Морфофункциональные изменения эпителия маточных труб крыс репродуктивного возраста при билатеральной овариоэктомии

Кораблева Т.В., Фоканова О.А., Батова А.К. Морфофункциональные изменения эпителия маточных труб крыс репродуктивного возраста при билатеральной овариоэктомии. Морфологические ведомости. 2025;33(3):933. (3).933

Korableva TV, Fokanova OA, Batova AK. The reproductive-age rats uterine tubes epithelium morphological and functional changes at bilateral ovariectomy. Morfologicheskie Vedomosti – Morphological newsletter. 2025;33(3):933. (3).933

Введение. Рак яичников наряду со злокачественными опухолями шейки и тела матки является одним из наиболее распространенных онкологических заболеваний. При ежегодном обследовании рак яичников в Российской Федерации диагностируется более чем у 11 тысяч на 100 тысяч женщин [1-2]. Одним из методов лечения является полное или частичное удаление яичников [1, 3]. Тесная анатомическая и функциональная взаимосвязь матки, маточных труб (далее МТ) и яичников предполагает, что оперативное вмешательство на одном из этих органов приводит к изменениям в другом [4] и влияет на весь организм в целом [5-9]. Одна из основных функций МТ - участие в транспортировке эмбриона в полость матки. Любые морфологические изменения, вызванные перестройкой гормонального фона, влиянием радиации, операционными вмешательствами могут приводить к нарушениям переноса эмбриона [5, 10-14]. Эти воздействия могут выражаться в качественном и количественном изменении секрета, изменении структуры и частоты биения ресничек эпителиоцитов, усиленной десквамацией клеток, что играет важную роль в патогенезе заболеваний репродуктивной системы [6, 13, 15-17], поэтому оценка состояния МТ при нарушении гормонального фона является актуальной.

Цель исследования: изучить морфофункциональную характеристику эпителиальной выстилки всех отделов маточных труб у крыс репродуктивного возраста при билатеральной овариоэктомии.

Материалы и методы исследования. Объектом для морфологического исследования послужили 20 самок крыс линии Вистар шестимесячного возраста. Все животные были разделены на две группы: 10 самок в контрольной группе, 10 самок с овариэоктомией. Овариоэктомия была использована как экспериментальная модель для исключения влияния гормонов яичников на МТ согласно общепринятой методике [6, 12, 15, 18]. Крыс выводили из эксперимента уретановым наркозом, 1000/кг, внутрибрюшинно. Содержание животных соответствовало правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в Российской Федерации (ГОСТ 351000.3-96 и 51000.4-96) и Приказу МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г. «Об утверждении правил лабораторной практики» с соблюдением Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных. Все эксперименты проведены в соответствии с российскими нормативами и современными международными биоэ-тическими стандартами по работе с лабораторными животными (заключение этического комитета Ярославского государственного медицинского университета Минздрава России, протокол № 4 от 18.10.2016 г.). МТ фиксировались в растворе забуференного 10% формалина, далее изготавливались парафиновые срезы толщиной 4 мкм и окрашивались гематоксилином и эозином. Подсчет клеток производился с учетом не менее чем 1000 клеток на каждого животного. Морфометрический анализ тканевых компонентов эпителиальной выстилки слизистой оболочки МТ измеряли в специальной программе ImageJ. Фазу эстрального цикла определяли при помощи окраски влагалищных мазков по протоколу RAPIHEM. Крысы контрольной и экспериментальных групп находились в фазе покоя [18-19]. Наряду с гистологическим исследованием, нефиксированные срезы МТ помещались в условиях контролируемой температуры в среду Eagle и изучались с помощью программно-аппаратного видео-микроскопического комплекса «Азимут». Компьютерная обработка полученных видеофайлов позволяет автоматически рассчитать частоту биения ресничек [13].

Распределение значения переменных в вариационных рядах первичных данных оценивали с помощью критерия Колмогорова–Смирнова, преобладало нормальное распределение. Значимость различий при нормальном распределении данных в выборке оценивали, используя параметрический метод t-критерия Стьюдента. Различия считали значимыми при р<0,05. Данные представлены как среднеарифметическое значение и стандартная ошибка средней (М±m). В отличие от человека МТ белой лабораторной крысы имеет вид тонкой извитой трубочки, спи- рально закрученной в компактный клубок, в которой выделяют воронку, ампулярную и маточную части. Так же, как и у человека, у самки белой крысы имеется внутренняя слизистая оболочка с тем же составом клеток в эпителии: реснитчатые (мерцательные), безреснитчатые (секреторные) и базальные (вставочные) клетки. Выбор крыс, как экспериментальных животных для моделирования данного симп-томокомплекса связан с тем, что их анатомо-физиологические характеристики сходны [20-22].

