Костно-мозговое кроветворение при комбинированной травме на фоне инфузии антигипоксантов

Кроветворная ткань представляет собой динамическую, постоянно обновляющуюся систему, механизмы регуляции которой действуют в основном по принципу обратной связи [ 1 ]. Кинетика кроветворения и кроверазрушения является важнейшим показателем качества работы системы крови, а миелограмма — отражением хода пролиферации и дифференцировки костно-мозговых элементов гемопоэза [5]. Одна из актуальных проблем современной медицины — разработка патогенетически обоснованных методов коррекции патологии системы крови, основанных на принципе подражания естественным регуляторным системам организма [2].

Социальная значимость тяжелых механических повреждений определяется гигантскими масштабами современного травматизма [8]. При комбинации с термической травмой исходы лечения значительно скромнее, чем у обожженных только с термической травмой [9]. Ранняя коррекция гиповолемии и проведение комплексной терапии при тяжелой травме предотвращают прогрессирование шока и стабилизируют состояние пострадавшего. Поддержание механизмов адаптации к гипоксии может быть достигнуто введением в состав инфузионных растворов антигипок-сантов и антиоксидантов [10].

При комбинированной травме снижается деформируемость эритроцитов, развивается деструкция плазмолеммы и внутриклеточных структур эритроцитов, что сопровождается усилением внутрисосудистой агрегации, нарастанием гемолитического процесса и развитием анемии [3]. При ожоге на фоне кровопотери возникает депрессия кроветворения, обусловленная влиянием повреждающих факторов и возникающим затем каскадом патогенетических реакций, влияющих на костный мозг [6]. В эксперименте на модели комбиниро ванной травмы установлено, что антигипок-санты в сочетании с кровезаменителями уменьшают проявления реперфузионного синдрома в посттравматическом периоде [7]. В литературе накоплен достаточный материал о воздействии отдельных анти-гипоксантов на гомеостаз при различной патологии [4; 11], однако отсутствуют сведения о сочетанном использовании антиги-поксантов при комбинированной травме, что явилось предметов наших исследований.

Целью исследования стало изучение влияния гемокорректоров и аплегина в сочетании с мексидолом и димефосфоном на клетки костного мозга и периферической крови в зависимости от путей введения инфузионных сред при комбинированной травме.

Для решения поставленных задач выполнены эксперименты на 58 беспородных собаках обоего пола массой от 8 до 25 кг под внутриплевральным тиопентал-натриевым наркозом (0,04 г/кг) на модели комбинированной травмы (глубокий ожог 10 % поверхности тела на фоне острой кровопотери 24,50 ± 0,24 мл/кг). В 1 серии экспериментов (12 собак) через 1 ч после травмы внутривенно (в/в) вводили реополиглюкин и изотонический раствор натрия хлорида (1:1), общий объем инфузии в 2 раза превышал величину кровопотери. Во II серии (12 животных) в/в вливание гемокорректоров сочеталось с введением аплегина (15 мг/кг) и мек-сидола (50 мг/кг). В III серии опытов (12 собак) инфузионная терапия с включением аплегина и мексидола проводилась в метаэпифиз левой бедренной кости. В IV серии опытов (12 животных) в/в инфузию кровезаменителей и аплегина дополняли введением димефосфона (100 мг/кг). В V серии опытов (10 собак) введение гемокорректоров, аплегина

и димефосфона осуществлялось внутрикостно (в/к).

Глубокий ожог на фоне острой кровопотери приводил к уменьшению в пунк-тате костного мозга абсолютного количества миелокариоцитов в 2,11 раза и числа митотически делящихся клеток в 2,50 раза. При этом относительное содержание бластных форм падало до 34,38 % от исходной величины. К 1-му часу после повреждения наблюдалось сужение миелоидного пролиферативного пула в 2,98 раза и эритроидного — в 2,26 раза. В раннем посттравматическом периоде лейко-эритробластическое соотношение (Л/Э) увеличивалось до 4,81 ± 0,31, индекс, созревания эритроцитов (ИСЭ) возрастал до 0,86 ± 0,08, а индекс созревания нейтрофилов (ИСН) был в 4,20 раза меньше нормы. В периферической крови к 1-му часу после травмы определялась лейкопения (3,96 ±0,11 10^/л) с нейтрофильным сдвигом до метамиелоцитов на фоне роста лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ) в 1,55 раза. Развивался рети-кулоцитоз (2,80 ± 0,07 %).

