Комплекс микроскопического экспресс-анализа для проведения медико-биологических исследований в натурных условиях

ходимо проведение патологоанатомического исследования экспериментальных биообъектов разных видов, составной частью которого является анализ гистологических препаратов критических органов, структур и тканей живого организма.

С целью методического обеспечения микроскопических исследований в натурных условиях разра- ботан комплекс экспресс-анализа гистологических препаратов.

Результаты. Комплекс микроскопического экс-пресс-анализа для проведения медико-биологических исследований в натурных условиях включает:

замораживающий микротом для получения тонких гистологических срезов [1–3];

комплект химреактивов и лабораторной посуды для окраски гистологических препаратов [4];

бинокулярные лупы с плавным увеличением и видеокамерами для просмотра объемного биоматериала и регистрации микроструктурных изменений. Осветительная система имеет шарнирную конструкцию, что позволяет проводить анализ при различных углах освещения для получения контрастных изображений всех структур препарата;

малогабаритный лабораторный микроскоп с набором объективов и съемной видеокамерой. Вместо отражающего зеркала была смонтирована осветительная система на многоколенчатом штативе, позволяющая проводить исследования в проходящем и отраженном свете. Для настройки резкости и совмещения оптических осей тринокулярной насадки и видеокамеры использовали подвижной переходник и удлинительные кольца. При этом камера может свободно вращаться, что позволяет выбирать нужный план для ввода изображения;

отоскоп для исследований в отраженном свете при 10-кратном увеличении. На отоскоп вместо ушных насадок закрепляли удлиненный тубус, что позволило фокусировать изображение на мониторе при контакте его основания с любой поверхностью, при этом площадь отображаемой поверхности увеличилась до 5 см2;

ноутбук с видеоадаптером (тв-тюнером) и программами видеозахвата и обработки изображений (рис. 1).

Проведение экспресс-анализа предусматривает оперативное приготовление биологических препаратов для микроскопического исследования и выявление значимых изменений с помощью оптических приборов. Аппаратура комплекса компактна и позволяет проводить быструю его разборку и сборку. Средства освещения препаратов закрепляют на гибких или шарнирных штативах.

При патологоанатомическом исследовании биообъектов разных видов помимо регистрации явных травматических и других органических повреждений основными диагностическими признаками при воздействии экстремальных факторов, в частности физической природы, являются проявления нарушений гемодинамики в крупных сосудах и в микро-циркуляторном русле центральной нервной системы и жизненно важных органов, приводящие к развитию тканевой гипоксии и снижению результативности оперантной деятельности и физической работоспособности у экспериментальных животных.

Микроскопические исследования микроциркуля-торного русла проведены на тотальных препаратах мозговых оболочек (рис. 2), сосудистых сплетений боковых желудочков головного мозга (окраска лейко-основанием Азур-II и солянокислым бензидином [1, 5, 6]) (рис. 3), слизистых оболочек барабанных полостей (рис. 4) и век глаз (рис. 5) биообъектов разных видов. Степень выраженности гипоксии ткани головного мозга экспериментальных животных оценивали с помощью импрегнации срезов азотнокислым серебром по Рио-Гортега [1, 4] для контрастного выявления нейроглиальных структур (рис. 6).

Морфометрическое исследование осуществляли с помощью методов и программных средств анализа изображений микроструктур клеток и микроциркуля-торного русла [7, 8].

Обсуждение. Подтверждение или уточнение наличия и степени выраженности заболеваний и пато-

Рис. 2. Сосудистая сеть мягкой мозговой оболочки кролика. Увеличение 10

Рис. 1. Комплекс микроскопического экспресс-анализа для проведения медико-биологических исследований в натурных условиях

Рис. 3. Сосудистое сплетение бокового желудочка головного мозга кролика. Полнокровие венозных и капиллярных сосудов. Окраска бензидином. Увеличение объектива 4

логических состояний с помощью микроскопического исследования гистологических и цитологических препаратов секционного или биопсийного материала является одним из наиболее объективных подходов диагностики в клинической и экспериментальной ме-

Рис. 4. Вскрытая барабанная полость кролика. Гиперемированные сосуды слизистых оболочек. Увеличение объектива 20

дицине [9–22]. Оборудование для проведения гистологических исследований предназначено в основном для работ в стационарных лабораторных условиях. При необходимости проведения микроскопических исследований гистологических препаратов, особенно в экспериментальных выездных работах, биологический материал обычно помещают в фиксирующие жидкости, жидкий азот и в транспортных контейнерах и других емкостях доставляют в лабораторию для последующей обработки и микроскопического анализа. С помощью предлагаемого комплекса микроскопический экспресс-анализ свежефиксированного и нефиксированного экспериментального гистологического материала может быть проведен непосредственно в натурных условиях.

Заключение. Комплекс микроскопического экс-пресс-анализа позволяет получать объективные количественные показатели, необходимые для диагностики степени выраженности и вероятностной оценки эффектов воздействий экстремальных факторов различной природы при выездных медико-биологических исследованиях.