Количественное определение ряда маркеров сыворотки крови без ее предварительного фракционирования с использованием особенностей взаимодействия трипсина с альфа-2-макроглобулином человека методом MALDI-MS

Автор: Протасов А.В., Тараскин А.С., Забродская Я.А., Бубляев Р.А., Новикова Л.Н., Миргородская О.А.

Журнал: Научное приборостроение @nauchnoe-priborostroenie

Рубрика: Приборостроение для биологии и медицины

Статья в выпуске: 2 т.29, 2019 года.

Бесплатный доступ

Концентрация альфа-2-макроглобулина (α2-MG) в сыворотке может значительно варьироваться при ряде заболеваний, поэтому количественное определение этого белка используется в диагностике. Рутинные иммунологические или ферментативные методы определения концентрации α2-MG в сыворотке довольно сложны. Методы требуют специфических антител или измерения скорости гидролиза конкретных субстратов и не отличают свободную форму α2-MG от связанной. Мы предлагаем новый масс-спектрометрический подход для идентификации и количественного определения некоторых биомаркеров сыворотки крови на основе структурно-функциональных характеристик взаимодействия α2-MG с трипсином, характеризующегося отщеплением пептида VGFYESDVMGR. Была разработана методика изотопного обмена (18О) для приготовления внутреннего стандарта, включая прямой изотопный обмен в сыворотке крови. Количественный потенциал предлагаемой методики превращает масс-спектрометрию (MALDI) в подходящий и эффективный инструмент для диагностики воспалительных процессов...

Еще

Альфа-2-макроглобулин, количественная масс-спектрометрия, биомаркеры, сывороточный амилоид а, альфа-1-антитрипсин

Короткий адрес: https://sciup.org/142218219

IDR: 142218219   |   DOI: 10.18358/np-29-2-i3043

Список литературы Количественное определение ряда маркеров сыворотки крови без ее предварительного фракционирования с использованием особенностей взаимодействия трипсина с альфа-2-макроглобулином человека методом MALDI-MS

  • Sottrup-Jensen L. Alpha-macroglobulins: structure, shape, and mechanism of proteinase complex formation//Journal of Biological Chemistry. 1989. Vol. 264, no. 20. P. 11539-11542.
  • Borth W. Alpha 2-macroglobulin, a multifunctional binding protein with targeting characteristics//FASEB Journal. 1992. Vol. 6, no. 15. P. 3345-3353.
  • Barrett A.J., Starkey P.M. α2-Macroglobulin with proteinases. Characteristics and specificityof the reaction, and a hypothesis concerning its molecular mechanism//Biochemical Journal. 1973. Vol. 133. P. 709-724.
  • Веремеенко K.H., Голобородько О.П., Кизим А.И. Протеолиз в норме и при патологии. Киев: Здоровье, 1988. 200 с.
  • Toropygin I.Yu., Mirgorodskaya O.A., Moshkovskii S.A., Serebryakova M.V., Archakov A.I. Controlled trypsinolysis of human cancer and non cancer sera for direct matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry//International Journal of Mass Spectrometry. 2012. Vol. 325-327. P. 121-129.
  • Rehman A.A., Ahsan H., Khan F.H. α-2-Macroglobulin: a physiological guardian//Journal of Cellular Physiology. 2013. Vol. 228, no. 8. P.1665-1675
  • DOI: 10.1002/jcp.24266
  • Веремеенко К.Н., Кизим А.И., Досенко В.Е. α2-Макроглобулин: структура, физиологическая роль и клиническое значение//Лаб. диагностика. 2000. № 2. С. 3-9.
  • Barrett A.J. α2-Macroglobulin//Methods in Enzymotogy/Lorand L., ed. Academic, New York, 1981. Vol. 80, P. 737-754.
  • Swenson R.P., Howard J.B. Structural characterization of human alpha2-macroglobulin subunits//Journal of Biological Chemistry. 1979. Vol. 254, no. 11. P. 4452-4456.
  • Ho A.S., Cheng C.C., Lee S.C., Liu M.L., Lee J.Y., Wang W.M., Wang C.C. Novel biomarkers predict liver fibrosis in hepatitis C patients: alpha 2 macroglobulin, vitamin D binding protein and apolipoprotein AI//Journal of Biomedical Science. 2010. 17:58
  • DOI: 10.1186/1423-0127-17-58
  • Sampsonas F., Karkoulias K., Kaparianos A., Spiropoulos K. Genetics of chronic obstructive pulmonary disease, beyond a1-antitrypsin deficiency//Current Medical Chemistry. 2006. Vol. 13, no. 24. P. 2857-2873.
  • Козьмин Ю.П., Манойлов А.В., Серебрякова М.В., Миргородская О.А. Прямое введение изотопов О18 в пептиды и белки для количественного анализа методом масс-спектрометрии//Биоорганическая химия. 2011. Т. 37, № 6. С. 793-806.
  • van Leuven F., Torrekens S., Overbergh L., Lorent K., de Strooper B., van den Berghe H. The primary sequence and the subunit structure of mouse alpha-2-macroglobulin, deduced from protein sequencing of the isolated subunits and from molecular cloning of the cDNA//European Journal of Biochemistry. 1992. Vol. 210, no. 1. P. 319-327.
  • Пурмаль А.П. Эмпирическая кинетика (формальная феноменологичсекая кинетика). Учебное пособие. Москва: МФТИ, 2000. 80 с.
Еще
Статья научная