хромосом, без наложений, с модульным числом (40). В периферической крови определяли содержание эритроцитов с микроядрами (‰), анализируя 5-6 тыс. клеток. Результаты обрабатывали с использованием критерия Вилкоксона–Манна–Уитни.

Результаты. Через 6 ч после введения ми-тотакса у крыс и мышей наблюдалось увеличение числа митозов клеток гранулоцитарного и эритроидного ростков кроветворения в костном мозге, в тимусе – митозов лимфоцитов и процента клеток с признаками апоптоза. Препарат приводил к развитию гипоплазии костного мозга за счет снижения содержания незрелых и зрелых гранулоцитов, эритронормобластов и лимфоцитов как у крыс, так и у мышей. В периферической крови отмечено развитие умеренной панцитопении: гипопластической анемии (снижение гемоглобина, эритроцитов и ретикулоцитов), нейтропении, лимфоцитопе-нии, тромбоцитопении. При исследовании лим- фоидных органов у животных опытных групп наблюдалось снижение массы тимуса и селезенки максимально на 5-е сут. В тимусе и селезенке отмечалось снижение числа лимфоцитов. В поздние сроки исследования (90-е сут) у крыс отмечается ускоренная возрастная инволюция тимуса, снижение содержания лимфоцитов в периферической крови и в костном мозге.

На цитогенетических препаратах костного мозга мышей через 24 ч после введения ми-тотакса наблюдалось статистически значимое увеличение структурных нарушений хромосом в метафазных пластинках за счет хроматидных разрывов. Начиная с 6 ч после введения препарата, значительно возрастал процент полиплоидных (4n) клеток, максимум их отмечен через 48 ч. Количество эритроцитов периферической крови с микроядрами достоверно увеличилось, начиная с 6 ч после введения митотакса, и сохранялось приблизительно на таком уровне до 14-х сут. При микроскопическом исследовании мазков крови отмечались эритроциты с крупными микроядрами, появление которых связывают с патологией деления клетки, то есть с геномными нарушениями.

Выводы. Таким образом, основными токсическими воздействиями митотакса на систему крови на ранних сроках исследования явились развитие гипоплазии костного мозга, снижение количества лимфоцитов в лимфоидных органах. Препарат вызывал увеличение числа митозов в костном мозге и в тимусе и процента клеток с признаками апоптоза, что может свидетельствовать об усилении процессов, ведущих к гибели клеток крови. В периферической крови наблюдалась панцитопения, которая сохранялась на протяжении всего периода исследования. Митотакс увеличивал уровень структурных и геномных нарушений в клетках костного мозга, что подтверждает действие препарата на процессы динамической реорганизации сети микротрубочек, необходимых для нормальных клеточных функций.