К вопросу о мерах обеспечения безопасности на объектах общественного транспорта в условиях пандемии covid-19, вызванной новым коронавирусом sars-cov-2: сравнение вирулицидного действия дезинфектантов

Так случилось, что в XXI веке трем крайне опасным коронавирусам удалось пересечь видовой барьер, а именно SARS-CoV (severe acute respiratory syndrome coronavirus – в дословном переводе с англ. – коронавирус, вызывающий тяжелый острый респираторный синдром), MERS-CoV (Middle-East respiratory syndrome coronavirus – в дословном переводе с англ. – коронавирус, вызывающий ближневосточный респираторный синдром) и SARS-CoV-2 – коронавирус, вызвавший пандемию атипичной пневмонии COVID-19 [1, 2].

Коронавирус SARS-CoV возник в китайской провинции Гуандун в 2002 году и распространился на пять континентов, поразив 8098 человек и вызвав 774 смертельных случая. Коронавирус MERS-CoV появился в 2012 году на Аравийском полуострове в Саудовской Аравии, где он по-прежнему является одной из основных проблем общественного здравоохранения, и был завезен в 27 стран. Им были заражены в общей сложности 2494 человека, из которых умерли 858 человек. Ранее неизвестный коронавирус, получивший название SARS-CoV-2, был обнаружен в декабре 2019 года в столице китайской провинции Хубэй – городе Ухане, – и был секвенирован и изолирован к январю 2020 года [1, 2].

Коронавирус SARS-CoV-2 вызвал пандемию атипичной пневмонии Covid-2019, которая, по состоянию на 2 июня 2020 г., охватила все континенты, поразила 6 194 533 человек, унесла жизни 376 320 человек. Всемирная организация здравоохранения объявила пандемию Covid-19 чрезвычайной ситуацией в области общественного здравоохранения, имеющей глобальное международное значение [3].

Очевидно, что все объекты общественного транспорта (автобусы, вагоны электропоездов, метро, трамваи, троллейбусы, электробусы, морские и речные суда, самолеты, такси, здания аэропортов, вокзалов, вестибюли метро и т.д.) являются объектами повышенного риска в распространении новой коронавирусной инфекции, прежде всего, из-за массового скопления людей, поскольку в замкнутых помещениях довольно трудно обеспечить социальное дистанцирование, во-вторых, из-за поверхностей, к которым часто прикасаются люди, – ручки, поручни, перила, спинки сидений, пряжки ремней безопасности, выключатели, автоматы по продаже билетов и жетонов, валидаторы и т.д. С другой стороны, также очевидна невозможность прекращения транспортной деятельности по причине ее острой необходимости и социальной значимости.

Для снижения риска распространения опасного инфекционного заболевания и обеспечения безопасности водителей, обслуживающего персонала и пассажиров транспортные предприятия в России и за рубежом проводят дезинфекцию транспорта несколько раз в день с использованием дезинфицирующих растворов [4-6]. Используемые дезинфицирующие препараты должны, безусловно, обеспечивать надежную защиту от вируса и в то же время быть безопасными для людей и не портить обрабатываемые поверхности, приводя к их преждевременному износу.

Целью настоящего обзора явился анализ публикаций, посвященных изучению вирули-цидного действия дезинфицирующих субстанций и препаратов в отношении группы коронавирусов и их потребительских свойств с точки зрения их применимости для проведения текущей дезинфекции на объектах общественного транспорта.

Характеристика нового коронавируса SARS-CoV-2

Коронавирусы имеют сферическую форму, их размер составляет приблизительно 125 нм в диаметре, на поверхности расположены шипы (рис. 1), создающие видимость солнечной короны [1, 2]. По этой причине эта группа вирусов и получила такое название.

Рисунок 1 – Строение коронавируса

Спирально симметричный нуклеокапсид находится внутри липопротеиновой внешней оболочки, что, на самом деле, является редкостью среди положительных РНК-вирусов [1, 2].

Размер генома варьируется от 26 до 32 тысяч пар оснований, т.е. коронавирусы имеют самый большой геном среди РНК-вирусов [1, 2]. Геном и структура вируса SARS-CoV-2 является типичной для этой группы вирусов [1, 2].

Порядок дезинфекционной обработки общественного транспорта

Ежедневная дезинфекция общественного транспорта (автобусов, троллейбусов, электробусов, вагонов трамваев и метро) должна проводиться на специализированных постах дезинфекции, оборудованных в моечных блоках, не реже двух раз в сутки (т.е. по окончании каждой смены) после предварительной мойки.

При выполнении всех видов длительных рейсов (воздушным, автобусным, железнодорожным, водным транспортом), рекомендуется каждые два часа проводить дезинфекционную обработку контактных поверхностей в помещениях общего пользования, в т.ч. в помещениях для приготовления/приема пищи и туалета с использованием зарегистрированных в установленном порядке и разрешенных для применения на этом виде транспорта дезинфицирующих препаратов.

