Контроль за развитием злокачественного роста по содержанию антиапоптозных белков и морфологии эритроцитов

клональные антитела «Monoclonal Anti-BCL-2 clone10C4», второго антитела – меченный пероксидазой хрена иммуноглобулин anti-rabbit IgG («Sigma»).

Метод АСМ был использован нами для количественной оценки индивидуальных размерных параметров эритроцитов мышей с последующей статистической обработкой.

Работу проводили на приборе SOLVER P47 SMENA, на частоте 150 кГц в полуконтактном режиме, с использованием кантилевера NSG 11. Анализ АСМ имиджей и статистическая обработка результатов проводилась с помощью программ Image Analyzis и Statistica 6.

Результаты. Обнаружено, что через 14 суток после трансплантации опухолевых клеток начинается снижение содержание антиапоптозного белка Bcl-2, а через 30 суток этот параметр падает приблизительно вдвое и вскоре происходит гибель животных. Методом АСМ обнаружено, что на последней стадии процесса роста опухоли происходит снижение среднего объема эритроцитов (нормоцитов). В то же время появляется большое количество других форм эритроцитов (эхиноциты).

Заключение. Предложенные методы контроля за развитием опухоли могут быть использованы при анализе течения болезни и оценки эффективности противоопухолевых препаратов.

Контроль за развитием злокачественного роста по содержанию антиапоптозных белков и морфологии эритроцитов

Миль Е. М., Ерохин В. Н., Бинюков В. И., Семёнов В. А., Албан-това А. А., Блохина С. В.

Место работы: Институт биохимической физики РАН, г. Москва

Удобным методом контроля за состоянием организма онкологических больных могут служить изменения некоторых характеристик крови пациентов. Одними из таких показателей, может быть изменение содержания антиапоптозных белков (белок Bcl –2) и морфологические изменения эритроцитов (объем АСМ имиджа эритроцитов). Известно, что высокий уровень белка Bcl –2 препятствует апоптозу и является ответственным за контроль и выживаемость гемопоэтических клеток, что в то же время защищает клетки от озлокачествле-ния, например при старении. Кроме того есть предположение, что содержание белка Bcl –2, регулятора апоптоза митохондрий, вероятно, связано с его ролью как антиоксиданта и противовоспалительного белка.

Цель исследования. Так как при опухолевом процессе, а также при старении организма наблюдается усиление процессов апоптоза над процессами репарации, то целесообразно изучать изменение содержания этих белков.

Материалы и методы. Исследования проводились на мышах– гибридах C57BI х DBA (возраст 3-4 месяца, масса 25 г) с опухолью Льюиса, которая трансплантировалась реципиентам внутримышечно в бедро, 7х106 клеток на мышь. Содержание белка Bcl-2 в препаратах определяли методом иммунобло-тинга. В качестве первого антитела использовали моно-

• № 4, Special Edition 1 – 2016 г. (21) • MALIGNANT TUMOURS 205