Миксоспоридии рода Myxobolus (Cnidaria: Myxozoa) промысловых карповых рыб бассейна оз. Байкал

Представители класса Миксоспоридии (Myxosporea: Cnidaria) — микроскопические, облигатные многоклеточные организмы, принадлежащие к типу

Книдарий. Это одни из самых древнейших паразитических организмов, имевших первоначально одного хозяина — кольчатых червей, затем перешедших на второго хозяина — костистых рыб, амфибий, рептилий и птиц. Наиболее высокое видовое разнообразие отмечается у костистых рыб, локализуются они практически во всех органах. Самыми разнообразными среди миксоспоридий являются виды семейства Myxobolidae . Это паразиты пресноводных рыб, наиболее разнообразны у карповых [Шульман и др, 1984, Liu et al, 2016]. Myxobolus spp. имеют простую форму спор — двояковыпуклый круг или овал, иногда с заостренной апикальной частью. В догеномную эру идентификация видов основывалась в основном на морфологических признаках спор паразита [Шульман и др, 1984]. При этом многие виды имели широкий круг хозяев и локализацию в разных тканях организма. Cовре-менные методы определения видов миксоспоридий с помощью молекулярногенетических методов выявили их высокое разнообразие, а также гостальную и тканевую специфичность.

Первые сведения о миксоспоридиях оз. Байкал даны В. А. Догелем (1957), а затем обобщены [Пронина, Пронин, 2001]. Так ими представлено 45 видов мик-соспоридий, из них 18 видов относились к родам Myxosoma , Myxobolus . У рыб, преимущественно частиковых рыб (карася, плотвы, ельца, язя, леща, сазана, окуня), виды рода Myxobolus были определены как Myxosoma dujardini , Myxobolus muelleri , M. bramae , M. dispar , M. cyprinicola , M. pfeifferi , M.musculi , M. cyprini , M. carassii , M. pseudodispar , M. ellipsoides (табл. 1).

Материал и методы

Паразитологические вскрытия рыб оз. Байкал и его бассейна проводились в ходе мониторинговых исследований (2000–2020 гг.) лаборатории паразитологии и экологии гидробионтов ИОЭБ СО РАН: в Чивыркуйском заливе оз. Байкал N 53°39′, E 109°00′, в дельте р. Селенги N 52°06′13.0 ” , E106°13′58.4 ” , оз. Гусиное N 51°16′48.0 ” , E 106°28′13.7 ” , с 2010–2023 гг. Исследовались плотва Rutilus rutilus , елец сибирский Leuciscus lueciscus baikalensis , карась серебряный Carassius auratus gibelio, язь Liuciscus idus , сазан Cyprinus carpio по 15–25 экз. рыб одного размера в июне-июле ежегодно.

Геномную ДНК экстрагировали с помощью фенол-хлороформного метода. Амплификацию участка гена 18S rDNA проводили с помощью специфических праймеров MyxospecF (5’-CACCAGGTTGATTCTGCCTGAC-3’) и 18R (5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’) [Fiala, 2006; Whipps et al., 2003].

Анализ амплифицированных целевых фрагментов ДНК проводили методом разделения фрагментов ДНК в агарозном геле (концентрация агарозы от 1%) в присутствии интеркалирующего агента — бромистого этидия, который был использован с целью дальнейшей визуализации ДНК. Электрофорез проводили в камере для горизонтального электрофореза PowerPac с источником тока BioRad Electrophoretic bath (Bio-Rad, США). В качестве электродного буфера использовали 1х ТАЕ-буфер (40 mM Трис-основной, 20 mM уксусной кислоты, 1 mM ЭДТА). ДНК было очищено с помощью спиртов разной концентрации и гликогена. В дальнейшем ДНК было отправлено в коммерческую компанию, где с помощью прямого сиквенса получены последовательности нуклеотидов участка гена 18S r DNA, которые были депонированы в базу данных NBCI Genbank.

Результаты и обсуждение

В ходе исследования нами выявлено 13 видов Myxobolus spp. Из них у 12 видов получены сиквенсы и определена видовая принадлежность в программе Blast. Часть сиквенсов 18S r DNA была депонирована в Genbank.

Уточнен видовой статус у M. diversicapsularis , сиквенсы депонированы под номерами MK100344, MK100345; M. nielii OM190413; M. pseudodispar MK100343; M. feisti MW237662. Найденные нами виды: M. intimus , M. mucosus , M. alvare-zae , M. musculi имеют сходство на 99 % с подобными видами, представленными в Genbank. Также эти виды имеют сходную гостальность.

Описаны новые виды для науки: M. pronini KU524890, M. zhaltsanovae MN655878, M. nekrasovae OR143133 от карася серебряного Carassius auratus gibelio , M. zaikae MT141128 и MT141124 от плотвы Rutilus rutilus [Liu et al., 2016; Batueva, 2020; Batueva et al., 2023a; Batueva et al., 2023b]. M. koi нами определен по формам спор и по локализации. Этот вид был описан у карпа и имеет вытянутую форму апикальной части споры, что отличает M. koi от других видов.

Таблица 1

Уточненные данные некоторых видов миксоспоридий от рыб оз. Байкал

Плотва является хозяином видов: M. diversicapsularis, M. pseudodispar, M. zai-kae, M. feisti; елец — M. intimus, M. musculi, M. mucosus; язь — M. alvarezae; карась — M. pronini, M. zhaltsanovae, M. nekrasovae; сазан — M. koi.

Все исследованные нами виды рыб обладают своим набором паразитов. Это противоречит ранним догеномным представлениям о миксоспоридиях [Шульман, 1984]. Палеарктические по происхождению плотва, елец, язь имеют паразитов, которые отмечались в водоемах Венгрии [Molnár et al., 2010; Cech et al., 2012]. У карася серебряного и амурского сазана миксоспоридии отмечались в водоемах Китая [Liu et al., 2016; Camus &Griffin, 2010]. Таким образом, Myxobolus spp. тесно связаны со своими хозяевами и приурочены к определенным зоогеографическим районам.