Морфологическое и функциональное состояние зрелых мужских половых клеток после введения паклитаксела

ГУ «НИИ фармакологии Томского научного центра СО РАМН»

Актуальность. Использование таксансодер-жащих схем химиотерапии обусловили прорыв в лечении наиболее часто встречающихся форм злокачественных новообразований. В основе антипролиферативной активности таксанов лежит их способность стимулировать сборку аномальных микротрубочек. Спектр противоопухолевого действия препаратов этой группы постоянно расширяется, что позволяет получить выраженный клинический эффект у больных, резистентных к другим противоопухолевым препаратам, а также увеличить их общую и без-рецидивную выживаемость. Обнадеживающие результаты лечения пациентов, получающих таксансодержащие схемы, обусловливают необходимость более тщательного изучения их побочных эффектов на органы и ткани с высокой фракцией клеточного роста, к числу которых принадлежат половые железы.

Цель исследования. Изучение в эксперименте морфологического и функционального состояния зрелых мужских половых клеток в ранние сроки после введения препарата, принадлежащего к группе таксанов – паклитаксела.

Материал и методы. Эксперименты проведены на 32 белых крысах-самцах популяции Вистар, репродуктивного возраста (3 мес), массой 250 г, половину из которых составила контрольная группа. Противоопухолевый препарат паклитаксел (митотакс, «Dr.Reddy’s», Индия) вводили однократно внутривенно в максимально переносимой дозе (7,6 мг/кг), рассчитанной методом графического пробит-анализа при наблюдении за животными в течение 30 дней. При выборе дозы препарата ориентировались на то, что в клинике применяется в основном высокодозовая химиотерапия. Контрольные животные получали растворитель в эквивалентном объеме. Для исследования морфологического и функционального состояния зрелых мужских половых клеток крыс умерщвляли путем дислокации шейных позвонков на 1, 5, 16 и 36-е сут после введения препарата. При выборе сроков эксперимента учитывали длительность отдельных стадий созревания гомет. Сроки 1–6 соответствуют влиянию на сперматозоиды, 16 – на сперматиды, 36 – на сперматоциты. Животных вскрывали, извлекали хвостовые части придатков, определяли их весовые коэффициенты. Функциональное состояние зрелых мужских половых клеток оценивали по максимальной продолжительности их движения и по проценту подвижных форм. Для изучения морфологического состояния спермиев производили подсчет их общего количества, приходящегося на придаток, и определяли процент патологических форм. Для подсчета общего количества сперматозоидов использовали гомогенизированную клеточную взвесь одного из придатков в дозированном количестве физиологического раствора с применением лейкоцитарного меланжера и камеры Горяева. Второй придаток разрезали, делали мазок, фиксировали в метиловом спирте и окрашивали азур-II-эозином. Статистическую обработку материала проводили с использованием непараметрического критерия Вилкаксона–Манна–Уитни.

Результаты. Введение паклитаксела не вызывало статистически значимого снижения весовых коэффициентов придатка. Общее количество сперматозоидов, приходящихся на эпидидимис, снижалось статистически значимо (на 30 % от контроля) на 5 день эксперимента. В последующие дни опыта отмечалась более выраженная олигоспермия. ОКС уменьшалось до 54–48 % от контроля. Подсчет уровня патологических форм зрелых сперматозоидов показал, что значительное возрастание (в 4–5 раз) данного показателя наблюдалось в течение первых 5 дней эксперимента. К концу опыта уровень данного параметра снижался, но не достигал контрольных значений. Возрастание патологических форм зрелых сперматозоидов может свидетельствовать о генотоксических свойствах исследуемого препарата. При изучении влияния паклитаксела на функциональное состояние спермиев установлено, что препарат приводил с 5 по 36-й день опыта к снижению процента подвижных форм спермиев (p<0,05). Максимальное снижение этого показателя наблюдалось на 5-й день эксперимента, что соответствует воздействию на зрелые половые клетки. Процент подвижных форм составлял в этот период 66 % от контроля. Максимальная продолжительность движения сперматозоидов достоверно снижалась с 5 по 36-й дни эксперимента. Обращает на себя внимание тот факт, что с течением времени выраженность этого эффекта возрастала. Наиболее значимое его снижение (на 27 %) выявлялось на 36-й день опыта, что соответствует воздействию на сперматоциты.

Выводы. Противоопухолевый препарат паклитаксел оказывает токсическое действие как на морфологическое, так и на функциональное состояние спермиев. Судя по срокам проявления токсических эффектов, паклитаксел приводит к повреждению не только делящихся клеток сперматогенного эпителия (сперматоцитов), но и постмейотических эпителиоцитов (сперматид и сперматозоидов). Учитывая, что подвижность сперматозоидов является важным показателем фертильности эякулята, вероятным сроком возможного появления бесплодия могут быть 5-е сутки после введения препарата.