Криоконсервация каллусных клеток зерновых культур в электроморозильной камере

Современная селекция зерновых культур, таких как пшеница (Triticum aestivum L.) и ячмень (Hordeum vulgare L.), дополняется биотехнологическими методами, включая клеточную селекцию in vitro и генетическую трансформацию. Для долговременного сохранения полученных уникальных клеточных линий и минимизации генетических изменений необходимо применять метод криоконсервации, который останавливает метаболизм и исключает необходимость регулярных пассажей. Цель работы оценить эффективность применения криоконсервирующих сред (глицерин, глицерин и яблочный пектин) для сохранения каллусных клеток яровых ячменя и пшеницы при температуре -80 °С в условиях бытового электроморозильника. Использовали каллусы ячменя (четыре линии) и пшеницы (две линии), полученные из незрелых зародышей. Клетки каллуса замораживали под защитой криоконсервирующих сред в электроморозильнике -80 °C в течение 7 суток, с последующим культивированием размороженных клеток каллуса на питательной среде. Перед охлаждением и после размораживания оценивали жизнеспособность клеток каллуса при помощи витального красителя, а также способность клеток после отогрева к рекультивации. Установлено, что после воздействия отрицательной температуры при использовании криоконсервирующих растворов целостность клеточной мембраны каллусов как ячменя, так и пшеницы, независимо от генотипов, сохранялась стабильно на уровне 50 %. Таким образом, определено, что применение криоконсервирующих сред (глицерина, глицерина и яблочного пектина) при сохранении каллусных клеток яровых пшеницы и ячменя при температуре -80 °С в условиях бытового электроморозильника является успешным в отношении сохранности целостности клеточной мембраны клеток каллуса.