Механизмы антистрессорного действия растительного средства "Тантон"

За последние десятилетия накоплен достаточно большой клинико-экспериментальный материал, свидетельствующий об эффективности профилактики и коррекции стрессорных повреждений с помощью адаптогенов, в ряду которых наиболее перспективными являются средства природного происхождения. Ранее нами было установлено, что жидкий экстракт «Тантон» обладает адаптогенной активностью, повышая резистентность организма к действию экстремальных факторов различной природы, в том числе к острому иммобилизационному и эмоциональному стрессу.

Цель настоящего исследования – определение возможных механизмов антистрессорного действия растительного средства «Тантон».

Материалы и методы

Таблица 1

Влияние «Тантона» на выраженность катаболических повреждений органов белых крыс при 8-часовом иммобилизационном стрессе

Данные, приведенные в таблице 3, свидетельствуют о том, что иммобилизация продолжительностью 8 часов вызывает у крыс контрольной группы повышение концентрации ТБК-активных продуктов в 2 раза и значительное снижение активности ферментов антиоксидантной защиты – суперокид-дисмутазы на 78% и каталазы на 30% по сравнению с аналогичными данными интактных животных. Превентивное введение испытуемого средства оказывало антиоксидантное действие, что подтверждает снижение концентрации ТБК-активных продуктов на 26% по сравнению с контролем, увеличение содержания восстановленного глутатиона в сыворотке крови, а также повышение активности каталазы и супероксиддисмутазы соответственно на 20 и 50% в сравнении с аналогичными показателями животных контрольной группы. При этом антиоксидантная активность испытуемого средства была аналогичной таковой у препарата сравнения.

Таблица 3

Влияние «Тантона» на концентрацию ТБК-активных продуктов и показатели антиоксидантной системы белых крыс на фоне 8-часового иммобилизационного стресса

Полученные данные о наличии у «Тантона» антиоксидантной активности были подтверждены в серии экспериментов in vitro (табл. 4, 5).

Таблица 4

Влияние «Тантона» на показатели Fe2+ -индуцированной хемилюминесценции суспензии липосом

Как следует из таблицы 4, испытуемое средство в указанных разведениях оказывает выраженное ингибирующее действие на кинетику Fe2+ -индуцированной хемилюминесценции суспензии липосом яичного желтка, о чем свидетельствует уменьшение амплитуды «быстрой» вспышки, а также снижение скорости хемилюминесценции на начальной экспоненциальной стадии «быстрой вспышки». При этом выявлен дозозависимый эффект – при увеличении разведения испытуемого средства его ингибирующее действие снижалось. Так, введение в инкубационную среду неразведенного средства уменьшало интенсивность «быстрой» вспышки более чем в два раза по сравнению с данными контрольных проб, нарастания медленной вспышки не отмечалось. Введение данного средства при разведении 1:2 оказывало аналогичный ингибирующий эффект. При использовании данного средства в разведениях 1:5 и 1:10 обнаруживалось достоверное снижение интенсивности «быстрой вспышки», а также снижение скорости нарастания «медленной вспышки». При более сильном разведении (1:50) испытуемое средство не оказывало влияния на параметры индуцированной хемилюминесценции липопротеидов яичного желтка. Полученные данные говорят о том, что механизм антиоксидантного действия указанного средства наряду с активацией антиокислительной системы организма связан также с наличием прямого антирадикального действия.

Известно, что активация свободнорадикальных процессов структурной организации и функциональной состоятельности клеточных мембран сопровождается нарушениями, в связи с чем в следующей серии экспериментов была исследована мембраностабилизирующая активность «Тантона».

Реагент Фентона, содержащий в своем составе перекись водорода и ионы железа, индуцирует свободнорадикальные процессы, ведущие к деструкции клеточных мембран. В частности, установлено, что добавление реагента Фентона к 1%-ной суспензии эритроцитов донорской крови вызывало перекисный гемолиз (табл. 5). Введение испытуемого средства в инкубационную среду, содержащую реактив Фентона, сопровождалось уменьшением выраженности перекисного гемолиза эритроцитов в среднем на 40% по сравнению с показателями контрольных проб. При этом испытуемое средство не оказывало существенного влияния на осмотический гемолиз эритроцитов. Полученные данные дают основание полагать, что механизм его мембраностабилизирующего действия связан с ингибированием процессов свободнорадикального окисления, поскольку свободные радикалы, образующиеся в реакции Фентона, индуцируют перекисное окисление липидов в клеточных мембранах и приводят к гемолизу эритроцитов.

Таблица 5

Влияние «Тантона» на перекисный и осмотический гемолиз эритроцитов

Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что превентивное введение «Тантона» в объеме 3,0 мл/кг на фоне 8-часового иммобилизационного стресса оказывает стресс-лимитирующее действие, предупреждая чрезмерную активацию стрессорной реакции. Установлено, что антистрес-сорная активность испытуемого средства обусловлена ограничением свободнорадикальных процессов, индукция которых при стрессе является ведущим патогенетическим механизмом перехода физиологической адаптации в патологическое звено и развития стрессорных повреждений [3, 4, 7]. При этом антиоксидантная активность испытуемого средства обусловлена как ингибированием процессов перекисного окисления липидов, так и повышением мощности эндогенной антиокислительной системы. Ограничение чрезмерной активации свободнорадикальных процессов под влиянием «Тантона» обеспечивается входящими в его состав соединениями фенольной природы, обладающими, как известно, прямым радикалперехватывающим действием [1, 15], что было подтверждено полученными нами данными об ингибировании индуцированной хемилюминесценции. В основе антирадикального действия фенольных соединений «Тантона», очевидно, лежит непосредственно реакция ингибитора с образующимися свободными радикалами, поскольку для молекулярной структуры флавоноидных соединений, как и для классических антиоксидантов типа α-токоферола, характерно наличие ароматических колец с OH-группами, являющихся акцепторами электронов [2, 11]. Вместе с тем нельзя исключить, что в реализацию антирадикального действия «Тантона» определенный вклад вносит и хелатирующая способность фенольных соединений, образующих комплексы с металлами переменной валентности и тем самым предотвращающих развитие свободнорадикальных процессов [13]. Кроме этого биологически активные соединения, входящие в состав испытуемого средства, прежде всего, витамины и некоторые микроэлементы, оказывают опосредованное антиокислительное действие [2, 4], выражающееся в способности защищать от окислительной деструкции важнейшие эндогенные соединения, участвующие в антиоксидантной защите – супероксиддисмутазу, каталазу и тиоловые соединения, – способствуя тем самым усилению и пролонгированию их эффекта. Таким образом, «Тантон», содержащий комплекс фенольных соединений, оказывает прямое радикалпрехватывающее действие, обеспечивает активацию ферментов антиокислительной защиты организма и уменьшение расхода эндогенных резервов антиоксидантов, что в конечном итоге ограничивает окислительный стресс, ведущий к нарушению структурной и функциональной состоятельности биологических мембран.