Микробный пейзаж больных с ограниченной стерильной некротической деструкцией, перенесших лапаротомию в динамике комплексного лечения
Автор: Саганов Владислав Павлович, Раднаева Лариса Доржиевна, Хитрихеев Владимир Евгеньевич, Дониров Батор Аюржанович, Будашеев Вячеслав Петрович
Журнал: Вестник Бурятского государственного университета. Философия @vestnik-bsu
Статья в выпуске: 12, 2014 года.
Бесплатный доступ
Предложен новый метод диагностики микробного пейзажа больных с острым панкреатитом.
Острый панкреатит, газовая хроматография масс-спектрометрия
Короткий адрес: https://sciup.org/148182176
IDR: 148182176
Текст научной статьи Микробный пейзаж больных с ограниченной стерильной некротической деструкцией, перенесших лапаротомию в динамике комплексного лечения
В неотложной панкреатологии определяющим фактором в тактике лечения больных с некротической деструкцией является наличие или отсутствие инфекции в поджелудочной железе и забрюшинном пространстве, определение которой на сегодняшний день является весьма актуальной проблемой [1-3, 7, 8]. Не редко в пользу хирургического лечения склоняет ложноположительный результат контаминации некроза поджелудочной железы и забрюшинной клетчатки [4-6]. Это во многом определяет поиск современных маркеров панкреатогенной инфекции.
Материал и методы
Метиловые эфиры жирных кислот и триметилсилильные эфиры исследовались методом ГХ-МС на газовом хроматографе Agilent Packard HP 6890 с квадрупольным масс-спектрометром HP MSD 5973N в качестве детектора. Для хроматографирования использовали колонку – ко-
лонку HP-5MS с внутренним диаметром 0,25 мкм. Процентный состав смеси вычислялся по площади газо-хроматографических пиков. Качественный анализ основан на сравнении времен удерживания и полных масс-спектров соответствующих чистых соединений с использованием библиотеки данных NIST08.L и стандартных смесей (Bacterial Acid Methyl Esters (CP Mix, Supelco, Bellefonte, PA, USA), а также по количеству введенного стандарта (дейтерометиловый эфир тридекановой кислоты).
Определен микробный пейзаж 14 больных с ограниченным стерильным панкреонекрозом и в сравнительном контексте 18 условно здоровых людей.
Результаты
Динамика изменений концентрации микроорганизмов у оперированных больных с ограниченным стерильным панкреонекрозом представлена в таблице 1.
Таблица 1
|
№ |
Микроорганизмы, кл/гх10*5 |
Здоровые |
При поступлении |
Середина лечения |
При выписке |
Норма |
|
1 |
Streptococcus (оральные) |
114,8±26.1 [50-275] 3 |
129,1±76,9 [0-305] |
56,4±49,5 [0-155] |
77,0±49,5 [14-140] |
249 |
|
2 |
Eubacterium lentum (группа А) |
56,3±37,7 [95-74] 2,3,4 |
424,5±44,4 [0-982] |
409,7±93,0 [277-589] |
291,5±71,5 [220-363] |
68 |
|
3 |
Bacillus cereus |
