Комбинированное использование фосфатидилэтанола и теста Audit в скрининге злоупотребления алкоголем

Актуальность. Злоупотребление алкоголем является одним из главных факторов высокого уровня преждевременной смертности [2, 9]. Важной стратегией снижения уровня связанных с алкоголем проблем является ранняя диагностика злоупотребления алкоголем [5], особенно среди молодых групп населения [3, 4]. В настоящее время основным способом скрининга считается использование опросников, преимуществами которых является простота в применении, низкая затратность и быстрое получение результатов [19]. «Золотым стандартом» опросника считается тест AUDIT, разработанный экспертами ВОЗ для скрининга распространенности связанных с алкоголем проблем среди лиц, обратившихся за помощью к специалистам первичного медицинского звена [5].

Существенным недостатком самоотчетов, ограничивающим их использование, является низкая валидность в силу недостаточной искренности респондентов [19]. Для оценки надежности самоотчетов потребления алкоголя часто используется прямой биохимический маркер злоупотребления алкоголем фосфатидилэтанол (ФЭ), который представляет собой абнормальный глицерофосфолипид, образующийся в различных тканях в присутствии этанола из фосфолипида клеточной мембраны фосфатидилхолина [7, 10, 13]. Имеющиеся данные говорят о преимуществе ФЭ по сравнению с другими биохимическими маркерами в детекции хронического злоупотребления алкоголем, поскольку он обладает высокой чувствительностью и специфичностью [14, 18, 21].

Литературные данные относительно согласованности результатов оценки уровня связанных с алкоголем проблем с помощью биохимических маркеров и инструментов скрининга достаточно противоречивы. В ряде работ была показана конкордантность теста AUDIT и содержания ФЭ в крови [8, 11, 12, 20], в то время как согласно результатам других исследований, корреляция между результатами самоотчетов и биохимическими маркерами слаба [15, 16], либо отсутствует [1]. Исследований по изучению возможности использования ФЭ в качестве биохимического маркера злоупотребления алкоголем в Беларуси ранее не проводилось. Целью настоящей работы была оценка конкордантности концентрации ФЭ в крови и самоотчетов потребления алкоголя.

Материал и методы. Определена концентрация ФЭ в 136 образцах крови мужчин в возрасте 18-65 лет. Кровь была получена из лаборатории медицинского консультативного центра Гродненского государственного медицинского университета (г. Гродно, Беларусь), куда она поступила для рутинного биохимического анализа. Непосредственно перед забором крови клиентам предлагалось заполнить опросник AUDIT. Определение концентрации ФЭ осуществляли с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии – тандемной масс-спектрометрии (ВЭЖХ – МС). Под систему Agilent 1260 Infinity II на колонке ZORBAX EclipsePlus C18, 1,8 μm, 2,1x50 мм в паре с трехквадрупольным масс-анализатором Agilent 6420 LC/TQ применен обращенно-фазовый метод разделения. Температура колонки 50 °C, температура авто самплера +4 °C, Объём образца 10 мкл. Промывочный раствор изопропанол/метанол 1:1. Подвижная фаза А (изопропанол/метанол/вода 5:1:4) с добавкой 5 мМ формиата аммония и 0,1% муравьиной кислоты. Подвижная фаза В (изопропанол/вода 99:1) с добавкой 5 мМ формиата аммония и 0,1% муравьиной кислоты. Скорость потока 0,350 мл/мин. Параметры масс-анализатора QQQ: режим работы ESI – отрицательный, напряжение капилляра 4500 В, температура источника 300 °C, газ соударения (азот) 0,019Па. Режим сканирования 50-1000 m/z. MRM реакции (m/z) для ФЭ-16:0/18:1 (701,7→281,2). Потенциал декластеризации -60 В, коллизионная энергия -35 В.

