К вопросу о частоте клинически значимых мутаций в генах EGFR и KRAS при немелкоклеточном раке легкого у пациентов Алтайского края

Рак легкого в структуре онкологической заболеваемости по Алтайскому краю в 2015 году у мужчин уверено занимает лидирующую позицию. К немелкоклеточному раку легкого (НМРЛ) относится 80–85% случаев рака легкого. Одними из самых изученных генетических повреждений при НМРЛ являются мутации в гене EGFR. Исследование статуса мутаций гена EGFR для определения чувствительности НМРЛ к таргетной терапии тирозинкиназными ингибиторами успешно внедрено в клиническую практику. Помимо генетических повреждений вышеуказанного гена при НМРЛ также встречаются с относительно большой частотой мутации в гене KRAS, которые чаше выявляются при раке легких курильщика. Мутации в 2 экзоне гена KRAS хорошо изучены при колоректальном раке и являются противопоказанием к назначению моноклональных антител против лигандсвязы-вающего домена EGFR. Также мутации гена KRAS считаются маркерами резистентности НМРЛ к лечению ингибиторами тирозинкиназ. Обращает на себя внимание возрастание актуальности изучения частоты и спектра мутаций в гене KRAS при НМРЛ в связи с бурным изучением новых таргетных препаратов, направленных на данные генетические поломки.

Цель. Оценка частоты встречаемости клинически значимых мутаций в генах EGFR и KRAS при немелкоклеточном раке легкого среди разных групп пациентов КГБУЗ «Алтайский краевой онкологический диспансер».

Материалы и методы. Материалом для определения мутаций в гене EGFR и KRAS послужила ДНК выделенная из ткани с НМРЛ, фиксированная в 10% нейтральном забуференном формалине от 6 до 24 часов и заключённая в парафин. Ткань, из которой выделялась ДНК, верифицировалась патоморфологом, проводилась оценка характера опухоли, количества опухолевой ткани в материале, при необходимости выполнялась макродиссекция нужного фрагмента. Выделение ДНК из ткани производили с помощью набора FFPE QIAGEN по протоколу производителя на автоматической станции для выделения нуклеиновых кислот и белков QIAcube(QIAGEN). Определение мутаций в генах EGFR, KRAS проводили методом аллель-специфичной ПЦР в режиме реального времени. Реакции и анализ результатов проводили на аппарате SFX 96 («BIORAD», США) по протоколам производителей реактивов. Гистологический диагноз аденокарцинома установлен у 174 больных (87,4%), плоскоклеточная карцинома у 24 (12,1%), крупноклеточный рак у 1 (0,5%). Статус курения у больных не учитывался. Среди пациентов было 60(30.2%) женщин и 139 (69,8%) мужчин. Образцы были исследованы на наличие 29 соматических мутаций в гене EGFR и 7 в гене KRAS. В гене EGFR исследованы: T790M, 19 делеций в 19 экзоне, L858R, L861Q, G719S, G719A, G719C, S768I, 3 инсерции в 20 экзоне. В 2 экзоне гена KRAS оценивался статус мутаций G12A, G12C, G12D, G12R, G12S, G12V, G13D.

Результаты. Мутации гена EGFR выявлены в 20 случаях (10%) только среди аденокарцином. У мужчин мутация в гене EGFR обнаружена в 5 случаях (3,5%), из них: 2 – делеции в 19 экзоне, 2 – точечные замены L858R, 1- L861Q. У женщин мутация в гене EGFR обнаружена в 15 случаях (25%), из них:

XX РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС • ПОСТЕРЫ

РАК ЛЕГКОГО

6 – делеций в 19 экзоне, 8 – точечных замен L858R, 1 – инсер-ция в 20 экзоне. Мутации G719S, G719A, G719C, S768I гена EGFR не встречались в нашей группе пациентов.

Мутации гена KRAS выявлены в 34 случаях (17%), также только среди аденокарцином. У мужчин мутация в гене KRAS обнаружена в 28 случаях (20%), у женщин в 6 (10%). Преобладали – G12C и G12V; G12C выявлена у 19(56%) из 34 пациентов, G12V обнаружена в 6(18%) наблюдениях, на долю других исследованных мутаций в гене KRAS (G12A, G12D, G13D) приходилось 26%. Мутации G12S и G12R не встречались в нашей выборке пациентов.

Не обнаружены мутации гена KRAS и EGFR в других гистологических разновидностях НМРЛ при исследовании данной группы пациентов.

Выводы. Мутации в генах EGFR и KRAS встречались только среди аденокарцином легких. Мутации гена EGFR выявлены в 20 случаях (10%) и достоверно чаще встречались у женщин (p<0,045). Частота встречаемости клинически значимых мутаций в гене EGFR среди пациентов КГБУЗ АКОД с аденокарциномой легкого мужского пола составила 3,5% и 25% среди женского пола. Мутантный статус гена KRAS выявлен у 17% больных и достоверно чаще встречался у мужчин (p<0,001). Наличие мутаций гена KRAS отмечалось только в сочетании с диким типом гена EGFR.