Коррекция иммунного статуса пушных зверей с помощью биологически активных препаратов

Введение. Перспектива дальнейшего развития отечественного пушного звероводства в условиях рыночных отношений в значительной степени зависит от поиска, освоения и перехода на более прогрессивные элементы технологий, обеспечивающие достаточно низкую себестоимость продукции. В результате индустриализации клеточного пушного звероводства современные звероводческие хозяйства преобразовались в крупные промышленные комплексы с многотысячным поголовьем животных. Отдельные звероводческие хозяйства имеют более 20 тысяч самок основного стада, а вместе с молодняком - более 100 тысяч зверей. Использование для их кормления низкокачественных кормов и несбалансированность рационов приводят не только к снижению качества меха, но и являются причиной низкого иммунного статуса [1-4]. В целях повышения рентабельности производства необходимо уде- лить особое внимание введению в рацион пушных зверей биологически активных добавок, которые активизируют обменные процессы, участвуют в процессе тканевого дыхания, регуляции перекисного окисления липидов, являются катализатором многих процессов, повышают резистентность организма, что способствует увеличению сохранности молодняка, снижению его заболеваемости и падежа.

Принципиально важно, что пробиотическая терапия оказывает благоприятное действие на физиологические процессы организма, биохимические реакции, нивелирует побочные эффекты фармакотерапии и, кроме того, отличается высокой степенью безопасности. Среди биологически активных препаратов наше внимание привлек пробиотик нового поколения субалин, основой которого является штамм Bacillus subtilis 2335/105, содержащий рекомбинантную плазмиду с геном интерферона a-2 человека. В течение первых двух часов после попадания субалина в желудочно-кишечный тракт около 90 % от общего количества спор B. subtilis переходят в вегетативные формы. Процесс прорастания спор сопровождается интенсивным продуцированием биологически активных веществ [5, 6].

Противовирусный эффект обусловлен уникальной способностью субалина к продукции интерферона, так как пробиотическая культура Bacillus subtilis 2335/105 содержит плазмидную ДНК с геном человеческого лейкоцитарного интерферона. Этот цитокин является одним из ключевых факторов неспецифической резистентности организма при вирусных заболеваниях. Существенным отличием препарата субалин является то, что синтез интерферона осуществляется бактериями, находящимися в желудочно-кишечном тракте. При этом иммуноактивное вещество попадает сразу в лимфоидную систему (пейеровы бляшки кишечника), а не в кровоток. Подобный путь введения иммунорегулятора снижает иммунизацию против интерферона, имеющую место при парэнтеральном введении препаратов чистого интерферона и его индукторов [5, 6]. Кроме того, обеспечивается пролонгированная наработка интерферона на весь период существования бактерии в кишечнике. Результаты исследований показали, что иммунорегулирующая активность субалина не ниже, а в некоторых случаях выше, чем у индукторов интерферона. Изучено влияние пробиотика на кишечный микробиоценоз у молодняка норок и установлено, что использование препарата в качестве иммуномодулирующего средства позволяет повысить неспецифическую резистентность организма [7, 8].

Таким образом, широкий спектр биологической активности, наряду с полной безвредностью, и способность продуцировать интерферон делает возможным применение субалина в качестве основы лечебно-профилактических препаратов в медицине и ветеринарии. При этом иммунорегулирующее и противовирусное действие интерферона может проявиться в полной мере при обычных схемах перорального применения.

Цель исследований : изучение и сравнительный анализ влияния биологически активных препаратов на течение болезни у норок, экспериментально зараженных культуральным изолятом вируса «Сапфир» АБН (алеутская болезнь норок).

Материал и методы исследований . Работа была проведена в ФГБНУ ВНИИОЗ (гор. Киров). Было сформировано три группы норок (две опытные и одна контрольная) темно-коричневого окраса в возрасте 10 месяцев (по 20 зверей в каждой). Звери опытных групп были заражены культуральным изо-лятом вируса «Сапфир» АБН в дозе по 2,0 см³ внутрибрюшинно. Незараженные норки служили контролем. Двадцати норкам первой опытной группы за три дня до заражения и далее пятидневными курсами с интервалом 10 дней добавляли в кормосмесь суб-алин в дозе 0,2 и 0,5 · 10⁹ КОЕ на зверя. Дополнительно с целью проведения сравнительного анализа были сформированы опытные группы зараженных норок, которым по аналогичной схеме в кормосмесь добавляли интерферон ЕС-липинт в дозе 200 тыс. и 500 тыс. МЕ.

Для изучения влияния препарата на патогенез при АБН была поставлена РИОЭФ на 14, 21, 30, 45-е сутки после заражения с использованием стандартного диагностического набора антигена и контрольной позитивной сыворотки для серологической диагностики алеутской болезни норок (Тест-система для диагностики алеутской болезни норок методом реакции иммуноэлектроосмофореза, с. 16-6, к.16-6, изг. 10.09.2016 г.). Результат РИЭОФ оценивают как положительный, если между лунками с исследуемой сывороткой и антигеном наблюдают полосу преципитации.

Общий белок и белковые фракции (γ-глобулины) определяли по Б.И. Антонову [4, 9].

Результаты исследований . В ходе иммунологических и биохимических исследований сыворотки крови отмечено положительное влияние субалина на иммунный статус норок. При анализе результатов биохимических и гематологических исследований крови на 45-й день после заражения происходило достоверное снижение уровня общего белка сыворотки крови на 14 % (рис. 1), снижение содержания γ-глобулинов на 92 % по сравнению с таковыми показателями у зараженных животных 2-й опытной группы (рис. 2).

По результатам РИЭОФ у всех зверей, зараженных культуральным изолятом вируса «Сапфир» и полевым вирулентным штаммом АБ (контрольные группы), во все сроки исследований отмечалась положительная реакция.

Рис. 1. Динамика содержания общего белка сыворотки крови у зараженных АБ норок после применения пробиотика субалин, г/л

14 дней21 день30 дней45 дней

Рис. 2. Динамика фракции Y-глобулинов у зараженных АБ норок после применения пробиотика субалин, %

контроль

1-я опытная

2-я опытная

При постановке РИЭОФ у зверей, спонтанно зараженных вирулентным полевым штаммом АБ, в рацион которых был введен субалин в дозе 0,25^109 КОЕ и интерферон ЕС-липинт в дозе 200 тыс. МЕ на 21-й и 30-й день эксперимента, реакция давала положительный результат. Повышение дозы пробиотика до 0,5И09 КОЕ способствовало получению сомнитель ного результата на 21-й и 30-й день эксперимента у трех из пяти норок (< 0,05). У опытной группы норок, получавших интерферон ЕС-липинт в дозе 500 тыс. МЕ, на 21-й день эксперимента при постановке РИЭОФ была получена одна, а на 30-й день - четыре отрицательных пробы из пяти исследуемых (< 0,05) (табл.).

Результаты по РИОЭФ у норок, зараженных полевым вирулентным штаммом АБН

Заключение. Результаты экспериментального заражения норок вирусом АБН свидетельствуют о существенном влиянии субалина в дозе 500 тыс. МЕ на течение инфекционного процесса, заключающемся в нормализации исследуемых физиологических показателей и гомеостаза, а также в выраженной противовирусной активности препарата.

Следовательно, субалин оказывает иммуномодулирующее действие и повышает естественную резистентность организма у пушных зверей в пределах физиологических возможностей и их устойчивость к действию неблагоприятных факторов внешней среды.