Дискриминация по уровню потребления алкоголя осуществлялась согласно следующим пороговым уровням концентрации ФЭ: абстиненты<0-20 нмоль/мл); умеренно пьющие: 21-217,54 нмоль/мл; злоупотребляющие алкоголем: > 217,55нмоль/мл). Статистическая обработка данных (описательная статистика, корреляционный анализ Спирмана) производилась с помощью программы «Statistica 10.0» (StatSoft, Inc., США). При анализе показателей, выборочные дисперсии которых имели выраженную не гомогенность, использовали непараметрический дисперсионный анализ Краскела-Уоллеса.

Результаты и обсуждение. Средняя концентрация ФЭ в крови мужчин составила 136,42± 19,07 нмоль/мл; минимальная концентрация – 6,28 нмоль/мл; максимальная концентрация – 1238,78; медиана выборки – 42,27 (-23,19/+146,72) нмоль/мл. Удельный вес абстинентов составил 20,59% (средняя концентрация ФЭ-15,67±0,93 нмоль/мл); удельный вес умеренно пьющих – 37,04% (средняя концентрация ФЭ - 99,88±7,24 нмоль/мл); удельный вес злоупотребляющих алкоголем – 16,3%

(средняя концентрация ФЭ - 546,13±63,54 нмоль/мл) (таблица1).

Таблица 1 – Дискриминация по уровню потребления алкоголя на основании пороговых концентраций ФЭ (нмоль/мл)

Группы	№	%	Среднее	Ст. ошибка	Медиана	Q25	Q75
Абстиненты	28	20,59	15,67	0,74	16,31	13,43	18,60
Умеренно пьющие	86	63,24	69,57	5,72	45,70	28,25	97,23
Злоупотребляющие	22	16,30	546,13	63,54	437,19	307,10	695,56

Распределение по уровню потребление алкоголя согласно общему баллу теста AUDIT оказалось следующим: абстиненты – 17,86%; умеренно пьющие – 69,64%; злоупотребляющие алкоголем – 12,5%. Полученные данные говорят о том, что удельный вес абстинентов, также как и удельный вес злоупотребляющих алкоголем, оцененный с использованием биохимического маркера оказался выше, чем оцененный на основании самоотче-тов. Удельный вес абстинентов, оцененный с помощью биохимического маркера, вероятнее всего, несколько завышен вследствие отсутствия четкого порога концентрации ФЭ для дискриминации между абстинентами концентрацией ФЭ и количеством стандартных доз алкоголя, выпиваемого в течение одной выпивки, обнаружено не было (г = 0,05; p < 0,637) (рисунок 3).

Таблица 2 – Частота употребления алкоголя и концентрация ФЭ (нмоль/мл).

Частота употребления	Среднее	Ст. ошибка	Медиана	Q 25	Q 75
Один раз в месяц и реже	73,9	35,0	23,2	17,5	28,2
2-4 раза в месяц	122,2	31,3	52,5	28,9	115,7
2-3 раза в неделю	118,1	29,3	45,2	24,6	145,6
4 и более раз в неделю	117,5	32,0	138,3	17,7	212,1

Одним из базовых диагностических симптомов алкогольной зависимости является утрата способности контролировать количество выпиваемого алкоголя [8]. Проведенный анализ показал отсутствие связи между концентрацией ФЭ и утратой способности контролировать количество выпиваемого алкоголя (г = 0,1; p < 0,072). Наличие алкогольного абстинентного синдрома свидетельствует о сформировавшейся физической зависимости от алкоголя и является ключевым критерием в диагностике алкогольной зависимости [9]. Корреляционный анализ не выявил статистически значимой связи между концентрацией ФЭ и наличием абстинентного синдрома (r = 0,05; p < 0,243). Суммарное количество баллов и умеренно пьющими.

Дискриминация по уровню потребления алкоголя с использованием концентрации ФЭ показала, что удельный вес мужчин, злоупотребляющих алкоголем относительно высок. Данный факт подчеркивает актуальность проведения мероприятий в рамках государственной антиалкогольной политики. Важным критерием оценки уровня связанных с алкоголем проблем является частота употребления алкоголя [9]. Корреляционный анализ не выявил связи между концентрацией ФЭ и частотой употребления алкоголя (r = 0,07; p<0,634) (рисунок 1). Поскольку распределение концентрации ФЭ не соответствует критерию нормальности, для анализа данных был применен дисперсионный анализ, результаты которого показали наличие статистически значимой связи между концентрацией ФЭ и частотой употребления алкоголя (таблица 2, рисунок 2).

