Морфофункциональная характеристика сперматозоидов у субфертильных мужчин
Автор: Первова Юлия Валерьевна, Русакова Наталия Викторовна, Старикова Татьяна Владимировна
Журнал: Морфологические ведомости @morpholetter
Рубрика: Краткие сообщения
Статья в выпуске: 2 т.29, 2021 года.
Бесплатный доступ
Мужские факторы бесплодия, включая снижение качества спермы, составляют 25-60% случаев бесплодия в целом, из них около 30% всех случаев относят к так называемому идиопатическому бесплодию. Указанное требует более детального изучения морфофункциональных характеристик сперматозоидов и их ультраструктурных компонентов. Цель исследования - изучение основных морфофункциональных характеристик сперматозоидов субфертильных мужчин репродуктивного возраста. Материал для исследования составили образцы спермы 85 пациентов в возрасте от 25 до 45 лет. В исследование были включены 25 клинически здоровых мужчин - группа сравнения; группу пациентов, обратившихся за помощью с целью оптимизации репродуктивного здоровья и планирования продолжения рода составили 60 мужчин. Рутинные исследования проводились с использованием фазово-контрастного микроскопа. Подсчет сперматозоидов проводился в камере Маклера. Изучение ультраструктуры сперматозоидов производили методом электронной микроскопии. Средние значения прогрессивно-подвижных сперматозоидов у группы субфертильных мужчин с проблемами репродуктивного здоровья составили 33,08±2,10%, что ниже, чем у пациентов группы сравнения - 54,35±2,58%. При ультраструктурном исследовании клеток спермы субфертильных мужчин обнаружена фрагментация ДНК сперматозоидов. Наибольший процент фрагментации ДНК выявлен у субфертильных мужчин-курильщиков, пожилых мужчин (более 22%). У группы пациентов с нормозооспермией в образцах среди сперматозоидов с нормальной формой головки выявлена аномальная морфология акросомы. Аномалии акросомы более чем в 50% случаев обнаружены у мужчин с идиопатическим бесплодием. Проведенное исследование мужчин с астенотератозооспермией и мужчин с идиопатическим бесплодием указывает на наличие крупных (более 1/3 площади ядра) вакуолей в хроматине ядер сперматозоидов при нормальной форме головки, что уменьшает шанс наступления беременности. В группе мужчин с нормозооспермией - пациентов с идиопатическим бесплодием обнаружены сперматозоиды с отсутствующей постакросомной пластиной. Таким образом, сперматозоиды с аномалиями строения в различных количествах встречаются в эякуляте субфертильных мужчин, включая случаи идиопатического бесплодия. Субфертильность у мужчин может быть вызвана повышенным содержанием в эякуляте сперматозоидов с теми или иными аномалиями строения. Использование электронной микроскопии в обследовании мужчин с репродуктивными дисфункциями дает более полную картину в выяснении причин нарушений сперматогенеза.
Спермограмма, сперматозоиды, ультраструктура сперматозоида, фертильность, бесплодие
Короткий адрес: https://sciup.org/143177338
IDR: 143177338 | DOI: 10.20340/mv-mn.2021.29(2).500
Текст краткого сообщения Морфофункциональная характеристика сперматозоидов у субфертильных мужчин
Pervova YuV, Rusakova NV, Starikova TV. The morphological and functional characteristics of spermatozoa in subfertile men. Morfologicheskie Vedomosti – Morphological Newsletter. 2021;29(2):500. (4).500
Введение . Бесплодие - глобальная проблема здравоохранения, затрагивающая 15% всех пар репродуктивного возраста. В последние несколько десятилетий во всем мире отмечается снижение фертильности мужчин [1-4]. Мужские факторы бесплодия, включая снижение качества спермы, обуславливают 25 – 60% этих случаев [5-7]. При этом около 30% всех случаев относят к так называемому идиопатическому бесплодию [8]. Указанное выше требует более детального изучения морфофункциональных характеристик сперматозоидов и их ультраструктурных компонентов [9].
Цель исследования: охарактеризовать морфологические и ультраструктур-ные особенности сперматозоидов у субфертильных мужчин.
