Морфологическая оценка влияния нанораствора золота на репаративные процессы при хроническом гингивите

Бюллетень науки и практики / Bulletin of Science and Practice

УДК 616.311.2-08:612                              

Воспалительные заболевания десен занимают значительную долю среди заболеваний полости рта, а частота обращений пациентов к стоматологам с проблемами гингивита остается высокой [1].

Это связано с выраженным дискомфортом, вызванным воспалительными процессами. Наиболее частыми жалобами пациентов являются кровоточивость десен и боль при употреблении пищи. Гингивит характеризуется воспалением мягких тканей, окружающих зубы, при этом не происходит нарушения зубодесневого соединения. Наибольшее распространение гингивита наблюдается среди детей, подростков и молодых людей в возрасте от 18 до 30 лет [2].

Хронический катаральный гингивит является одним из наиболее часто встречающихся заболеваний десен. Этиология и патогенез гингивита сложны, и в его развитии участвуют как общие, так и местные факторы, в частности микрофлора полости рта [3]. Микроорганизмы, находящиеся в зубной бляшке, а также на поверхности зубов, в десневых бороздах и межзубных промежутках, способствуют запуску воспалительных процессов в тканях пародонта, что ведет к прогрессированию патологического процесса [4, 5].

Для поддержания клинического здоровья пародонта необходима функционально адекватная зона кератинизированной прикреплённой десны, поскольку широкая полоса плотной десны препятствует распространению воспаления. Узкая зона кератинизированной десны, напротив, может привести к развитию деструктивных процессов в пародонте, оголению шеек зубов и формированию рецессий. Корреляция между шириной кератинизированной десны и биотипом пародонта доказана многочисленными исследованиями [6, 7].

В связи с тем, что в данной работе изучался хронический гингивит, стоит отметить, что это заболевание также распространено среди кошек. Первые признаки воспаления слизистой оболочки ротовой полости у кошек и собак обычно включают отказ от корма или неохотное его поедание. Животные ощущают боль даже при минимальной нагрузке на зубной ряд или механическом воздействии на слизистую оболочку ротовой полости. По происхождению стоматиты подразделяются на первичные и вторичные, и чаще всего диагностируется катаральный стоматит. Основные клинические проявления включают гиперемию и отечность слизистой оболочки рта, повышенное слюноотделение, кровоточивость десен, а также галитоз (неприятный запах изо рта), который возникает как следствие развивающегося инфекционного процесса. Эти изменения слизистой оболочки полости рта связаны с наличием условно патогенной микрофлоры, в частности, веретенообразной палочки и спирохеты. Эти микроорганизмы вызывают серьезные воспалительные процессы в тканях десен, их кровоточивость, быстрое развитие некроза мягких тканей и поражение альвеолярной кости [8].

Степень воспаления может варьироваться, и в ряде случаев оно принимает тяжелую форму. Диагностика и лечение хронического гингивита у кошек представляют собой сложную задачу, и зачастую результаты лечения оказываются неутешительными как для ветеринарных специалистов, так и для владельцев животных. В настоящее время объем информации, касающейся причин тяжелого гингивита у кошек, не связанных с периодонтальными заболеваниями, остается ограниченным [9].

Несмотря на определенные успехи в лечении заболеваний пародонта, поиск новых методов лечения продолжает оставаться актуальным из-за широкой распространенности этих заболеваний. Чтобы получать более объективные данные на всех этапах исследований, необходимо проводить частые заборы биоптатов десны у людей, но это не всегда этично и связано с длительным восстановительным периодом. Именно поэтому существует необходимость использовать животных в качестве экспериментальных моделей для подобных исследований [10, 11].

Цель исследования: Определить влияние нанорастовора золота при хроническом гингивите у 20 беспородных кошек в возрасте от 2 до 4 лет.