Количество стандартных доз алкоголя, выпиваемого в течение одной выпивки, характеризует стиль потребления алкоголя [9]. Употребление в течение одной выпивки более 5 стандартных доз алкоголя (интоксикационно-ориентированный стиль) сопряжено с высоким риском, так называемых, острых связанных с алкоголем проблем [5]. Статистически значимой связи между

Рисунок 1 – Диаграмма рассеивания: связь между частотой употребления алкоголя и концентрацией ФЭ в крови

Рисунок 2 – Диаграмма размаха: связь между частотой употребления алкоголя и концентрацией ФЭ в крови

Рисунок 3 – Диаграмма рассеивания: связь между количеством стандартных доз алкоголя, выпиваемого в течение одной выпивки и концентрацией ФЭ в крови

Рисунок 4 – Диаграмма рассеивания: связь между суммой баллов теста AUDIT и концентрацией ФЭ

теста AUDIT считается важным критерием, характеризующим уровень связанных с алкоголем проблем [18]. Статистически значимой связи между концентрацией ФЭ и суммой баллов согласно тесту обнаружено не было (r = 0,08; p < 0,653) (рисунок 4). В целом, сравнительный анализ результатов оценки распространенности злоупотребления алкоголем с помощью биохимического маркера и самоотчетов показал низкую конкордантность этих методов.

В кросс-культуральной перспективе наиболее адекватным является сравнение результатов настоящего исследования с результатами работ, проведенных в России. Исследование, в котором приняли участие пациенты с острой патологией, находившиеся на лечении в клиниках Москвы показало, что 33,5% мужчин находятся в зоне риска развития связанных с алкоголем проблем согласно тесту AUDIT, причем у 23,2% мужчин уровень ФЭ в крови превышал порог дискриминации между умеренным потреблением и злоупотреблением алкоголем [16]. Концентрация ФЭ в крови тесно коррелировала с результатами самоотчетов потребления алкоголя [16]. В более поздней аналогичной работе было установлено, что 66,7% мужчин злоупотребляют алкоголем согласно тесту AUDIT-QF, в то время как 48,9% мужчин были ФЭ-позитивными [15]. Была обнаружена слабая положительная связь между концентрацией ФЭ и количеством баллов согласно тесту (г = 0,366; p < 0,001) [15].

В исследовании с участием молодых ВИЧ-инфицированных женщин, проведенном в г. Санкт-

Петербург, была показана слабая конкор-дантность (r = 0,27) между концентрацией ФЭ и количеством порций алкоголя, выпитых в течение последних 30 дней согласно самоотчетам [17]. При этом 53% пациенток, отрицавших употребление алкоголя, были ФЭ-позитивны, что говорит о низкой надежности результатов самоотчетов. Результаты исследования, в котором приняли участие мужчины с алкогольным поражением печени, показали отсутствие связи между уровнем ФЭ в крови и результатами теста AUDIT [1].

Полученные нами данные согласуются с результатами большинства исследований, проведенных в России, в которых была показана низкая конкордантность между концентрацией ФЭ в крови и самоотчетами потребления алкоголя. Отсутствие согласованности между результатами оценки распространенности злоупотребления алкоголем с помощью биохимических маркеров и самоотчетов обусловлено склонностью населения бывших советских республик к занижению уровня связанных с алкоголем проблем в самоотчетах [19].

Заключение. Определение концентрации ФЭ в крови является более объективным и надежным способом диагностики злоупотребления алкоголем, нежели применение инструментов скрининга. Использование ФЭ в качестве биохимического маркера злоупотребления алкоголем может быть объективным диагностическим инструментом в случае недостаточной искренности респондентов при заполнении само-отчетов. Комбинированное применение самоотчетов и биохимических маркеров в диагностике связанных с алкоголем проблем является целесообразным при условии отсутствия диссимуляции вследствие социальной стигматизации.