Материалы и методы исследования. Под наблюдением находилось 85 пациентов в возрасте от 25 до 45 лет. В исследование были включены 25 клинически здоровых мужчин – группа сравнения; группа пациентов, обратившиеся за помощью с целью оптимизации репродуктивного здоровья и планирования продолжения рода – 60 мужчин Исследования проводились с использованием фазовоконтрастного микроскопа Nikon Eclipse E 200. Подсчет сперматозоидов проводился в камере Маклера. Взятие материала и исследование спермы проводили согласно стандартизованным методикам, предложенным экспертами ВОЗ [10]. Изучение ультраструктуры сперматозоидов проводили при увеличении 5000х (общий просмотр) и 16000х-18000х (исследование органоидов). Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием компьютерных программ SPSS 21 (IBM SPSS Statistics, USA, 2017 лицензия № 20130626-3). Описательные статистики для количественных показателей представлены в виде M±m, где M — среднее арифметическое, m — стандартная ошибка средней, либо, в случаях существенных отклонений от нормального закона распределения — в виде медианы и квартилей. Критическое значение уровня значимости принимали равным 0,05.
Результаты исследования и обсуждение. Проведя подробный анализ подвижности спермиев, мы выявили, что средние значения доли прогрессивноподвижных сперматозоидов у мужчин с проблемами репродуктивного здоровья составляют 33,08±2,10%, что ниже нормальных значений этого показателя (таблица 1). Как известно, такие сперматозоиды не способны оплодотворить яйцеклетку в естественных условиях. В контрольной группе среднее значение прогрессивноподвижных спермиев было равно 54,35±2,58%. Это свидетельствует о высокой оплодотворяющей способности сперматозоидов. Исходя из результатов нашего исследования, важно отметить, что процент неподвижных сперматозоидов у мужчин с репродуктивными дисфункциями был очень высоким (48,94±2,07%). При таких показателях оплодотворение яйцеклетке возможно только с помощью вспомогательных репродуктивных технологий.
Известно, что при оплодотворении яйцеклетки важное значение имеет не только количество и подвижность сперматозоидов, но и их морфология. Только сперматозоиды с нормальной формой способны оплодотворить яйцеклетку. Аномалии тела и хвоста сперматозоидов снижают шансы на зачатие естественным путем. Доля патологичных сперматозоидов у пациентов с репродуктивными дисфункциями составила 61,92±1,96% (таблица 1). Чаще всего отмечается патология головки и шейки сперматозоида. Несмотря на успехи в области вспомогательных репродуктивных технологий, невыясненными (идиопатическими) остаются 25—40% случаев мужского бесплодия.
Как известно, традиционное изучение показателей спермограммы является основным методом обследования мужчин при репродуктивных нарушениях. Однако показатели спермограммы могут значительно отличаться в группе фертильных и субфертильных мужчин и не представить полной картины об оплодотворяющей способности сперматозоидов. Ультраструктура сперматозоидов дает более полное представление о репродуктивных дисфункциях у мужчин. При ультраструктур-ном исследовании сперматозоидов была обнаружена фрагментация их ДНК. Наибольший процент (20%) выявлен у субфертильных мужчин, у курильщиков и пожилых мужчин (22%), при этом нормативные показатели фрагментации ДНК составляют 15%. У группы пациентов с нормозооспермией среди сперматозоидов с нормальной формой головки выявлена аномальная морфология акросомы. Аномалии акросомы в 50% случаев обнаружены у мужчин с идиопатическим бесплодием. Результаты исследования мужчин с астенотератозооспер-мией и мужчин с идиопатическим бесплодием также указывают на наличие крупных (более 1/3 площади ядра) вакуолей в хроматине ядер сперматозоидов при нормальной форме головки, что уменьшает шанс наступления беременности. В группе мужчин с нормо-зооспермией (пациентов с идиопатическим бесплодием) обнаружены сперматозоиды с отсутствующей постакросомной пластиной. Несмотря на то, что форма головки и структура хроматина этих сперматозоидов не отличаются от таковых у нормальных, подобные клетки не способны активировать ооциты. У пациентов с идиопатическим нарушением фертильности содержание сперматозоидов с незрелым хроматином составило 80-85%. Эти сперматозоиды имеют нормальную морфологию и нормальную подвижность. Полученные данные указывают на связь выявленной аномалии конденсации хроматина с нарушениями фертильности обследованных мужчин.
