Концентрация связанных с поверхностью клеток крови циркулирующих ДНК как прогностический фактор при раке легкого

НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск1

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, г. Новосибирск2

Актуальность. Рак легкого (РЛ) занимает лидирующие позиции как по числу заболевших в год, так и в структуре общей летальности от онкологических заболеваний у мужчин и диагностируется, как правило, на поздних стадиях. Известно, что выявление таранних форм злокачественного процесса существенно повышает эффективносить лечения. Иммунохимические и биохимические маркеры не обладают достаточной специфичностью и являются более информативными для мониторинга заболевания и оценки эффективности лечения, чем для ранней диагностики. Одним из перспективных маркеров, которые могут быть использованы для разработки ранней диагностики и прогнозирования течения рака легкого, являются циркулирующие ДНК крови (цирДНК).

Целью исследования является изучение циркуляции свободной и связанной с клетками крови циркулирующей ДНК в крови здоровых доноров и больных раком легкого и исследование взаимосвязи концентрации цирДНК с основными клинико-морфологическими факторами опухолевой прогрессии.

Материал и методы. В исследование было включено 12 здоровых доноров и 53 больных НМРЛ, находящихся на лечении в НИИ онкологии СО РАМН, с морфологически верифицированным диагнозом и операбельной формой (T _2-3 N _o-3 M _o ). Концентрацию цирДНК в плазме и элюатах с поверхности клеток крови оценивали методом ПЦР в режиме реального времени при сравнительном анализе количества повторяющихся последовательностей LINE-1 и однокопийного гена β-актина.

Результаты. При анализе концентрации по количеству фрагментов повторяющихся последовательностей LINE-1 показано, что средняя концентрация внДНК в плазме здоровых составляет 19,10 ± 4,06 нг/мл крови и не отличается от концентрации внДНК в плазме онкологических больных (11,80 ± 2,32 нг/мл крови), при этом концентрация внДНК, связанная с поверхностью форменных элементов при раке легкого, достоверно ниже, чем в норме (34,30 ± 4,37 нг/ мл и 128,70 ± 56,45 нг/мл крови соответственно, р=0,002). При анализе концентрации по количеству фрагмента однокопийного гена β-актина выявлены достоверные различия в количестве связанной с поверхностью клеток внДНК между группами пациентов с различным гистотипом рака легких, а именно при плоскоклеточном раке легкого и железистой аденокарциноме. Установлена зависимость концентрации связанной с клеточной поверхностью внДНК у больных НМРЛ с размером первичной опухоли и регионарным метастазированием. Концентрация связанной внДНК у больных T1-2 и без метастазов достоверно выше, чем у больных

Т3 с метастазами в регионарные лимфоузлы (р=0,018). Показана зависимость количества связанной внДНК с уровнем дифференцировки опухолевых клеток. При плоскоклеточным раке легкого с низкой степенью дифференцировки концентрация связанной внДНК составила 132,67±20,35, при умереннодифференцированном раке – 213,67±59,02 (р=0,027).

Выводы. Полученные данные позволяют предположить, что измерение концентрации цирДНК, связанной с поверхностью форменных элементов крови, может быть прогностическим фактором опухолевой прогрессии и может быть использовано для формирования групп риска развития данного заболевания.