Базовая в/в инфузионная терапия сопровождалась снижением числа миелокариоцитов (26,52 % от нормы). Однако митотическая активность клеток к 3-му часу постинфузионного периода достигала 160 % от контроля. При этом уменьшалось содержание зрелых элементов гранулоцитарного и эритроидного рядов. Соот- ношение Л/Э опускалось до нормальной величины, ИСН был ниже ее на 43,75 %, а ИСЭ почти достигал ее уровня. Через 3 ч после инфузионной терапии в венозной крови определялось увеличение общего количества лейкоцитов преимущественно за счет палочкоядерных нормобластов (ПЯН) с одновременным ростом ЛИИ до 7,34 ± 0,41. Эритроциты и ретикулоциты практически не изменялись.

Использование антигипоксантов в комплексе инфузионной терапии сопровождалось повышением абсолютного количества миелокариоцитов начиная с 3-го часа после лечения и достижением максимальных значений к 5-му часу после инфузии. Одновременно с этим возрастали митотическая активность клеток (что более выражено при в/в пути введения антигипоксантов) и содержание бластных форм в пунктате (наибольшее увеличение при в/в и в/к инфузии аплегина и димефосфона — 5,00 ± 0,06 и 5,91 ± 0,03 % от исходных значений).

Использование аплегина и димефосфона приводило к более быстрому восстановлению гранулоцитарного пролиферативного пула в отличие от серий с введением аплегина и мексидола и базовой терапией. Содержание зрелых гранулоцитов было выше исходного уровня (что более выражено при в/к введении комбинаций антиоксидантов) (табл. 1).

Таблица 1

Миелограмма при комбинированной травме

Показатель	Исходное состояние	1 ч после травмы	5 ч после лечения
			I	II	III	IV
1	2	3	4	5	6	7
Бластные клетки	2,24+0,30	0,77 + 0,20*	3,27 ± 0,36	4,82 ± 0,42	5,00 + 0,45	5,91 ± 0,46
М иелок ариоциты	23,76 ± 0,80	11,20 ± 0,60*	15,82 + 0,70	18,45 + 0,40	15,27 ± 0,50	20,09 ± 0,60*
М егака р и оциты	1,99 ± 0,35	0,99 + 0,23	2,64+0,34	3,09 ± 0,25	4,91 ± 0,44	6,27 + 0,41
Моноциты	2,45 + 0,40	1,67 ± 0,41	8,18 ± 0,50*	7,91 ± 0,37	9,82 + 0,57	10,64 + 0,53
Лимфоциты	10,61 ± 0,70	6,43 ± 0,60	26,27 + 0,70	21,45 ± 0,80	26,36 ± 0,50	29,82 + 0,62
Промислоциты	2,86+0,40	0,96 ± 0,30	2,82 + 0,42	3,73+0,36	4,18 + 0,33	5,73+ 0,41
Миелоциты	7,94 + 0,50	2,65 ± 0,40	7,09 ± 0,48	6,55 ± 0,43	6,00 + 0,52	7,36 ± 0,53*
Метамиелоциты	9,04 ± 0,45	3,72 + 0,35	12,09 ± 0,60	13,45 ± 0,70	15,64 + 0,50	14,18 ± 0,63
ПЯН	20,98 + 0,70	39,85 ± 0,70	49,82 + 1,40	48,36 ± 0,70	51,55 + 0,60	60,82 ± 0,89

