Мультибиоконверсионные твердофазные биопрепараты нового поколения на основе Bacillus subtilis и Trichoderma asperellum повышают эффективность защиты картофеля от фитофтороза

Автор: Титова Ю.А., Новикова И.И., Бойкова И.В., Павлюшин В.А., Краснобаева И.Л.

Журнал: Сельскохозяйственная биология @agrobiology

Рубрика: Картофелеводство: наука и технологии

Статья в выпуске: 5 т.54, 2019 года.

Бесплатный доступ

Против болезней картофеля в России в настоящее время используют 17 биопрепаратов на основе штаммов-продуцентов Bacillus subtilis и Trichoderma asperellum ( = T. harzianum ). В мире накоплен большой опыт получения и применения традиционных сухих и жидких препаративных форм промышленных биопрепаратов. Однако недостаточны сведения об эффективности форм, разрабатываемых на основе мультибиоконверсии техногенных отходов, что актуально в связи с экологической значимостью этой проблемы и поиском ресурсов дешевого и доступного сырья. Настоящая работа представляет успешный опыт использования растительных отходов в качестве субстрата при выращивании съедобных грибов, а затем микробных штаммов и получения гранулированных антифунгальных биопрепаратов. Это актуальный подход к биотехнологиям более безопасного использования отходов и превращения их в полезные продукты. Цель исследования - получить экспериментальные образцы принципиально новых мультибиоконверсионных препаратов на основе микробов-антагонистов для защиты картофеля от болезней и оценить их эффективность. Технология включала мультибиоконверсию растительных отходов (смесь опилок с пшеничными отрубями) посредством выращивания последовательно Lentinula edodes (Berk.) Pegler (шиитаке) и Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr.) P. Kummer НК-35 (вешенка), а затем штаммов-продуцентов B. subtilis B-10 и T. asperellum Т-36. Оценка питательной ценности субстрата, полученного в результате разложения целлюлозы и лигнина из первичной смести отходов, выявила более высокое содержание белка (9,4±0,3 против 2,7±0,3 и 4,3±0,1 %) и азота (1,5±0,3 против 0,4±0,1 и 0,6±0,1 %), а также пониженное соотношение C:N (38,3 против 81,2 и 92,9) по сравнению с субстратом, обычно используемым для выращивания шиитаке, или с торфом как одним из субстратов для твердофазной ферментации. Жидкий инокулюм штаммов-продуцентов получали на стандартных питательных средах Чапека (ООО «Биокомпас-С», Россия) и кукурузно-мелассовой («Каргилл», ООО «Агроресурс», Россия). При твердофазной ферментации дважды (мульти-) биоконвертированный субстрат (последовательное выращивание шиитаке и вешенки) инокулировали B. subtilis B-10 (0,9×109 сп/мл) и T. asperellum T-36 (2,8×1010 КОЕ/мл) и культивировали в течение 10 сут при 25-28 °С. Лабораторные образцы биопрепаратов тестировали в полевых условиях на картофеле сорта Елизавета (ПК «Шушары», Ленинградская обл., 2011 год). Применили взаимоортогональную организацию полевого опыта со сплошным размещением вариантов в 4-кратной повторности на площади 0,5 га; площадь учетной делянки - 10 м2, общий объем выборки - 482 растения. Препараты применяли 1-кратно: при посадке (12 мая 2011 года) клубни перемешивали в бункере картофелесажающего агрегата с твердофазными мультиковерсионными биопрепаратами при норме расхода в каждом варианте 1 кг на 1,5 т клубней (2 кг/га). Препараты сочетали с базовыми агротехническими и защитными мероприятиями, используемыми при выращивании сорта. Они включали послепосадочную обработку почвы гербицидом Sencor® (Зенкор Ультра, КС, 800 г/л; «Bayer Crop Science», Германия); послевсходовые 2-кратные (интервал 1 нед) внесения комплексного минерального препарата Terraflex® (Террафлекс 17/17/17, П, 2,8 и 1,6 кг/га; «Nu3 N.V.», Бельгия); послевсходовые 1-кратные внесения содержащего микро- и мезоэлементы комплекса Аквадон микро (2,0 л/га; «Оргполимерсинтез», Россия), микробиологического удобрения Экстрасола® (2 л/га; «Бисолби-Интер», Россия), стимулятора роста Циркон, Р (0,1 г/л; 10 г/га; АНО «НЭСТ М», Россия) и обработки гербицидами Лазурит Т, СП (700 г/кг; 0,5 л/га; АО «Август», Россия) и Titus™ (Титус, СТС, 250 г/кг; 20 г/га; «DuPont», США); также после смыкания рядков растения обрабатывали фунгицидами: Bravo® (Браво, КС, 500 г/л; 1,5 л/га; «Syngenta AG», Швейцария) и Ridomil gold® (Ридомил Голд, ВДГ, 640 + 40 г/кг; 1,5 л/га; «Syngenta AG», Швейцария) - через 2 нед, Revus® (Ревус, КС, 250 г/л; 250 г/га; «Syngenta AG», Швейцария) - через 4 нед и Shirlan® (Ширлан, СК, 500 г/л; 0,4 л/га; «Syngenta AG», Швейцария) - через 6 нед. Последнюю подкормку Террафлекс финал (2,8 кг/га) в сочетании с обработкой Ширлан, СК (0,4 л/га) проводили за 2 нед до уборки урожая. Вариант без применения биопрепаратов служил контролем. Использовали стандартные методы учета урожайности, биометрических (рост, облиственность) и фитопатологических (распространенность и развитие болезней) показателей, статистической обработки результатов (расчеты средних и их стандартных ошибок, дисперсионный анализ ANOVA). Статистическую значимость различий оценивали по t -критерию Стьюдента для попарного сравнения вариантов. Биометрические учеты с фиксацией появления симптомов заболеваний проводили на 3-недельных проростках (1-2-й ярус листьев) и при смыкании рядков, два фитопатологических учета - в начале и в конце цветения; финальный учет выполняли при сборе урожая клубней.

