Модифицированные белки эритроцитов крови больных хронической почечной недостаточностью

По данным крупных популяционных регистров, распространённость хронической болезни почек (ХБП) составляет не менее 10%, достигая 20% и более у отдельных категорий лиц (пожилые, больные сахарным диабетом). Согласно прогнозам экспертов ВОЗ, в период с 2006 по 2020 годы число больных терминальной почечной недостаточностью увеличится в мире в 4,7 раза. До сих остаются нерешенными вопросы лечения, замедления темпов прогрессирования и предот- вращения наступления терминальной почечной недостаточности. Во многом – это следствие того, что не до конца изучены детримальные механизмы становления и прогредиентного развития хронической болезни почек, приводящих к утрате почечных функций.

Одним из приоритетных направлений исследования механизмов развития и прогрессирования ХБП является изучение окислительного стресса. В последнее время особое внимание стали уделять изучению характера изменения и роли различных типов окисленных белков.

Целью нашего исследования явилось изучение содержания мембраносвязанного гемоглобина и карбониловых производных белков в эритроцитах крови больных ХБП с исходом в хроническую почечную недостаточность (ХПН) в зависимости от инициальной нозологической формы (пиелонефрит или гломерулонефрит) до и после проведения гемодиализа.

Больные были разделены на 2 группы. В первую группу вошли 38 больных ХБП – хроническим пиелонефритом (ХПЛ), приведшим к терминальной ХПН, вторую группу составили 16 пациентов с терминальной ХПН, развившейся на фоне ХБП – хронического гломерулонефрита (ХГН). В группу контроля вошли 25 практических здоровых лиц (первичных доноров).

Обследование больных и наблюдение за ними велись до начала заместительной терапии гемодиализом и во время программного хронического гемодиализа. До начала исследования от всех больных и здоровых лиц было получено информированное согласие на участие.

Кровь отбирали венепункцией в утренние часы и стабилизировали гепарином. Эритроциты отделяли от плазмы центрифугированием и трижды промывали охлажденным физиологическим раствором.

В эритроцитах крови определяли уровень реактивных карбониловых производных по методу R.L. Levine и соавт. [3]. Также в эритроцитах оценивали содержание мембраносвязанного гемоглобина по методу [2], результаты выражали в %. Мембраносвязанный гемоглобин в настоящее время позиционируется как один из вариантов модифицированных белков [1].

Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием пакета прикладных программ STATISTICA, версия 7.0, с учетом вычислительных методов, рекомендуемых для биологии и медицины. Статистические методы исследования включали в себя: расчет медианы и моды, среднего квадратичного отклонения. Для определения достоверности полученных показателей использовался F-тест Фишера.

По результатам исследования установлен достоверный рост реактивных карбониловых производных в эритроцитах крови больных 1 и 2 групп, а именно, 2-кратное увеличение этого показателя относительно контроля. Проведение гемодиализа не способствовало снижению содержания реактивных карбониловых производных в эритроцитах крови больных ХПН.

Определение мембраносвязанного гемоглобина показало, что у пациентов с различными нозологическими формы хронической болезни почек (ХБП): хроническим пиелонефритом, хроническим гломерулонефритом, – средние значения этого показателя составляют 3,67±0,92 при ХПЛ и 3,02±0,79 – при ХГН соот- ветственно. При этом в обоих случаях превышено значение контроля. Обращает на себя внимание вариабельность значения мембраносвязанного гемоглобина (в диапазоне от 1,5% до 12%) внутри каждой группы. После проведения гемодиализа зафиксирована слабая тенденция к увеличению мембраносвязанного гемоглобина: до 3,86±0,86 у больных ХПЛ и до 4,02±1,17 у больных ХГН. Следовательно, в эритроцитах крови больных ХБП на стадии терминальной ХПН зафиксирован рост реактивных карбониловых производных белков и тенденция к увеличению мембраносвязанного гемоглобина. Окислительное повреждение белков эритроцитов, безусловно, оказывает влияние на метаболизм эритроцитов, ограничивая их способность к обратимой агрегации, деформабильность и транспортные функции. Такие клетки демонстрируют повышенную тенденцию к образованию агрегатов, адгезии на эндотелии сосудов при снижении эффективного участия в газообмене.

Установленные факты требуют более предметного анализа. По нашим данным, можно утверждать, что терминальная ХПН сопровождается усилением карбонильного стресса одинаковой напряженности независимо от инициальной нозологической формы ХБП. Очевидно, следует рассмотреть особую роль эритроцитов и мембраносвязанного гемоглобина в усугублении тяжести состояния и возможности развития осложнений в ходе гемодиализа.