The consensus estimation in silico of general safety of multi-target RAGE inhibitors

В настоящее время доказана определяющая роль рецепторов конечных продуктов гликирования (RAGE) и связанных с ними сигнальных путей в развитии осложнений сахарного диабета и ускорении болезни Альцгеймера [5, 8, 14]. Мультитаргетные ингибиторы RAGE, активные в отношении нескольких биомишеней сигнального пути RAGE–NF-kB, могут рассматриваться как весьма перспективные лекарственные вещества для лечения данных патологий.

Общепризнано, что лекарственные соединения не могут обладать сколько-нибудь выраженными токсическими свойствами. Таким образом, одной из актуальных задач при направленном поиске новых лекарственных препаратов для лечения осложнений при сахарном диабете и болезни Альцгеймера является оценка in silico токсикологических характеристик высоко активных RAGE-ингибиторов.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Консенсусный прогноз in silico спектра токсикологических ADMET-характеристик и расчет на их основе интегральных оценок общей безопасности соединений с возможной высокой мультитаргетной RAGE-ингибирующей активностью.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Десять веществ с ожидаемой высокой мультитаргетной RAGE-ингибирующей активностью были найдены с помощью ранее построенных классификационных моделей с применением докинга и технологии искусственных нейронных сетей среди 87 структурно разнородных соединений десяти различных химических классов [9]. В результате предварительно проведенных исследований in silico было установлено, что указанные десять соединений яв- ляются малотоксичными [1] и не обладают канцерогенностью [2].

Для этих 10 соединений был выполнен консенсусный прогноз следующих токсикологических свойств: острой токсичности (с уточнением оценок, ранее полученных в [1]), канцерогенности (с уточнением оценок, полученных в [2]), мутагенности, генотоксичности, гепатотоксичности, цитотоксичности, иммунотоксичности, кардиотоксичности, нефротоксичности, нейротоксичности, гематотоксичности и способности проникать через ГЭБ (влиять на ЦНС).

Прогноз указанных 12 токсикологических ADMET-характеристик для данных 10 соединений проводили с использованием четырех компьютерных систем Microcosm ADMET [1, 7], IT Microcosm [2, 7], PASS [3], QikProp [12] и семи on-line ресурсов admetSAR [4], ProTox [11], pkCSM [10], ADMET-PreServ [16], SwissADME [15], GUSAR [13], GEB [6].

Для каждого прогнозируемого соединения по каждой токсикологической ADMET-характеристике по каждому вычисляемому в используемой программе параметру этой характеристики, в соответствии с рассчитанным значением этого параметра, устанавливался индекс отсут-ствия/наличия данного токсического свойства: 0 – отсутствует; 1 – присутствует. Если в конкретной программе для данного токсического свойства рассчитывалось несколько параметров, то вычисляли консенсусный индекс отсут-ствия/наличия указанного токсического свойства, как среднее арифметическое единичных индексов отсутствия/наличия этого токсического свойства.

Ниже для каждой из 12 токсикологических ADMET-характеристик приведены программы, с помощью которых выполнялся прогноз, параметры, вычисляемые в каждой программе, а также граничные значения для индексирования расчетных величин каждого из ADMET-параметров.

• 1.    Острая токсичность (класс токсичности LD 50 перорально для крыс).

• 2.    Microcosm ADMET: «ATC»: "4, 5, 6" – 0; "1, 2, 3" – 1.

• 3.    admetSAR: «Acute Oral Toxicity (c)»: "IV, V, VI" – 0; "I, II, III" – 1.

• 4.    ProTox: «Predicted Toxicity Class»: "4, 5, 6" – 0; "1, 2, 3" – 1.

• 5.    pkCSM: «Oral Rat Acute Toxicity (LD 50 , mmol/kg)»: "LD 50 ·MW > 300" – 0; "LD 50 ·MW ≤ 300" – 1.

• 6.    GUSAR: «Rat Oral LD 50 Classification»: "Class 4, 5, 6" – 0; "Class 1, 2, 3" – 1.

• 7.    Канцерогенность.