Таблица 1
Показатели |
Субфертильные |
Группа контроля |
p< |
Объем эякулята, мл |
2,65±0,20 |
3,56±0,28 |
0,014 |
Вязкость, см |
1,47±0,29 |
1,20±0,38 |
0,230 |
Количество клеток млн/мл |
30,61±3,82 |
81,43±8,70 |
0,075 |
Общее количество сперматозоидов млн/мл |
84,99±13,98 |
283,96±37,14 |
0,141 |
Доля нормальных клеток % |
38,08±1,96 |
49,13±2,59 |
0,355 |
Доля патологических клеток,% |
61,92±1,96 |
50,87±2,59 |
0,141 |
Доля клеток с патологией головки,% |
20,58±0,80 |
16,52±1,15 |
0,075 |
Доля клеток с патологией шейки,% |
18,46±0,88 |
15,43±1,13 |
0,011 |
Доля клеток с патологией хвоста, % |
11,73±0,53 |
9,57±0,70 |
0,157 |
Доля клеток с сочетанной патологией,% |
11,15±0,94 |
9,35±0,96 |
0,064 |
Доля прогрессивно подвижных клеток, % |
33,08±2,10 |
54,35±2,58 |
0,757 |
Доля непрогрессивно подвижных клеток,% |
17,98±1,44 |
17,83±1,77 |
0,157 |
Доля неподвижных клеток,% |
48,94±2,07 |
27,83±2,35 |
0,362 |
Лейкоциты, число в поле зрения |
1,26±0,24 |
1,39±0,28 |
0,088 |
Клетки сперматогенеза% |
3,09±0,29 |
3,17±0,32 |
0,006 |
Общие показатели эякулята исследованных групп мужчин (M±m)
Заключение. Таким образом, в эякуляте субфертильных мужчин в различных количествах встречаются сперматозоиды с аномалиями строения. Субфертильность у них может быть вызвана повышенным содержанием в эякуляте сперматозоидов с различными аномалиями строения. Использование в обследовании мужчин с репродуктивными дисфункция- ми различных методов исследования, включая ультраструктурные клеточные, дает более полную картину в выяснении причин нарушений сперматогенеза. Только комплексная оценка результатов, полученных несколькими взаимодополняющими методами и их взаимосвязей позволяет оценить фертильность мужчины.
Список литературы Морфофункциональная характеристика сперматозоидов у субфертильных мужчин
- Bragina EE. Kolichestvennoe elektronno-mikroskopicheskoe issledovanie spermatozoidov pri diagnostike muzhskogo besplodiya. Andrologiya i genital'naya khirurgiya. 2014;15(1):41-50. 10.17650/2070-9781-2014-1-41-502014. Russian. DOI: 10.17650/2070-9781-2014-1-41-502014.Russian
- Michael I. Heuristic Paradoxes of S.P. Kapitza Theoretical Demography. European Researcher. 2015;92(3):237-248.
- Reame V. Obesogenic environment by excess of dietary fats in different phases of development reduces spermatic efficiency of Wistar rats at adulthood: correlations with metabolic status. Biology of Reproduction. 2014;91(6):111-113.
- Salas-Huetos A. Dietary patterns, food POs and nutrients in male fertility parameters and fecundability: a systematic review of observational studies. Hum Reprod Update. 2017;23(4):371.
- Lestari SW. Sperm Na+, K+-ATPase a4 and plasma membrane Ca2+-ATPase (PMCA) 4 regulation in asthenozoospermia. Syst Biol Reprod Med. 2017;8(10):134.
- Priya PH. Restraint stress exacerbates Alcohol-induced reproductive toxicity in male rats. Alcohol. 2014;8(48):65-68.
- McCabe MJ. Gonadotropin suppression in men leads to a reduction in claudin-11 at the Sertoli cell tight junction. Hum Reprod. 2016;31(4):875.
- Rutinskiy AI. Osobennosti diagnostiki idiopaticheskogo muzhskogo besplodiya. Medikosotsial'nye problemy sem'i. 2013;18(1):116-121. Russian.
- Kravtsova NS, Rozhivanov RV, Kurbatov DG. Sovremennye metody gormonal'noy stimuliruyushchey terapii narusheniy spermatogeneza u muzhchin. Vestnik reproduktivnogo zdorov'ya. 2010;12:9-13. Russian.
- WHO laboratory manual for examination of human semen and sperm-cervical mucus interaction. M.: Izd-vo "MedPress"; 2010.144s. Russian.