Механизмы фиброгенеза при хроническом гепатите С

S. N. Mammaev, Sh. M. Omarov, A. A. Muskhadzhiev, Sh. R. Ramazanov, S. Z. Magomedov

Dagestan State Medical Academy, Dagestan, Makhachkala

В статье дана характеристика спектра изучаемых цитокинов при хроническом гепатите С, которым отводится одна из ключевых ролей в развитии фиброза печени. Ключевые слова: фиброз печени, цитокины, ТИМП-1, трансформирующий фактор роста-1 β , фиброэластометрия.

The paper presents the characteristic spectra of the cytokines in chronic hepatitis C, which has a key role in the development of liver fibrosis. Key words: fibrosis, cytokines, TIMP—1, transforming growth factor-1 β , fibroelastometry.

Хронический гепатит С (ХГ С) характеризуется различной степенью воспаления и фиброза в ткани печени. Этим заболеванием страдают 2,7 млн. человек в США и более 170 млн. во всем мире [2]. У части больных, обычно в возрасте 20—40 лет, развивается прогрессирующий фиброз с исходом в цирроз печени, на последних стадиях сопровождающийся развитием осложнений цирроза и гепатоцеллюлярной карциномой. В ближайшие 10—20 лет экономические и социальные потери от этого заболевания не уменьшаться [4].

Из-за цирроза печени и его осложнений в США ежегодно умирает 40 000 человек. Однако, в скором времени следует ожидать существенного роста числа пациентов с тяжелыми стадиями фиброза печени в связи с наблюдающейся во всем мире тенденцией к старению населения, увеличению распространенности ожирения и числа лиц, инфицированных гепатотропными вирусами [10].

На сегодняшний день гистологический метод считается «золотым стандартом» в диагностике фиброза печени. Однако, данные опубликованных работ свидетельствуют, что точность этого метода в оценке стадии фиброза может существенно снижаться из-за неадекватности объема представляемого для исследования материала (до 25—40% случаев). Кроме того, высокая стоимость и нежелание больных подвергаться инвазивным процедурам обусловливают необходимость разработки неинвазивных методов диагностики фиброза печени [3].

Неинвазивные методы, используемые в настоящее время в клинической практике для диагностики фиброза печени, недостаточно чувствительны и специфичны. Продолжается разработка новых методов инструментальной и серологической диагностики фиброза печени. Одними из таковых, наряду с фиброэластомет- рией, является исследование в сыворотке крови цитокинов — трансформирующего фактора роста-1β (TGF-1β) и тканевого ингибитора матриксной металлопроте-азы-1 (ТИМП-1).

Цель исследования — изучение клинической информативности сывороточных концентраций трансформирующего фактора роста-1 β и тканевого ингибитора матриксной металлопротеазы-1 типа у больных ХГ С.

Материал и методы исследования

Исследования проведены у 150 больных ХГ С в возрасте от 19 до 59 лет (средний возраст 36,7±9,2), из них 104 (37,2±9,1 лет) мужчины и 46 (35,8±10,6 лет) женщины. Контрольную группу составили 35 здоровых лиц в возрасте от 19 до 46 лет (средний возраст 32,5±10,6).

Диагноз ХГ С устанавливали на основании клинического обследования и результатов лабораторных и инструментальных методов исследований. Маркеры вируса гепатита С (ВГС) в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом. У всех больных методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени исследовали в крови РНК и генотип ВГС. Стадию фиброза по шкале Metavir оценивали методом фиброэласто-метрии на аппарате «Фиброскан» (Echosens, Франция).

Иммуноферментным методом с использованием тест-систем фирмы «Вектор-Бест» (Россия, г. Новосибирск) определяли концентрацию цитокинов TGF-1 β и ТИМП-1 в сыворотке крови.

Полученные результаты обработаны статистически по программе «Статистика 6.0» с использованием критерия t -Стьюдента.

Результаты исследования

Клиническая картина у большей части больных характеризовалась такими проявлениями как, вялость, слабость, быстрая утомляемость, снижение трудоспособности. При осмотре выявлялась слабо выраженная гепатомегалия, как правило, без увеличения селезенки. Активность трансаминаз была практически нормаль-

Медико-биологические науки ной (повышение до 1,5 раз) у 49 (32,7%) больных, незначительно (1,5—3 норм) повышенной у 54 (36,0%) и умеренной (3—5 норм) у 47 (31,3%) пациентов.