• 8.    IT Microcosm: «И»: "N" – 0; "A" – 1.

• 9.    PASS: «Carcinogenic»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 10.    admetSAR: «Carcinogenicity (binary)»: "– " – 0; "+" – 1.

• 11.    ProTox: «Carcinogenicity»: "Inactive" – 0; "Active" – 1.

• 12.    Мутагенность.

• 13.    PASS: «Mutagenic»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 14.    admetSAR: «Ames mutagenesis»: "–" – 0; "+" – 1.

• 15.    ProTox: «Mutagenicity»: "Inactive" – 0; "Active" – 1.

• 16.    pkCSM: «AMES toxicity»: "No" – 0; "Yes" – 1.

• 17.    Генотоксичность.

• 18.    PASS: «DNA damaging»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 19.    admetSAR: «micronuclear»: "–" – 0; "+" – 1.

• 20.    Гепатотоксичность.

• 21.    PASS: «Hepatotoxic»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 22.    admetSAR: «Hepatotoxicity»: "–" – 0; "+" – 1.

• 23.    ProTox: « Hepatotoxicity»: "Inactive" – 0; "Active" – 1.

• 24.    pkCSM: «Hepatotoxicity»: "No" – 0; "Yes" – 1.

• 25.    Цитотоксичность.

• 26.    PASS: «Cytotoxic»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 27.    ProTox: «Cytotoxicity»: "Inactive" – 0; "Active" – 1.

• 28.    Иммунотоксичность.

• 29.    PASS: «Immunotoxin»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 30.    ProTox: «Immunotoxicity»: "Inactive" – 0; "Active" – 1.

• 31.    Кардиотоксичность.

• 32.    PASS: «Cardiotoxic»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 33.    admetSAR: «Human either-a-go-go inhibi-tion»: "-" – 0; "+" – 1.

• 34.    pkCSM: «hERG I inhibitor»: "No" – 0; "Yes" – 1.

• 35.    pkCSM: «hERG II inhibitor»: "No" – 0; "Yes" – 1.

• 36.    ADMET-PreServ: «hERG affinity (pK i )»: "pK i < 6, > 50 %" – 0; "pK i ≥ 6, ≤ 50 %" – 0.

• 37.    ADMET-PreServ: «hERG affinity (pIC 50 )»: "pIC 50 < 5, > 50 %" – 0; "pIC 50 ≥ 5, ≤ 50 %" – 0.

• 38.    QikProp: «HERG K+ Channel Blockage: log IC 50 »: "log IC 50 > –5" – 0; "log IC 50 ≤ –5" – 1.

• 39.    Нефротоксичность.

• 40.    PASS: «Nephrotoxic»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 41.    Нейротоксичность.

• 42.    PASS: «Neurotoxic»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 43.    Гематотоксичность.

• 44.    PASS: «Hematotoxic»: "P a < P i " – 0; "P a ≥ P i " – 1.

• 45.    Проникновение через ГЭБ, влияние на ЦНС.

• 46.    admetSAR: «Blood Brain Barrier»: "–" – 0; "+" – 1.

• 47.    pkCSM: «BBB permiability (log BB)»: "log BB < 0" – 0; "log BB ≥ 0" – 1.

• 48.    pkCSM: «CNS permiability (log PS)»: "log PS < 0" – 0; "log PS ≥ 0" – 1.

• 49.    SwissADME: «BBB permiant»: "No" – 0; "Yes" – 1.

• 50.    ADMET-PreServ: «Blood-brain barrier permiability (LogBB)»: "LogBB < 0" – 0; "LogBB ≥ 0" – 1.

• 51.    GEB: «LogBB»: "LogBB < 0" – 0; "LogBB ≥ 0" – 1.

• 52.    QikProp: «log BB for brain/blood»: "log BB < 0" – 0; "log BB ≥ 0" – 1.

• 53.    QikProp: «Predicted CNS Activity (– – to ++)»: "–, – –" – 0; "+/–, +, ++" – 1.