27,5±6,9 [0-64] 4 |
11,3±7,0 [0-45] |
12,4±12,3 [0-37] |
3,4±3,3 [0-10] |
23 |
|
4 |
Peptostreptococcus anaerobius |
0 |
2,8±2,7 [0-11] |
0 |
0 |
0 |
|
5 |
Clostridium hystolyticum |
39,7±12,5 [2-116] |
22,6±22,5 [0-90] |
0 |
0 |
95 |
|
6 |
Nocardia, 14:1d11 |
252,6±56,2 [102-326] |
258,0±52,8 [164-403] |
259,0±42,8 [164-303] |
262,0±38,0 [224-300] |
262 |
|
7 |
Peptostrepto-coccus |
1,6±1,5 |
520,8±443,9 |
258,0±52,8 |
0 |
0 |
|
anaerobius |
[0-14] 2 |
[0-1850] |
[0-1403] |
|||
|
8 |
Moraxella/Acinetobacter |
3,0±1,6 [2-10] 2,3 |
18,3±7,2 [0-35] |
12,7±6,4 [0-21] |
4,1±3,9 [0-8] |
0 |
|
9 |
Pseudomonas aeruginosa |
2,4±1,9 [2-20] 2,3,4 |
58,3±10,4 [29-74] |
43,4±22,0 [0-72] |
19,5±4,5 [15-24] |
0 |
|
10 |
Clostridium propionicum |
84,4±32,9 [0-220] |
56,4±56,3 [0-169] |
0 |
0 |
288 |
|
11 |
Актиномицеты |
36,6±4,9 [15-59] |
31,3±2,5 [26-36] |
23,0±4,0 [15-28] |
21,0±3,0 [7-25] |
77 |
|
12 |
Pseudonocardia |
24,2±5,4 [6-60] |
34,8±23,4 [6-104] |
16,0±6,4 [6-28] |
29,0±8,4 [16-99] |
70 |
|
13 |
Streptomyces |
49,7±13,7 [6-133] 2 |
72,8±42,2 [9-193] |
39,0±17,3 [9-69] |
29,0±6,4 [6-98] |
62 |
|
14 |
Clostridium ramosum |
2234,3±230,4 [1051-3241] 3,4 |
2883,8±559,2 [1908-4397] 3,4 |
3967,3±929,0 [2187-5318] |
3811,5±1188, 5 [2623-5311] |
2000 |
|
15 |
Fusobacteri-um/Haemo-phylus |
3,7±2,1 [0-18] 2,3,4 |
25,5±8,9 [0-41] |
20,4±10,2 [0-32] |
28,5±12,2 [6-63] |
0 |
|
16 |
Alcaligenes |
31,7±4,4 [6-46] 2,3,4 |
118,0±20,2 [62-157] |
119,3±19,0 [67-157] |
109,3±15,0 [67-157] |
48 |
|
17 |
Rhodococcus |
283,7±45,4 [63-512] 2,3 |
490,0±110 [212-751] 4 |
410,3±90,1 [234-531] |
240,3±21,7 [200-298] |
423 |
|
18 |
Staphylococcus intermedius |
355,1±72,9 [119-778] 2 |
842,3±46,3 [11-1613] 4 |
444,0±233,6 [139-903] |
404,0±233,6 [109-703] |
756 |
|
19 |
Corineform CDC-group XX |
125,9±22,5 [32-250] |
335,0±17,0 [0-588] |
341,3±120,7 [0-588] |
164,5±12,7 [68-191] |
605 |
|
20 |
Lactobacillus |
5661,5±1868,3 [965-16220] |
4168,0±2797 [581-9679] |
3193,5±2612,5 [581-5806] |
4131,0±969,0 [3062-5001] |
6613 |
|
21 |
Campylobacter mucosalis |
44,8±16,8 [0-142] 2,3,4 |
221,0±64,7 [94-306] |
204,3±34,7 [143-263] |
184,3±14,7 [143-263] |
99 |
|
22 |
Mycobacterium/Candida |
106,8±25,3 [0-239] |
359,8±110,9 [115-594] |
275,5±91,5 [169-549] |
375,571,5 [169-549] |
549 |
|
23 |
сем. Enterobacteri-aceae (E. coli и пр.) |
0,11±0,01 [0-0,02] |
57,6±57,4 [0-230] |
0 |
0 |
0 |
|
24 |
Eubacterium moniliforme sbsp |
0 |
233,0±232 [0-700] |
0 |
0 |
0 |
|
25 |
Cl. difficile |
80,2±12,8 [43-155] 2,3,4 |
439,3±25,9 [83-944] |
339,3±23,9 [85-744] |
299,0±25,9 [222-376] |
385 |
|
26 |
Prevotella |
0 |
0 |
34,5±11,5 [9-64] |
0 |
38 |
|
27 |
Eubacterium moniliforme, E. nodatum, E. sabureum |