У всех обследованных больных ХГ С в крови обнаружены анти-ВГС и РНК-ВГС. У 98 (65,3%) больных ХГ С установлен 1b генотип ВГ С, у 52 (34,7%) пациентов 3а генотип. Высокая вирусная нагрузка (более 800 000 МЕ/мл) выявлена у 33 (41,3%) исследованных больных ХГ С.

При изучении стадии фиброза по данным фиброэластомет-рии установлено наличие F0 стадии у 52 (34,7%) больных, F1 — у 38 (25,3%), F2 — у 22 (14,7%), F3 — у 18 (12,0%) и F4 — у 20 (13,3%) обследованных больных ХГ С.

Уровни TGF-1 β и ТИМП-1 в сыворотке крови у обследованных больных ХГ С показаны в таблице 1. Как видно из таблицы, у больных ХГ С наблюдалось ( p <0,001) повышение уровня TGF-1 β и ТИМП-1 в сыворотке крови по сравнению с контрольной группой.

При изучении корреляционных взаимосвязей между уровнем цитокинов и активностью цитолитических ферментов выявлена положительная (р<0,01)

Рис. 1. Уровень TGF-1 β по стадиям развития фиброза печени у больных ХГ С ( n =150)

Рис. 2. Уровень ТИМП-1 по стадиям развития фиброза печени у больных ХГ С ( n =150)

зависимость между уровнем

TGF-1 β и ТИМП-1, с одной стороны, и активностью АЛТ/АСТ, с другой ( r =0,61, r =0,58 и r =0,68, r =0,62, соответственно).

У больных ХГ С генотипа 3а, высокой вирусной нагрузкой уровни TGF-1 β и ТИМП-1 были значительно повышены по сравнению с таковыми больных генотипом 1b и низкой вирусной нагрузкой, но при этом достоверной разницы не установлено ( p >0,05).

Таблица 1. Содержание профиброгенных цитокинов в сыворотке крови у больных ХГ С, M±m .

Группа обследованных	TGF-1 β , пг/мл	ТИМП-1, нг/мл
Больные ХГ С, n =150	644,3 117,7	856,2 184,4
Контроль, n =35	257,3±58,9	458,6±76,3
Достоверность различий	p <0,001	p <0,001

При сопоставлении уровня цитокинов, с одной стороны, и стадии фиброза печени по данным фиброэ-ластометрии у больных ХГ С установленa статистически значимая прямая связь (p<0,01) между содержанием TGF-1β и ТИМП-1 в сыворотке крови, с одной стороны и индексом фиброза, с другой (r=0,76 и r=0,69, соответственно) (рис. 1 и 2).

Обсуждение результатов исследования

Основными клиническими проявлениями у больных ХГ С были астеноневротический синдром и умеренная гепатомегалия, как правило, без сопутствующего увеличения селезенки. Учитывая, что у данного контингента больных выявлена повышенная концентрация цитокинов по сравнению с контролем, можно предположить, что цитокины играют определенную роль в развитии таких проявлений заболевания, как слабость, утомляемость, похудание, субфебрильная лихорадка и др. Подобные предположения высказываются и другими авторами [9].

Достоверно более высокие по сравнению с контролем показатели TGF-1β — одного из важнейших противовоспалительных цитокинов — у больных ХГ С может отражать слабую противовирусную активность основных медиаторов воспаления. В качестве противовоспалительных механизмов можно предположить как непосредственное подавление TGF-1β экспрессии генов цитокинов интерлейкина-1, фактора некроза опу-холи-aльфа, так и индукцию синтеза растворимых рецепторов к ним [5].

Помимо противовоспалительной активности TGF-1 β является мощным профиброгенным фактором. Установленная нами корреляционная связь уровня TGF-1 β с индексом фиброза указывает, что данный цитокин, блокируя воспалительную реакцию, одновременно стимулирует синтез коллагена и обеспечивает ремоделирование внеклеточного матрикса [11].

Известно, что в деградации внеклеточного матрикса, особенно его фибриллярных белков ключевую роль играют особые ферменты — матриксные металло-протеазы. Активность металлопротеаз подавляется ТИМП. Ключевыми фиброгенными клетками, секретирующими ТИМП и синтезирующими коллаген, являются звездчатые клетки Ито. При хроническом повреждении печеночной ткани замедляются процессы разрушения экстрацеллюлярного матрикса, что связано с нарушенным балансом между уровнем экспрессии металлопротеаз и их ТИМП [7, 8].