Консенсусная интегральная оценка общей безопасности каждого соединения рассчитывалась как среднее арифметическое консенсусных прогнозных индексных оценок 12 токсикологических ADMET-характеристик данного соединения, полученных с помощью 11 вышеуказанных компьютерных программ.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Десять веществ с ожидаемым выраженным мультитаргетным RAGE-ингибирующим действием были найдены с помощью нейросетевых моделей [9] при прогнозе уровней активности 87 новых соединений 10 различных химических классов.

В соответствии с результатами ранее выполненных исследований [1, 2], активные соединения, структуры которых представлены на рисунке, предположительно являются малотоксичными и не обладают канцерогенными свойствами.

OO

I

Рис. Структурные формулы веществ с RAGE-ингибирующей активностью

В таблице приведены значения консенсусных индексов отсутствия/наличия 12 различных видов ADMET-токсикологических свойств и консенсусные интегральные оценки общей безопасности Int соединений (I–X), полученные по данным прогноза с помощью 11 программных средств: Microcosm ADMET [1, 7], IT Microcosm [2, 7], PASS [3], QikProp [12], admetSAR [4], Pro-

Tox [11], pkCSM [10], ADMET-PreServ [16], SwissADME [15], GUSAR [13], GEB [6].

Шесть соединений (I–IV, VII, IX) имеют достаточно низкие значения интегрального показателя общей безопасности Int ≤ 0,25 (первая квартиль), что позволяет рассматривать их как весьма перспективные для дальнейшего углубленного изучения.

Консенсусные интегральные оценки общей безопасности высокоактивных RAGE-ингибиторов

Веще-	Консенсусные индексы ADMET-токсикологических показателей
ство	Acute	Carcino	Mutagen	Geno \	Hepato	Cyto	Immuno	Cardio	Nephro 1	Neuro 1	Hemato 1	BBBP	Int
I	0,20	0,00	0,00	0,50	0,50	0,00	0,50	0,20	0,00	0,00	0,00	0,17	0,17
II	0,00	0,00	0,00	0,50	0,50	0,00	0,50	0,40	0,00	0,00	0,00	0,17	0,17
III	0,00	0,00	0,00	0,50	0,50	0,00	0,50	0,30	0,00	0,00	0,00	0,33	0,18
IV	0,00	0,00	0,00	0,50	0,50	0,00	0,00	0,20	0,00	0,00	0,00	0,17	0,11
V	0,00	0,00	0,00	0,50	0,75	0,50	0,50	0,20	1,00	0,00	1,00	0,33	0,40
VI	0,00	0,00	0,00	0,50	0,75	0,50	0,50	0,20	1,00	0,00	1,00	0,17	0,38
VII	0,00	0,00	0,25	0,50	0,50	0,00	0,00	0,20	0,00	0,00	0,00	0,17	0,13
VIII	0,00	0,50	0,50	0,50	0,75	0,00	0,50	0,70	1,00	1,00	1,00	0,92	0,61
IX	0,00	0,00	0,25	0,50	0,25	0,00	0,50	0,70	0,00	0,00	0,00	0,67	0,24
X	0,00	0,25	0,50	0,50	0,75	0,00	0,50	0,70	0,00	0,00	0,00	0,50	0,31
I–IV, VII, IX	0,03	0,00	0,08	0,50	0,46	0,00	0,33	0,33	0,00	0,00	0,00	0,28	0,17
V, VI, X	0,00	0,08	0,17	0,50	0,75	0,33	0,50	0,37	0,67	0,00	0,67	0,33	0,36

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

• •    Для десяти высокоактивных мультитар-гетных RAGE-ингибиторов с помощью

одиннадцати компьютерных программ проведен консенсусный прогноз in silico двенадцати ADMET-токсикологических характеристик.

• •    По совокупности этих двенадцати прогнозных токсикологических показателей вычислены консенсусные интегральные оценки общей безопасности десяти указанных соединений.

• •    По значениям интегральных оценок общей безопасности отобраны девять соединений, рекомендованных для дальнейшего экспериментального исследования, с целью создания на их основе принципиально новых лекарственных веществ для лечения патий при сахарном диабете и болезни Альцгеймера.

Исследование выполнено при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект 18-015-00499).