6589,8± 1385,7 [1049-12508] 2,3,4 |
17791,8± 5748,9 [3572-29580] |
21329,3± 5745,3 [10278-29580] 4 |
10844,0± 1844,0 [9000-12688] |
6912 |
|
28 |
Staphylococcus |
123,0±19,3 [57-220] 2,3 |
396,0±68,4 [264-581] |
274,3±22,4 [120-637] |
124,3±22,4 [120-237] |
120 |
|
29 |
Bifidobacterium |
2395,4±453,5 [355-3973] |
6701,3±2571,4 [664-11533] |
4129,5±754,9 [2031-5374] |
3023,0±754,9 [2031-5374] |
5067 |
|
30 |
Helicobacter pylori, h18 |
12,0±2,5 [0-22] 2,4 |
95,0±48,5 [0-227] 1,3 |
28,5±14,3 [0-66] 2,4 |
100,1±17,3 [66-132] |
14 |
|
31 |
Clostridium perfringens |
19,6±3,4 [4-35] 2,3,4 |
49,3±16,8 [24-97] |
26,0±7,2 [12-46] |
36,0±7,2 [12-46] |
12 |
|
32 |
Enterococcus |
1,9±1,3 [0-11] 2,3,4 |
61,8±49,6 [0-208] |
79,3±70,4 [0-290] |
42,3±20,4 [3-71] |
290 |
|
33 |
Eubacterium |
0 |
0 |
0 |
0 |
59 |
|
34 |
Propionibac-terium spp (P. freudenreichii) |
2033,4±339,1 [747-3305] |
4150,0±1536,9 [967-8078] |
2967,0±564,8 [965-4480] |
2430,5±564,8 [965-4480] |
4480 |
|
35 |
Streptococcus mutans (анаэробные) |
253,7±45,8 [89-525] 2,3,4 |
873,0±261,4 [139-1340] 3 |
304,8±63,2 [171-444] |
584,8±63,2 [171-744] |
229 |
|
36 |
Herpes |
60,4±12,4 [19-112] 2,3,4 |
366,3±166,2 [65-740] 3 |
187,0±45,7 [59-276] |
287,0±45,7 [59-276] |
59 |
|
37 |
Микр. грибы, кампесте-рол |
130,1±27,5 [24-293] 3,4 |
354,0±112,5 [63-552] |
308,0±182,3 [29-842] |
265,1±182,3 [29-842] |
842 |
|
38 |
Nocardia asteroides |
287,3±115,2 2,4 [184-1194] |
677,5±112,5 [299-806] |
641,5±259,4 [201-1321] |
541,5±259,4 [201-721] |
274 |
|
39 |
Цитомегало-вирус |
30,2±3,7 [15-42] 2,3 |
235,0±67,4 [76-388] |
230,2±36,9 [46-426] |
83,2±36,9 [46-126] |
166 |
|
40 |
Микр. грибы, ситостерол |
130,1±27,5 |
227,0±86,8 |
166,8±72,6 |
86,8±22,6 |
384 |
|
[24-293] 4 |
[35-446] |
[82-384] |
[82-112] |
|||
|
41 |
Ruminicoccus |
372,6± 50,1 [119547] 2,3,4,5 |
1268,3± 363,2 3,4 [322 1997] |
673,5± 79,4 [485 869] |
873,5± 79,4 [485 869] |
640 |
|
42 |
Actinomyce-tes 10Me14 |
165,4±20,0 [95-260] 4 |
153,3±37,3 [87-235] 4 |
129,5±64,7 [34-309] |
79,5±14,7 [34-99] |
309 |
|
43 |
E. lentum 7741 (группа В) |
6,0±20,1 [0-190] 2,3,4 |
290,3±86,4 [46-425] 3,4 |
96,1±27,5 [0-381] |
86,1±17,5 [0-181] |
0 |
|
44 |
Actinomyces viscosus |
503,4± 84,6 [165-855] 2 |
1309,0± 341,9 4 [288-1719] |
827,8± 154,9 [501-1190] |
727,8± 154,9 [501-1190] |
119 0 |
Примечание : 2, 3, 4 – достоверность различий (р<0,05) между сроками лечения и определения ГХ-МС больных с ограниченным стерильным панкреонекрозом
Нами установлено увеличение микробной флоры выше нормы, имеющей тенденцию к повышению у больных с ограниченным стерильным ПН, которым было выполнено хирургическое вмешательство: Clostridium ramosum, Fusobacterium/Haemophylus, Helicobacter pylori, h18.