Окончание табл. /

1	2	3	4	5	6	7
СЯН	18,93 ± 1,10	23,80 ± 1,10	26,27 ± 1,00	28,73 ± 0,97	26,18+0,69	23,55 ± 0,67
Эозинофилы	3,03 ± 0,44	1,58 ±0,24	0,64 ± 0,24	1,18+0,26	/64± 0,24	2,09 ± 0,25
Пронормобласты	0,95 ± 0,22	0,42 ± 0,16	0,73+ 0,24	0,73 ± 0,19	1,18 ± 0,29	2,64 ± 0,36
Нормоциты базофильные	3,11 ± 0,47	1,80 + 0,34	5,55 ± 0,49	6,91 + 0,46	8,27 + 0,43	9,73 + 0,43*
Нормоциты полихроматофильные	9,43 + 0,75	5,27 ± 0,60	26,36 ± 0,64	24,36 ± 0,70	28,55 ± 0,53	30,91 ± 0,64*
Нормоциты оксифильные	5,48 ± 0,45	8,86 + 0,60	14,09 ± 0,81	12,45 ± 0,72	15,73 ± 0,49	11,70 + 0,49
Митозы	0,20 ± 0,15	0,08 ± 0,09	0,27 ± 0,27	0,27 ±0,14	0,45 ± 0,16	0,45 ± 0,21

Примечание: * — достоверность отличий относительно исходных данных Р < 0,05; I — аплегин + мексидол в/в; П — аплегин + мексидол в/к; III — аплегин + димефосфон в/в; IV — апле-гин + димефосфон в/к,

Начиная с 1-го часа после инфузии количество пронормобластов увеличивалось и к 5-му часу достигало максимального значения (при различных путях введения аплегина и мексидола и в большей степени при в/к введении аплегина и димефосфона). На фойе введения антигипоксантов до 5-го часа после лечения происходило увеличение числа всех нормоцитов. Затем их количество постепенно снижалось, оставаясь выше исходного уровня. Наиболее выраженное возрастание содержания базофильных и полихроматофильных нормоцитов было при в/к пути введения аплегина и димефосфона, а оксифильных нормоцитов — при в/в их инфузии.

Соотношение Л /Э в сериях с использованием в/в и в/к введения аплегина и димефосфона к 3-му часу после лечения приближалось к контрольной величине, но было меньше нее на 7,9 % (а при базовой терапии - больше на 13,7 %). К 24-му часу эксперимента во всех сериях, кроме в/к введения аплегина и мексидола, наблюдалось понижение Л/Э. С 3-го часа после лечения ИСЭ увеличивался (особенно при в/в вливании аплегина и мексидола); к 5-му часу после введения препаратов он составлял 0,87 ± 0,20 %. ИСН, оставаясь ниже первоначального значения, постепенно рос и достигал максимальных величин к 24-му часу при введении в/в и в/к аплегина и мексидола и в/в — аплегина и димефосфона.

В периферической крови к 1 -му часу после лечения в сериях с использованием антигипоксантов отмечалось восстановление уровня лейкоцитов до исходного уровня. С 3-го часа после инфузии их показатели во всех сериях были выше нормы и продолжали подниматься до конца эксперимента. На всем протяжении опыта сохранялся нейтрофильный сдвиг лейкоформулы влево до метамиелоцитов. Количество ПЯН с 3-го часа постинфузионного периода несколько снижалось, а СЯН — повышалось с 1-го часа после лечения и к концу исследования приближалось к контрольному значению. На фоне применения антигипоксантов ЛИИ был выше контрольного уровня, но ниже, чем на соответствующих этапах исследования после базовой терапии (табл. 2).

