Многофакторный анализ оценки влияния биологически активной добавки на основе спирулины на гематологические показатели крыс

Материалы и методы. Для определения оптимального сочетания спирулины и шрота амаранта был проведён многофакторный эксперимент. В опыте использовали взрослых беспородных крыс (самцов), которых содержали на стандартном рационе вивария, со средней массой 200-250 грамм. Животным с помощью зонда вводили спирулину и шрот амаранта в виде суспензии, приготовленной на воде очищенной в различных дозировках (0;15;30мг) и комбинациях в течение 5 недель. У животных изучали общеклинические показатели крови (количество эритроцитов, лейкоцитов, лейкоформула, содержание гемоглобина). Забор крови проводился из хвоста. Все показатели крови определяли у крыс до начала исследований, а также на 1, 4, 6, 8, 10, 12, 15, 18, 23, 28, 35 дни эксперимента.

Для определения влияния шрота амаранта, спирулины и их комбинации на общеклинические показатели крови нами был построен ортогональный центральный композиционный план [4], в котором в качестве независимых переменных использовались различные дозы спирулины и шрота амаранта в количестве (0;15;30мг). В композиционном плане применяли кодированные значения. Код -1 означает, что не использовали никаких добавок, код 0- использовали 15 мг вещества (шрота амаранта или спирулины), код +1 – 30 мг вещества (шрота амаранта или спирулины). Ортогональный центральный композиционный план имеет вид:

Планир. план	3**(2-0) полный факторный план, 1
	Шрот 1	Спирулина 2
1	-1	-1
2	-1	0
3	-1	1
4	0	-1
5	0	0
6	0	1
7	1	-1
8	1	0
9	1	1

Результаты исследований. В процессе эксперимента было проведено 9 опытов, результаты которых представлены в таблице 1.

Таблица 1

Влияние различных доз и сочетаний спирулины и шрота амаранта на гематологические показатели

№ опыта	Шрот амаранта, мг	Спирулина, мг	Гемоглобин, г/л	Эритроциты, 1012/л	Лейкоциты, 109/л
1	0	0	88	3,12	12,1
2	0	15	96	4,02	13,9
3	0	30	98	4,2	14,2
4	15	0	90	4,26	12,9
5	15	15	114	5,3	16,9
6	15	30	112	5,4	17,4
7	30	0	93	3,91	14,6
8	30	15	112	5,3	17,2
9	30	30	115	5,4	17,9

В первом опыте животные получали воду очищенную, количественные показатели гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов были достаточно низкими. Во втором опыте животные получали 15 мг спирулины, показатели крови практически не изменились. При добавлении в рацион шрота амаранта было отмечено некоторое увеличение этих показателей. При использовании комбинации спирулины и шрота амаранта, особенно в дозе 20 мг, отмечалось резкое увеличение показателей гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов. При дальнейшем увеличении дозы комбинации данных веществ (до 30 мг) уровни основных показателей крови варьировались слабо. В опыте также определяли процентное соотношение различных форм лейкоцитов (лейкоформула) и скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Колебания этих величин были в пределах ошибки опыта.

На основе опытных данных были построены поверхности отклика (рис. 1-3).

На рис. 1 показано влияние различных доз спирулины и шрота семян амаранта на уровень гемоглобина. Из рисунка видно, что значительное увеличение гемоглобина крыс наблюдается при добавлении в рацион комбинации спирулины и шрота амаранта в дозе 20 мг. Данные графики позволяют наглядно оценить влияние независимых переменных на общеклинические показатели крови. Очевидно, что максимально благоприятное влияние оказывает композиция 20 мг шрота амаранта и 20 мг спирулины.

Экспериментальные данные показывают, что количество эритроцитов резко увеличилось при использовании комбинации данных веществ в дозе 20 мг (рис. 2).

Дальнейшее увеличение дозы до 30 мг не вызывало значительных колебаний эритроцитов. Повышение гемоглобина, по всей видимости, повлекло и повышение количества эритроцитов. Лейкоциты - неоднородная группа различных по внешнему виду и функциям клеток крови человека или животных, выделенная по признаку отсутствия самостоятельной окраски и наличия ядра. Главная сфера действия лейкоцитов — защита. Они играют главную роль в специфической и неспецифической защите организма от внешних и внутренних патогенных агентов, а также в реализации типичных патологических процессов.

На рисунке 3 показано влияние различных доз спирулины и шрота семян амаранта на уровень лейкоцитов крови.

Подогнанная пов ерхност ь; Перемен.: Гемоглобин, г/л 2 3-х уров нев ые ф, 1 Блоки; Остаточн.SS=20,33333 ЗП: Гемоглобин, г/л

z=82;333333333333+1;0888888888889*x-;022222222222222*x^2 +1;6666666666667*y-;035555555555556*y^2+0;

Рис. 1. Влияние различных доз спирулины и шрота семян амаранта на уровень гемоглобина, г/л

Рис. 2. Влияние различных доз спирулины и шрота семян амаранта на количество эритроцитов,1012/л

Подогнанная пов ерхност ь; Перемен.: Лейкоцит ы, 109/л 2 3-х уров нев ые ф, 1 Блоки; Остаточн.SS=,4533333 ЗП: Лейкоцит ы, 109/л

z=11;366666666667+;20555555555556*x-;0033333333333333*x^2 +;26333333333333*y-;0051111111111111*y^2+0;

Рис. 3. Влияние различных доз спирулины и шрота семян амаранта на уровень лейкоцитов крови, 109/л

Из рисунка 3 следует, что достоверное увеличение числа лейкоцитов в крови наблюдается при введении в рацион крыс комбинации спирулины и шрота амаранта в дозе 20 мг.

Заключение. Исходя из результатов эксперимента, можно сделать заключение, что наиболее эффективное влияние на гематологические показатели крыс оказывает комбинация спирулины и шрота амаранта в дозе 20 мг.