Краткосрочное хранение спермы трутней медоносной пчелы в культуральной среде для насекомых

Многолетний мониторинг морфометрических признаков медоносных пчел основных пород, разводимых на территории Российской Федерации, свидетельствует о продолжающемся процессе метизации и массовой гибридизации пчел. Для оперативного решения наметившихся проблем, возникает потребность в разработке биотехнологического метода краткосрочной (30-90 суток) консервации спермы трутней медоносных пчел. Исследования по сохранению спермы вне организма пчелиной матки находятся в стадии экспериментальной разработки, так как механизм консервации в семяприемнике матки до конца не изучен. Осуществлен анализ по краткосрочному хранению при 3°С свежеотобранной спермы в разбавленном и неразбавленном виде. Проведена сравнительная оценка синтетических питательных сред, отличных по химическому составу и реакции среды. В качестве разбавителей использовали питательные среды для культур клеток насекомых - Lonza Insect-XPRESSTM, Schneider’s Drosophila Medium c L глутамином, Grace’s Insect Medium (2x) и С46. Качество спермы оценивали по показателям концентрации, подвижности и жизнеспособности сперматозоидов. Жизнеспособность сперматозоидов исследовали методом флуоресцентной микроскопии с использованием флюорохромов SYBR-14, PI. Сперма из контрольных образцов наиболее стабильно сохраняла свой потенциал на протяжении всего периода консервации (60 суток). Опытные образцы, несмотря на высокий показатель жизнеспособности (67,8-70,1%), обладали низкой оплодотворяющей способностью. В семяприемнике маток, искусственно осемененных разбавленной спермой, обнаружено 0,04-0,54 млн/мкл сперматозоидов, а в контрольной группе 0,04-2,78 млн/мкл (р˂0,05). Таким образом, при организации краткосрочного хранения в течение 30-60 сут. при 3°С следует использовать свежеотобранную сперму в неразбавленном виде. В случае необходимости разбавления спермы можно применять полноценные питательные среды для культур клеток насекомых с рН 6,1-7,2 и режимом хранения не более 30 сут. при 3°С.