Еще

Биологическая эффективность биопрепаратов, биопрепараты для защиты картофеля от болезней, микробы-антагонисты, мультиконверсионные биопрепараты

Короткий адрес: https://sciup.org/142226338

IDR: 142226338   |   DOI: 10.15389/agrobiology.2019.5.1002rus

Список литературы Мультибиоконверсионные твердофазные биопрепараты нового поколения на основе Bacillus subtilis и Trichoderma asperellum повышают эффективность защиты картофеля от фитофтороза

  • Зейрук В.Н., Кузьмичев А.А., Глез В.М., Деревягина М.К., Васильева С.В., Абашкин О.В. Фитосанитарное состояние и мероприятия по борьбе с основными болезнями и вредителями в период вегетации и хранения картофеля. М., 2014.
  • Kubicek C.P., Komon-Zelazowska M., Druzhinina I.S. Fungal genus Hypocrea/Trichoderma: from barcodes to biodiversity. Zhejiang University Science B, 2008, 9(10): 753-763 ( ). DOI: 10.1631/jzus.B0860015
  • Reino L.R., Raul F., Hernandez-Galan G.R., Collado I.G. Secondary metabolites from species of the biocontrol agent Trichoderma. Phytochemistry Reviews, 2008, 7: 89-123 ( ). DOI: 10.1007/s11101-006-9032-2
  • Moradi H., Bahramnejad B., Amini J., Siosemardeh A., Haji-Allahverdipoor K. Suppression of chickpea (Cicer arietinum L.) Fusariums wilt by Bacillus subtilis and Trichoderma asperellum. Plant Omics Journal, 2012: 68-74.
  • Ru Zh., Di W. Trichoderma spp. from rhizosphere soil and their antagonism against Fusarium sambucinum. African Journal of Biotechnology, 2012, 11(18): 4180-4186 ( ). DOI: 10.5897/AJB11.3426
  • Kubicek C.P., Mach R.L., Peterbauer C.K., Lorito M. Trichoderma: from genes to biocontrol. Journal of Plant Pathology, 2001, 83: 11-23.
  • Benítez T., Rincon F.M., Limon M.C., Codon A.C. Biocontrol mechanisms of Trichoderma strains. International Microbiology, 2004, 7(4): 249-260 ( ).
  • DOI: 10.2436/im.v7i4.9480
  • Актуганов Г.Э., Галимзянова Н.Ф., Мелентьев А.И., Кузьмина Л.Ю. Внеклеточные гидролазы штамма Bacillus sp. 739 и их участие в лизисе клеточных стенок микромицетов. Микробиология, 2007, 76: 471-479 ( ).
  • DOI: 10.1134/S0026261707040054
  • Чеботарь B.К., Макарова Н.М., Шапошников А.И., Кравченко Л.В. Антифунгальные и фитостимулирующие свойства ризосферного штамма Bacillus subtilis Ч-13 - продуцента биопрепаратов. Прикладная биохимия и микробиология, 2009, 45(4): 465-471 ( ).
  • DOI: 10.1134/S0003683809040127
  • Аринбасарова А.Ю., Баскунов Б.П., Меденцев А.Г. Низкомолекулярный антимикробный пептид из Trichoderma cf. aureoviride Rifai ВКМF-4268D. Микробиология, 2017, 86(2): 258-260 ( ).
  • DOI: 10.7868/S0026365617020057
  • Коломиец Э.И., Бусько И.И., Ананьева И.Н., Абакшонок B.C. Биологическая эффективность препарата Бактосол против клубневых гнилей картофеля при хранении. Картофелеводство, 2013, 21(1): 220-227.
  • Джалилов Ф.С. Биологические препараты против болезней растений. Картофель и овощи, 2018, 8: 2-4 ( ).
