Количественное определение гидроксикоричных кислот и динамика их накопления в траве девясила британского

Девясил британский ( Inula britannica L. ) относится к роду I nula L. семейства Астровые ( Asteraceae ), подсемейства астровые ( Asteroideae ). В России распространен на юге европейской части, на Северном Кавказе и в Западной Сибири. В Средней России встречается в черноземной полосе [6]. Девясил британский широко распространен в Волгоградской области и в ряде случаев выступает как ценозообразующее растение на солонцеватых суходольных лугах и лиманах, в степях.

Надземная часть растения содержит 0,008— 0,1 % эфирного масла, в состав которого входят сесквитерпены, а также сапонины, алкалоиды, ароматические соединения (изобутират 10-гидрокси-8,9-эпокситимола), дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты, кумарины (эскулетин, скопо-летин), флавоноиды, тритерпеноиды, стероиды (β-резастерол, ψ-тараксастерол, стигмастерол) [2].

Сесквитерпены представлены бициклическими сесквитерпеноидами — сесквитерпеновыми лактонами, флавоноиды — флавонами и флавонолами, среди фенолкарбоновых кислот преобладает кофейная [2].

Девясил британский используется в традиционной китайской медицине в форме настоя надземной части или цветков как отхаркивающее средство [7]. В монгольской медицине трава применяется как тонизирующее, общеукрепляющее, повышающее сопротивляемость организма, стимулирующее обмен веществ. В тибетской медицине надземная часть находит применение при желудочных коликах, злокачественных опухолях. Сок из свежесобранных растений обладает проти-вокашлевым, местным ранозаживляющим свойствами; экстракт, эфирное масло — антибактериальными свойствами [2].

Все вышеизложенное свидетельствует о том, что девясил британский представляет определенный интерес для медицинской практики и перспективен для использования в качестве источника получения новых фитопрепаратов.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Количественное определение гидроксикорич-ных кислот в траве девясила британского (Inula britannica L.) , произрастающего в Волгоградской области.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследования выступала трава девясила британского, заготовленная в фазу полного цветения (июль-август 2010—2011 гг.) от дикорастущих популяций во Фроловском районе Волгоградской области. Все использованные в работе реактивы имели степень чистоты ч.д.а.

Определение количественного содержания гидроксикоричных кислот в надземной части девясила британского проводили методом спектрофотометрии [5].

Измельченное сырье 2,0 г помещали в колбу объемом 200 мл и добавляли 70 мл воды. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на водяной бане на протяжении 15 минут. Экстракцию повторяли дважды. Экстракты охлаждали и фильтровали через бумажный фильтр. Извлечения количественно переносили в мерную колбу объемом 200 мл и доводили объем раствора водой до метки (раствор А) [5].

В мерную колбу объемом 50 мл вносили 1 мл раствора А и доводили объем раствора 20 % этанолом до метки.

Оптическую плотность полученного раствора измеряли при длине волны 325 нм, которая является аналитической для кофейной кислоты. Раствором сравнения служил 20 % этанол [5].

Содержание суммы гидроксикоричных кислот (X, %) в пересчете на кофейную кислоту расчитывали по формуле:

А • 200 • 50 • 100

Х =------х-------------------,

Е ІСМ • m • V a • (100 - W)

где Ах — оптическая плотность исследуемого раствора;

Е ¹ _1с ^% _м — удельный показатель поглощения кофейной кислоты при 325 нм = 782;

m — масса навески исследуемого сырья, г;

Va — объем аликвоты, мл;

W — влажность, %.

Статистическая обработка результатов химического эксперимента проводилась согласно ОФС 42-0111-09 «Статистическая обработка результатов химического эксперимента» и включала проверку однородности выборки, с последующим вычислением базовых статистических показателей, характеризующих вариационные ряды, с использованием пакета программ Statistica 6.0 (StatSoft, США) и Excel 2000 (MS Office 2000, США).

Валидация методики определения гидроксико-ричных кислот в траве девясила британского выполнена в соответствии с рекомендациями [1, 4] по следующим характеристикам: правильность, прецизионность, специфичность, линейность, аналитическая область (диапазон применения).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Статистическая обработка данных шести параллельных измерений показала, что количественное содержание гидроксикоричных кислот в траве девясила британского в пересчете на кислоту кофейную (4,56 ± 0,05) %. Ошибка единичного измерения равна 2,80 % (табл. 1—4).

