К вопросу фаготипирования листерий

Для оценки пригодности этого метода B. Ralovich [3] исследовал литическую модель 247 штаммов Listeria, выделенных из разных источников – людей, животных, воды – в Венгрии. Было типировано 39,6% всех штаммов. Такой результат несколько низок, поэтому для использования этого метода требуется больше фагов. В последующих исследованиях использовались 27 фагов Listeria и определили 34 литические модели.

Было типировано 36 (40,9%) из 88 штаммов Listeria серотипа 1/2 а, а остальные представляли 14 типов фагов. 77,7% из 18 штаммов были отнесены к серотипу 4. Они принадлежали к 10 типам фагов. 3 штамма L.monocytogenes серотипа 5 можно было разделить на 2 типа фагов, 2 из них с одной и той же литической моделью были выделены в Венгрии, третий с другим типом фага выделен в Болгарии. 36 штаммов принадлежали к серотипу 6а и 6в.

Литическую модель можно было определить у 20 штаммов, 16 штаммов остались нетипируемыми. 20 штаммов можно было распределить на 10 типов фагов. Кроме того, были исследованы еще 18 других штаммов Listeria. Не было определено к каким серотипам, сероварам они принадлежали. Можно было определить литическую модель 7-ми из всех штаммов.

Результаты свидетельствуют о том, что между антигенной структурой и фаговым типом данного штамма Listeria существует специфическая связь.

Когда данные типирования фагов венгерских штаммов Listeria сравнивают с таковыми французских штаммов, оказывается, что соотношение типи-руемых и нетипируемых штаммов различно в двух странах (табл. 1).

Таблица 1 – Cоотношение типируемых и нетипируемых штаммов листерий в двух странах [3]

∗ - разница значительна, ∗∗ - разница незначительна; X²=7,186 p < 0,01

Эти результаты позволяют допустить, что между штаммами Listeria могут существовать небольшие различия в разных странах, чему можно приписать патологические и эпидемиологические различия.

• S. Ortel [6] тоже использовал систему типирования фагов и обнаружил, что эпидемиологическая ситуация и литическая модель штаммов Listeria, выделенных в течение 1957-1979 гг. в Германии, изменилось. Кроме того, ежегодно менялась частота обнаружения Listeria с одним и тем же типом фага.

J. McLauchlin, A. Audurier, A.G. Taylor [7] исследовали штаммы L.monocytogenes , выделенные в период 1967 – 1984 от 475 человек, зараженных листериозом, отнесенные к одной из трех серогрупп (1/2, 3 или 4). Штаммы были фаготипированны при помощи 28 фагов для выявления трех аспектов эпидемиологии листериоза. У троих пациентов, страдающих листериозом, от 3 месяцев до 2 лет, были обнаружены штаммы одной и той же серогруппы, неразличимые типированием. Имело место десять случаев возможной перекрестной инфекции между парами новорожденных в одной больнице; первый ребенок заболевал в день рождения или на следующий день после него, а второй ребенок заболевал через 8-12 дней после контакта с первым. В каждой паре L. monocytogenes принадлежали к одной серогруппе и были неразличимы типированием.

Три группы случаев, возможно, были вызваны типичным источником инфекции. Штаммы L. monocytogenes в 10 из 11 случаев листериоза в области Карлайл в июле-декабре 1981 принадлежали к одной серогруппе; девять штаммов являлись нетипи-руемыми. Вторая группа случаев включала взрослых людей, находившихся в больнице, и третью пару – новорожденных детей, которые заболели вскоре после рождения. В каждой группе штаммы принадлежали к одной серогруппе и были неразличимы типи-рованием. Авторы предполагают возможность общего источника инфекции, т.к. два последних случая зафиксированы в короткий временной период, когда было выделено необычайно высокое количество штаммов листерий, которые не различались фаготи-пированием.

M.J. Loessner, M. Busse [8] была создана схема ти-пирования бактериофагов для выделения изолятов Listeria из молочных и других пищевых продуктов. Для типирования было использовано 16 изолятов фа- гов выделенных из природных источников и из лизогенных штаммов. Согласно их литическим спектрам, изоляты были разделены на четыре группы. До сих пор наблюдалась 41 четкая модель (структура) лизиса, когда данный набор был использован в типирова-нии 57 определенных эталонных штаммов, представляющих пять утвержденных видов и 16 серогрупп в дополнение к 454 изолятам Listeria преимущественно пищевого происхождения. В целом, типируемость составляла 84,5 %; т.е., штамм был лизирован не менее чем одним фагом при 100 % типовом тестовом спаде. Штаммы, принадлежащие к серовару 3, были в основном сопротивляемы к лизису внесенных фагов. Результаты оказались высоко воспроизводимыми, что было подтверждено посредством ретипиро-вания несколько недель спустя. Некоторые фаги, изолированные из природных источников, показали более широкий литический спектр, чем фаги, изолированные из лизогенных штаммов. В соответствии с этим, фаги были обнаружены в различных кластерах в созданной компьютером карте систем связи. Видовая специфичность и сероварная специфичность литической реакции не была выявлена. Ни один из фагов не был способен лизировать штаммы L.grayi, L.murrayi или Jonesia denitrificans. Система фаготи-пирования может предоставить важную информацию для способов обнаружения и устранения источников контаминации вида Listeria в оборудовании молочных заводов.

Система типирования J. McLauchlin, A. Audurier, A.G. Taylor [9] для штаммов L.monocytogenes основывается на литических способностях 28 фагов и была проанализирована при помощи ряда штаммов, изолированных в Соединенном Королевстве, и проверена на «слепом эксперименте». Система оказалась высоко воспроизводимой и избирательной. 64 % из проверенных штаммов удалось типировать.

Комбинированный анализ (N. van der Mee-Marquet, A. Audurier [5]) 5179 фаговых реакций 20 штаммов L.monocytogenes на протяжении 14 лет и результаты фаготипирования 2659 и более штаммов L.monocytogenes позволили оценить специфичность литического спектра и разнообразие литических реакций 35 фагов. Данное исследование включало 26 фагов, рекомендованных для международного метода типирования фагов, разработанного в 1985 году J. Rocourt [et al]. Авторами внесены предложения для модификации системы с целью производства опти-    лиз вспышек, может оказать неоценимую помощь мального набора бактериофагов для рутинного ис-    при установлении связи между отдельными вспыш- пользования.                                        ками и спорадическими случаями болезни, а также

Таким образом, метод фаготипирования позволяет    при выявлении источника возбудителя инфекции.

проводить более глубокий эпидемиологический ана- der Mee-Marquet, A. Audurier // Appl. Environ. Microbiol. – 1995. – Vol. 61, N 1. – P. 303 – 309.