Материалы и методы исследования

Исследование проводили на 20 кошках c массой тела 1.5-3 кг. Для проведения исследования была отобрана группа кошек с диагнозом хронический гингивит. Весь эксперимент был выполнен в соответствии с «Европейской конвенцией о защите животных, используемых для экспериментальных исследований или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г. В анамнезе все кошки с тяжелыми воспалительными процессами полости рта испытывали боли при приеме твердой пищи. Часто после приема твердой пищи отмечалась кровянистая слюна. У основной части животных наблюдалась потеря веса, которая представляла существенную проблему для организма. Первоначально проводилось обследование кошек, внешний осмотр, осмотр полости рта, оценку уровня гигиены рта, оценка кровоточивости десен. Перед началом экспериментального исследования оценивали общее состояние полости рта животных. Перед началом осмотра полости рта животным проводили пальпацию региональных лимфатических узлов. При внешнем осмотре было видно, что кошки неопрятны по причине того, что боль в ротовой полости вызывает отвращение к уходу за собой. Наблюдается агрессивное поведение основного количества животных к другим кошкам или персоналу клиники. Проводили осмотр полости рта, состояние пародонта и наличие над и поддесневых отложений. Доза нанораствора рассчитывалась в зависимости от массы тела кошки. Всем животным вводили 2 мл 0,1% нанораствора золота в подслизистую область. В течении всего экспериментального исследования осуществляли ежедневное наблюдение за животными для оценки состояния организма и количества потребляемой пищи и воды. Для проведения исследования был разработан алгоритм лечения хронического гингивита. Первым этапом вводили внутримышечно медетомидин в зависимости от массы тела животного, далее препарат Золетил (Zoletil). Каждой кошке проводили ультразвуковую чистку зубов скайлером на средней мощности для удаления твердых и мягких зубных отложений. В завершении ультразвуковой чистки следующим этапом была очистка поверхности зубов с помощью мелкоабразивной полировочной пасты. После чистки зубов провели подслизистое введение 2 мл 0,1% нанораствора золота по переходной складке. Моделирование осуществляли путем подслизистого введения нанораствора золота в область переходной складки в течение 21 дня, каждые 7 дней. Курс лечения составил 3 процедуры, с интервалом 7 дней. Небольшой участок десны кошек вырезали до и после лечения и фиксировали в нейтральном растворе формалина (10%) для дальнейшего гистологического исследования. Для предотвращения инфицирования слизистой оболочки в месте иссечения тканей предварительно проводилась антисептическая обработка 0,05 % раствором хлоргексидина биглюконата в виде аппликации в течение 3 минут. Далее с целью профилактики болевого симптома использовали 10% раствор новокаина в виде аппликаций. Стерильным скальпелем иссекали небольшой участок маргинального отдела десны размером не более 5 мм. После проведения процедуры на рану накладывали гемостатическую повязку. Изготовленные парафиновые срезы (4-5 мкм) окрашивали гематоксилином и эозином по общепринятой гистологической схеме.

Данные для клинического наблюдения собирали на 1, 7, 14 и 21 сутки. После проведенной первой процедуры введения нанораствора золота обьективно изменений не наблюдались. Данные для гистологического исследования собирали на 1 и 21 сутки.

При клиническом осмотре на 21 сутки у экспериментальных животных после третьей процедуры подслизистого введения нанораствора золота отмечалась положительная динамика в виде уменьшение отека маргинального участка десен, отсутствие кровоточивости и неприятного запаха из полости рта.

Рисунок 1. Фото до комплексной чистки и лечения

Рисунок 2. Фото после комплексной чистки зубов и третьей процедуры нанораствора золота

На Рисунке 1 — перед началом лечения и комплексной чистки зубов. Наблюдаются воспаленные участки десен с гнойным содержимым, запах изо рта, кровоточивость десен. Также наблюдаются гиперемированные участки углов рта. Объективно у животного значительная потеря веса по причине недостаточного потребления сухого корма. Кошка вынуждена питаться мягкой пищей. На Рисунке 2 — фото после комплексной чистки зубов и третьей процедуры подслизистого введения 0,1% нанораствора золота. Экспериментальное животное потребляет достаточное количество сухого корма, самостоятельно ухаживает за своим внешним видом. На Рисунке 3 — фото процесса ультразвуковой чистки одного из животного. При помощи ультразвуковой чистки полностью удаляли зубные отложения всем животным на первом этапе лечения.

Рисунок 3. Процесс ультразвуковой чистки зубов кошек

На Рисунке 4 — десна кошки до лечения, картина в виде скопления массивных лимфоидных инфильтраций под эпителием, пронизанная волокнами. Акантоз. Эпителий утолщен. Выраженный воспалительный процесс.

На Рисунке 5 — десна кошки через 21 день после эксперимента, авторы наблюдали скопление лимфоидной ткани, пронизанная утолщенными коллагеновыми волокнами, частично покрытой многослойным неороговевающим эпителием, эпителий истончен.

Рисунок 4. Десна кошки до лечения. Окраска гематоксилином и эозином

Рисунок 5. Десна кошки после лечения через 21 день эксперимента. Окраска гематоксилином и эозином

Результаты

Проведенные авторами экспериментальные исследования показали выраженную терапевтическую эффективность применения нанораствора золота, как способа лечения хронического гингивита на экспериментальных животных. При этом отмечалось полное отсутствие признаков воспаления (кровоточивости, патологической подвижности зубов и отделяемого при пальпации десны) после введения нанораствора золота, что подтверждает выраженное регенеративное действие. Наблюдения в динамике велись за кошками с хроническим гингивитом в течении 3 и 6 месяцев после экспериментального исследования.