Результаты и обсуждение. Клеточные популяции эпителия МТ и их процентное соотношение у контрольных и опытных крыс анализировались на основе морфофункциональных показателей, обобщенных в таблице 1. У крыс в группе контроля на долю реснитчатых клеток в воронке приходится 90%, количество вставочных составляет 8%, секреторных - 2%. У овариоэктомированных крыс содержание секреторных клеток увеличилось в 3 раза. Высота реснитчатых клеток в норме составила 10,3±0,59 мкм, после проведения овариоэктомии произошел прирост этого показателей в 1,5 раза. Длина ресничек достоверно не изменилась. Частота биения ресничек (далее и в таблице - ЧБР) с 15,5±0,40 Гц в группе контроля снизилась до 9,25±0,10 Гц в эксперименте. Высота вставочных (4,50±0,67 мкм) и секреторных (6,9±0,4 мкм) клеток увеличилась почти в 2 раза.

В ампулярной части маточной трубы доля реснитчатых клеток у опытных животных достоверно не изменилась, содержание вставочных клеток у экспериментальных крыс снизилось в 2,6 раза с 13% до 5%, а доля секреторных клеток увеличилась в 3,5 раза с 2% до 7%. Высота реснитчатых клеток в контроле составила 10,8±0,35 мкм, у овариоэктомированных крыс происходит резкое увеличение этого показателя до 28,5±0,5 мкм. Такая же тенденция прослеживается у секреторных и вставочных клеток с 9,54 мкм до 26,21 мкм и с 6,82±0,4 мкм до 10,4 мкм, соответственно. Длина ресничек достоверно не изменяется. Анализ ЧБР показал снижение показателя в 1,7 раза с 13,9±0,82 до 8,47±0,2 Гц (таблица 1, рис. 1).

Содержание реснитчатых клеток маточной части при овариоэктомии уменьшается с 82% до 73%. Доля вставочных клеток не изменилась, а секреторных -возросла с 10 до 18%. Высота реснитчатых клеток увеличивается в 2,5 раза, секреторных – в 2 раза, вставочные клетки в этой части МТ меньше всего подвержены изменениям. ЧБР уменьшилась на 40%, высота ресничек не изменилась.

Рис. 1. Микрофото структуры эпителия ампулярной части маточной трубы крысы в контроле и в эксперименте с овариоэктомией. Обозначения: А - контрольная группа; Б - группа овариэктомии. Окр. гематоксилином и эозином. Ув.: х400;

В - фрейм видеофайлов прижизненной сьемки мерцания ресничек эпителия в контрольной группе; Г – после овариоэктомии. Ув.: х400.

Овариоэктомия влияет на клеточный состав выстилки маточных труб. Во всех отделах МТ происходит увеличение размеров высоты эпителиального пласта,

Таблица 1

Состав, морфометрические и функциональные показатели клеток эпителия слизистой оболочки маточных труб у крыс

но в большей степени этому влиянию подвержены ампулярная и маточная части. Частота биения ресничек у экспериментальных животных снизилась на 40% во всех отделах по сравнению с контрольной группой.

При микроскопическом исследовании тканевых срезов у группы экспериментальных животных во всех отделах наблюдаются многочисленные крупные клетки со светлой, не воспринимающей красители цитоплазмой. В подслизистой основе кровеносные сосуды полнокровны, наблюдается периваскулярный отек (рис. 1). Все вышеперечисленные изменения характерны для дистрофических и дегенеративных процессов.

Заключение. Выявленные реакции эпителиальной выстилки всех отделов маточных труб свидетельствуют о значительных морфофункциональных перестройках ее структуры у опытных животных. Для исследования отсроченных и компенсаторных возможностей маточных труб крыс при проведении двухсторонней овариоэктомии необходимы дальнейшие экспериментальные наблюдения. Настоящее исследование служит основой для уточнения представления о механизмах патогенеза тотальной овариоэктомии с последующим воздействием фармакологических гормональных препаратов на эпителий маточных труб.