Отмечено снижение микроорганизмов от высоких до нормальных показателей: Peptostrep-tococcus anaerobius, Streptomyces, Rhodococcus, Staphylococcus intermedius, Cl. difficile, Staphylococcus, цитомегаловирус, Actinomyces viscosus. Также выявлено, что концентрация следующих микроорганизмов имела тенденцию к снижению, однако, не достигла нормальных показателей: Eubacterium lentum (группа А), Moraxella / Acinetobacter, Pseudomonas aeruginosa, Campylobacter mucosalis, Eubacterium moniliforme, E. Nodatum, E. sabureum, Clostridium perfringens, Streptococcus mutans (анаэробные), Herpes, Nocardia asteroides, Ru-minicoccus, E. lentum 7741 (группа В).
Отмечена тенденция к уменьшению количества микроорганизмов в конце лечения, не превышавших нормальные показатели при госпитализации в следующих случаях: Streptococcus (оральные), Bacillus cereus, Актиномицеты, Corineform CDC-group XX, Propionibacterium spp (P. freudenreichii), Actinomycetes 10Me14.
Выявлена недостаточность Bifidobacterium к концу лечения, что создает дисбиоз кишечника.
Таким образом, примененный метод газовой хроматографии масс-спектрометрии является перспективным методом диагностики микроорганизмов больных с острым панкреатитом, позволяет коррегировать результаты комплексного лечения этих больных и требует дальнейших исследований в этой области.
Список литературы Микробный пейзаж больных с ограниченной стерильной некротической деструкцией, перенесших лапаротомию в динамике комплексного лечения
- Верховцева Н.В., Осипов Г.А. Свойства и трофические связи основных групп микроорганизмов отделов кишечника и фекалий по данным измерений микробных маркеров методом ГХ-МС//Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы: сб. материалов междунар. конф. -М., 2004. -С. 20-21.
- Минорные жирные кислоты биологических жидкостей урогенитальных органов и их значимость в диагностике воспалительных процессов/Т.А. Крымцева и др.//Журн. микроб. эпидем. и иммун. -2003 -№ 2. -С. 92-101.
- Спектр и уровень содержания низкомолекулярных соединений микробного происхождения при периодической болезни/Ж.А. Кцоян и др.//Вестник РАМН. -2002. -№ 2. -С. 41-45.
- Состав кожного сала, микроэкология кожи и кишечника у больных себорейным дерматитом и акне (исследование методом газовой хроматографии масс-спектрометрии)/И.В. Полеско и др.//Рос. журн. кож. и вен. бол. -2007. -№ 2. -С. 43-50.
- Хабиб О.Н., Белобородова Н.В., Осипов Г.А. Детектирование молекулярных маркеров бактерий в ткани клапанов сердца в норме и при патологии с применением метода газовой хроматографии и масс-спектрометрии//Журн. микроб. эпидем. и иммун. -2004. -Т. 7, № 3. -С. 62-65.
- 1992. Meningococcal endotoxin in lethal septic shock plasma studied by gas chromatography, mass-spectrometry, ultracentrifugation and electron microscopy/P. Brandtzaeg et al. J. Clin. Investig. 89. -Р. 816-823.
- Comparison of species distribution and antimicrobial susceptibility of aerobic actinomycetes from clinical specimens/M.M. McNeil et al.//Rev Infect Dis. 1990. Sep-Oct. -12(5). -Р. 778-83.
- Evaluation of a commercial microbial identification system based on fatty acid profiles for rapid, accurate identification of plant pathogenic bacteria/D.E. Stead et al.//J. Appl. Bacteriol. -1992. -72. -Р. 315-321.