ТАБЛИЦА 1

Результаты количественного определения гидроксикоричных кислот в траве девясила британского в пересчете на кислоту кофейную

№ серии	Оптическая плотность (А)	Содержание гидроксикоричных кислот в пересчете на кислоту кофейную (Х), %	Метрологические характеристики
1	0,332	4,556	S = 0,003
2	0,335	4,597	S X =
3	0,329	4,515	0,00001
4	0,337	4,625	Ах = 0,003
5	0,328	4,501	е, % = 1,09
6	0,331	4,543	е ед.опр. ,% =
Х	0,332	4,556	2,80

ТАБЛИЦА 2

Результаты количественного определения гидроксикоричных кислот в траве девясила британского в пересчете на кофейную кислоту в период бутонизации

№ серии	Оптическая плотность (А)	Содержание гидрокси-коричных кислот в пересчете на кислоту кофейную (Х), %	Метрологические характеристики
1	0,323	4,433	S = 0,0007
2	0,324	4,446	S X =
3	0,324	4,446	0,0000006
4	0,323	4,433	А х =
5	0,325	4,460	0,0007
6	0,324	4,446	е , % = 0,24
X	0,324	4,440	е ед.опр. ,% = 0,63

ТАБЛИЦА 3

Результаты количественного определения гидроксикоричных кислот в траве девясила британского в пересчете на кофейную кислоту в период цветения

№ серии	Оптическая плотность (А)	Содержание гидроксикоричных кислот в пересчете на кислоту кофейную (Х), %	Метрологические характеристики
1	0,366	5,023	S = 0,001
2	0,367	5,037	S X =
3	0,367	5,037	0,000001
4	0,367	5,037	Δх = 0,001
5	0,368	5,050	ε, % = 0,30
6	0,369	5,064	ε ед.опр. ,% =
X	0,367	5,043	0,76

ТАБЛИЦА 4

Результаты количественного определения гидроксикоричных кислот в траве девясила британского в пересчете на кофейную кислоту в период плодоношения

№ серии	Оптическая плотность (А)	Содержание гидроксикоричных кислот в пересчете на кислоту кофейную (Х), %	Метрологические характеристики
1	0,375	5,146	S = 0,001 S X = 0,000001 Δх = 0,001 ε, % = 0,27 ε ед.опр. ,% = 0,70
2	0,375	5,146
3	0,376	5,160
4	0,377	5,174
5	0,377	5,174
6	0,377	5,174
X	0,376	5,160

Статистическая обработка данных шести параллельных измерений показала, что количественное содержание гидроксикоричных кислот в траве девясила британского в период бутонизации в пересчете на кофейную кислоту составило (4,44 ± 0,001) %; в период цветения — (5,04 ± 0,01) %; в период плодоношения — (5,16 ± 0,01) %. Ошибка единичного измерения равна 0,63 %, 0,76 % и 0,70 % в период бутонизации, цветения и плодоношения соответственно (рис.).

Рис. Динамика накопления гидроксикоричных кислот в надземной части девясила британского

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Определено количественное содержание гидро-ксикоричных кислот в надземной части девясила британского и изучена сезонная динамика их накопления в зависимости от фазы вегетации. Максимальное количество гидроксикоричных кислот в траве девясила британского накапливается в период цветения (5,04 ± 0,01) % и плодоношения (5,16 ± 0,01) %. Ошибка единичного измерения — 0,76 и 0,70 % соответственно. Таким образом, оптимальными сроками заготовки травы девясила британского с учетом максимального накопления гидроксикоричных кислот являются периоды цветения и плодоношения.

Кроме того, нами была проведена валидацион-ная оценка методики количественного определения гид-роксикоричных кислот в результате чего установлено, что все значения проверенных показателей укладываются в допустимые пределы, методика валидна по показателям специфичность, линейность и аналитическая область методики, правильность и воспроизводимость и может быть использована для количественного определения гидроксикоричных кислот в исследуемом сырье — траве девясила британского.