Для проведения текущей дезинфекции поверхностей салонов транспортных средств Роспотребнадзор РФ и санитарные службы других стран [7, 8] рекомендуют использовать зарегистрированные в установленном законодательством порядке хлорсодержащие препараты (натриевую соль дихлоризоциануровой кислоты в концентрации активного хлора в рабочем растворе не менее 0,06 %, хлорамин Б в концентрации активного хлора в рабочем растворе не менее 3,0 %), перекись водорода с концентрацией не менее 3,0 %, четвертичные аммониевые соединения (ЧАСы) с концентрацией действующего вещества в рабочем растворе не менее 0,5 %, третичные амины в концентрации в рабочем растворе не менее 0,05 %, полимерные производные гуанидина в концентрации в рабочем растворе не менее 0,2 %. Также можно применять спиртовые растворы с содержанием спирта не менее 70 % в качестве кожных антисептиков и дезинфицирующих средств для обработки небольших по площади поверхностей.

Сравнительный анализ дезинфектантов по вирулицидной активности в отношении коронавирусов

Вирулицидная активность биоцидных агентов оценивается двумя стандартными методами: суспензионным методом и методом нанесения на тест-объекты (поверхности) [8, 9]. В РФ еще широко применяется метод батистовых тест-объектов [8].

Суспензионный тест процедурно более легкий, но в то же время некоторые специалисты считают его менее надежным, чем тест, основанный на обработке тест-объектов [9], при котором биологический материал сначала наносится на поверхность, потом высушивается при комнатной температуре, а затем обрабатывается раствором дезинфектанта.

Поскольку в естественной среде патогены адсорбируются на различных поверхностях, зачастую загрязненных органическими и прочими остатками, считается, что результаты испытаний с использованием метода нанесения на тест-объекты c белковой нагрузкой более адекватны для прогнозирования активности химических биоцидов в полевых условиях [9].

В соответствии с отечественными методическими рекомендациями [8], вирулицидное дезинфицирующее средство (субстанция) должно подавлять инфекционность обязательных для испытаний тест-вирусов – полиовируса и аденовируса на исследуемых объектах не менее, чем на 4 log ТЦИД 50 8 (т. е. степень инактивации должна быть не менее 99,99 %), в зарубежной литературе дезсредства признаются эффективными при подавлении инфекционности вируса более, чем на 3 log ТЦИД 50 [9-17].

В марте 2020 года в научном журнале Journal of Hospital Infection вышла обзорная статья G. Kampf [10], посвященная анализу эффективности дезсредств в отношении группы коронавирусов и основанная как на результатах собственных предыдущих работ [11, 12], так и на работах других ученых [13, 14] – всего в списке литературы упоминается 41 публикация.

Авторы пришли к выводу о том, что вирусы SARS-CoV, MERS-CoV, SARS-CoV-2 могут сохраняться на бумаге и алюминии в течение 2-8 часов, на пластике, стали, керамике, стекле – до 5-9 дней. Авторы также утверждают, что коронавирус может быть легко инактивирован этанолом (при содержании спирта более 62 %), перекисью водорода в концентрации 0,5 мас. %, раствором гипохлорита натрия в концентрации 0,1 % в течение 1 минуты. Однако такие биоцидные вещества, как четвертичное аммониевое соединение (ЧАС) алкилдиметилбензиламмония хлорид в концентрациях 0,05-0,2 % и хлоргексидина биглюконат в концентрации 0,02 % не обладают достаточным вирулицидным действием в отношении коронавирусов. В то же время авторы указывают на большую противоречивость данных об эффективности ЧАСов в отношении инактивации коронавирусов.

В связи с этой публикацией в научном сообществе разгорелась полемика, в редакцию журнала поступило письмо-опротестование [15], в котором справедливо отмечается, что статья G. Kampf и коллег была опубликована без рецензирования и что представленная в ней информация противоречива сама по себе и противоречит официальным рекомендациям. Применение дезинфицирующих средств на основе ЧАС для дезинфекции в условиях распространения COVID-19 было официально рекомендовано властями большинства стран. Например, в США в список разрешенных дезинфицирующих средств для использования против SARS-CoV-2 (по состоянию на апрель 2020 г.) включено 370 препаратов, из которых 171 (48 %) содержат в качестве действующих веществ только ЧАС и еще 33 дезсредства содержат ЧАС и другие биоциды [16].

Полемика была поддержана и в других публикациях [17].

Дело в том, что ЧАСы, относящиеся к классу катионных поверхностно-активных веществ, являются «мягкими» дезинфектантами, они менее токсичны для людей, чем составы на основе соединений хлора или альдегидов [1821], не обесцвечивают и не вызывают преждевременную коррозию обрабатываемых поверхностей, как соединения хлора и перекиси, что делает их весьма привлекательными с точки зрения потребительских свойств. Наличие биоцидного действия, с одной стороны, и несомненные потребительские преимущества, с другой, привели к широкому применению дезинфицирующих препаратов на основе ЧАС как в медицинской практике, так и в быту, например, 0,3 % растворы ЧАС часто используются в качестве пропитывающих растворов дезинфицирующих салфеток.