В раннем постипфузионном периоде уровень эритроцитов нормализовался при в/к введении аплегина и димефосфона и, продолжая увеличиваться, достигал максимума к 5-му часу после лечения. В сериях с включением аплегина и мексидола этот показатель практически не отличался от исходного с 3-го часа после лечения и превосходил его к 5-му часу. В серии с в/в введением аплегина и димефосфона максимальная коррекция количества эритроцитов наблюдалась к 5-му часу после вливания растворов. Ретикулоцитоз отмечался на всех этапах во всех сериях экспериментов. Наибольшим он был при в/в введении аплегина и димефосфона, а

Динамика лейкоформулы при комбинированной травме

Таблица 2

Показатель	Исходное состояние	1 ч после травмы	5ч после лечения
			I	II	III	IV
Лейкоциты	4,49 + 0,04	3,96 ± 0,06	8,69 + 0,18*	10,90 + 0,12е	9,78 ± 0,08	9,18+0,09
Эозинофилы	3,44± 0,21	3,89 ± 0,23	0,82 + 0,23е	0,82 ± 0,18	0,27 + 0,14е	0,45 ± 0,16
пян	2,50 + 0,25	24,90 ± 0,20е	35,40 + 0,41е	14,20 + 0,42	38,60 + 0,31*	30,40 ± 0,62*
СЯН	60,30 + 0,63	36,40 ± 0,85е	41,90 + 0,64	62,90 ± 0,69	45,50 ± 0,45	37,40+ 0,58
Моноциты	5,91 + 0,23	4,02 + 0,21	8,45 + 0,41	7,36 + 0,39	5,18 ± 0,35	7,27 ± 0,30
Лимфоциты	25,90 ± 0,53	25,70 ±0,64	14,20 ± 0,72	17,40 ± 0,34	9,64 ± 0,28е	7,36+ 0,43е
ЛИИ	0,49 ± 0,02	0,76 ± 0,01	2,56 ± 0,09	1,86+0,05	6,99 ± 0,12*	2,20 ± 0,08

Примечание: * — достоверность отличий относительно исходных данных Р < 0,05; I — IV — то же, что в табл, 1.

наименьшим — при в/в вливании аплеги-на и мексидола.

Таким образом, повреждающее действие комбинированной травмы на кроветворную ткань проявлялось деструкцией кроветворных форм, падением числа миелокариоци-тов и клеток в состоянии митотического деления, сужением пролиферативного миелоидного и эритроидного пулов. В ответ на повреждение происходило повышенное вымывание нейтрофилов из костного мозга, что приводило к истощению их костно-мозгового резерва.,

Исследования свидетельствуют, что антигипоксанты улучшали процессы гемопоэза в посттравматическом периоде. Применение данных препаратов, обладающих не только антигипоксическим, по и антиоксидантным действием, как структурных стабилизаторов клеточных мембран уменьшало деструкцию клеток крови и костного мозга и восстанавливало их функциональную активность. Под влиянием антигипоксантов наблюдалось усиление мобилизации костно-мозговых гранулоцитарного и эритроцитарного резервов для поддержания клеточного состава периферической крови, активизировались защитно-компенсаторные процессы в костном мозге. Видимо, при этом усиливается выработка колониестимулирующих факторов мононуклеарными макрофагами и иммунокомпетентными клетками, воздействующими па миелопоэз в костном мозге, что приводит к развитию регенераторной нейтрофилии.

Изложенное дает основание сделать ряд выводов.

• 1.    Комбинированная травма (глубокий ожог на фоне острой кровопотери) вызывает угнетение кроветворения в виде депрессии миело- и эритропролиферации. Внутривенная инфузия кровезаменителей сдерживает развитие гемодепрессии с активацией процессов пролиферации к 3-му часу после лечения.

• 2.    Аплегин и мексидол в комплексе внутривенной инфузионной терапии комбинированной травмы оказывают гемопоэз модулирующее действие, стимулируя миелоидный росток костного мозга и еще в большей степени — эритроидный. При внутрикостном вливании наблюдается более выраженная коррекция гранулоцитарного пула. Оба способа лечения не приводят к полному восстановлению пролиферирующей способности костного мозга.

• 3.    Внутривенная инфузия аплегина и димефосфона стимулирует миелопоэз, нормализуя пролиферацию гранулоцитов к 3-му часу после лечения с последующим ее снижением к 1-м суткам, и кратковременно корригирует эритропоэз к 5-му часу после инфузии. Наибольшая стимуляция гранулоцитарного роста и эритропролиферации отмечается при внутрикостном введении аплегина и димефосфона.