В табл. 1 представлены данные о виру-лицидной активности ЧАС в отношении коронавирусов [10, 17].

Таблица 1 – Оценка вирулицидной активности ЧАС и хлоргексидина биглюконата по результатам испытаний разных исследовательских групп [10, 17]

Действ. в-во*	Конц-ия, мас. %	Метод тест-ия**	Вирус	Экспозиция	Подавление инфек-цион-ти	Вирулицид-ная активность
АДМБАХ	0,04	МНТО	HCoV	1 мин	3,0	-
АДМБАХ, HCl	0,04/pH 1,0	МНТО	HCoV	1 мин	>3,0	+
АДМБАХ, этанол	0,04/70	МНТО	HCoV	1 мин	>3,0	+
АДМБАХ	0,2	СМ	HCoV	10 мин	0	-
АДМБАХ	0,05	СМ	CCoV	10 мин	>3,7
АДМБАХ	1,0	СМ	SARS-CoV	5-30 мин	Подавление репликации, сохранение интактной РНК	+
Microbac forte (АДМБАХ)	0,5	СМ	SARS-CoV	30, 60 мин	>6,13	+
Kohrosolin FF (АДМБАХ)		СМ	SARS-CoV	30, 60 мин	>3,75	+
ХГБГ	0,008	МНТО	HCoV	5 мин	<3,0	-
ХГБГ, этанол	0,008/ 70	МНТО	HCoV	5 мин	>3,0	+
ХГБГ, АДМБАХ	0,008/ 0,058	МНТО	HCoV	10 мин	4,0	+
ДДДМАХ	0,0025	СМ	CCoV	3 дня	>4,0	+
АДМБАХ	0,00175	СМ	CCoV	3 дня	3,0	-
АДМБАХ, этанол		СМ	MHV	30 с	>3,0	+

Примечания: * АДМБАХ – алкилдиметилбензиламмония хлорид, ДДДМАХ – дидецилдиметиламмония хлорид, ХГБГ – хлоргексидина биглюконат; ** СМ – суспензионный метод, МНТО – методом нанесения на тест-объекты; *** HCoV – Human Coronavirus; SARS-CoV – Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus; CCoV – Canine Coronavirus; MHV – coronavirus Mouse Hepatitis V irus.

Анализ этих данных свидетельствует о явно недостаточной изученности вирулицид-ного действия ЧАС и хлоргексидина биглюконата в отношении группы коронавирусов. Во-первых, большинство этих результатов были получены более 15 лет назад [10, 17], и испытания были выполнены в отношении алкилдиме-тилбензиламмония хлорида. Исследования, проведенные разными авторами противоречивы: одни авторы установили, что это вещество не обладает достаточным вирулицидным действием в отношении коронавирусов в концентрации 0,002-0,2 мас. %, в то же время в работе [22] была продемонстрирована его эффективность в концентрации 0,05 % при 10-минутной экспозиции, в другой – в концентрации 0,5 % при экспозиции 30 мин [10, 17]. Отдельного внимания заслуживает исследование, выполненное в 2004 г. Ansaldi и коллегами [23], в ходе которого они проанализировали эффективность ал-килдиметилбензиламмония хлорида в отношении SARS-CoV и доказали, что 1%-ый раствор этого вещества в течение 5 мин. подавляет репликацию, в то же время методом обратной полимеразно-цепной реакции ими было установлено, что интактная РНК SARS-CoV оставалась на поверхности в течение 30 мин. после обработки. И здесь возникает вопрос, является ли сама по себе интактная РНК без оболочки инфекционным агентом или нет?

Информация о вирулицидном действии в отношении коронавирусов более современного и более эффективного ЧАС дидецилдиме-тиламмония хлорида пока что практически отсутствует.

Следует отметить, что во всех публикациях подтверждается эффективность комбинированных препаратов, в состав которых кроме ЧАС входят более сильные дезинфицирующие субстанции (альдегиды, третичные амины, полигуанидины).

Заключение

Практика дезинфекционной обработки общественного транспорта и объектов транспортной инфраструктуры стала императивом в период пандемии COVID-19 и останется таковой и в посткоронавирусный период и, безусловно, имеет важное значение в формировании доверия пассажиров к общественному транспорту.

А перед обществом встает вопрос о поиске золотой середины по принципу необходимости и достаточности. С одной стороны, очевидна необходимость усиления дезинфекционной обработки транспорта и объектов транспортной инфраструктуры с целью недопущения распространения крайне опасного инфекционного заболевания COVID-19. C другой стороны, необходимо помнить, что чрезмерное употребление дезинфицирующих средств в неоправданно высоких концентрациях может приводить к целому ряду нежелательных последствий – проявлению аллергических реакций у людей, обесцвечиванию и преждевременной коррозии обрабатываемых поверхностей, а постоянное использование дезпрепаратов – к появлению резистентных патогенных микроорганизмов, – не секрет, что наличие внутрибольничных устойчивых штаммов является серьезной проблемой медицинских учреждений.