  • DOI: 10.25630/PAV.2018.8.18269
  • Коломбет Л.В., Жиглецова С.К., Дербышев В.В., Ежов Д.В., Косарева Н.И., Быстрова Е.В. Микофунгицид - препарат на основе Trichoderma viride для борьбы с болезнями растений. Прикладная биохимия и микробиология, 2001, 37(1): 110-114.
  • Заика Н.А., Громовых Т.И., Ушанова В.М. Перспективы использования растительных субстратов для получения биопрепаратов защиты сеянцев хвойных. В сб.: Лесной и химический комплексы - проблемы и решения (экологические аспекты). Красноярск, 2004, 3: 34-37.
  • Sánchez C. Modern aspects of mushroom culture technology. Applied Microbiology and Biotechnology, 2004, 64(6): 756-762 ( ).
  • DOI: 10.1007/s00253-004-1569-7
  • Sánchez C. Cultivation of Pleurotus ostreatus and other edible mushrooms. Applied Microbiology and Biotechnology, 2010, 85(7): 1321-1337 ( ).
  • DOI: 10.1007/s00253-009-2343-7
  • Chitamba J., Dube F., Chiota W.M., Handiseni M. Evaluation of substrate productivity and market quality of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) grown on different substrates. International Journal of Agricultural Research, 2012, 7(2): 100-106 ( ).
  • DOI: 10.3923/ijar.2012.100.106
  • Li C., Chen C., Wu X., Tsang C.-W., Mou J., Yan J., Liu Y., Lin C.S.K. Recent advancement in lignin biorefinery: with special focus on enzymatic degradation and valorization. Bioresource Technology, 2019, 291: 121898 ( ).
  • DOI: 10.1016/j.biortech.2019.121898
  • Djarwanto, Tachibana S. Screening of fungi capable of degrading lignocellulose from plantation forests. Pakistan Journal of Biological Sciences, 2009, 12: 669-675 ( ).
  • DOI: 10.3923/pjbs.2009.669.675
  • Chukwurah N.F., Eze S.C., Chiejina N.V., Onyeonagu C.C., Ugwuoke K.I., Ugwu F.S.O., Nkwonta C.G., Akobueze E.U., Aruah C.B., Onwuelughasi C.U. Performance of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) in different local agricultural waste materials. African Journal of Biotechnology, 2012, 11(37): 8979-8985 ( ).
  • DOI: 10.5897/AJB11.2525
  • Čvančarová M., Křesinová Z., Filipová A., Covino S., Cajthaml T. Biodegradation of PCBs by ligninolytic fungi and characterization of the degradation products. Chemosphere, 2012, 88(11): 1317-1323 ( ).
  • DOI: 10.1016/j.chemosphere.2012.03.107
  • Jafarpour M., Eghbalsaeed S. High protein complementation with high fiber substrates for oyster mushroom cultures. African Journal of Biotechnology, 2012, 11(14): 3284-3289 ( ).
  • DOI: 10.5897/AJB11.1473
  • Sales-Campos C., Pires D.A., Barbosa S.R.L., Abreu R.L.S., Andrade M.C.N. In vitro cultivation of Pleurotus ostreatus and Lentinula edodes in lignocellulosic residues from Amazon. African Journal of Biotechnology, 2013, 12(46): 6526-6531 ( ).
  • DOI: 10.5897/AJB2013.12854
  • Титова Ю.А., Хлопунова Л.Б., Федорова Р.А., Зыков И.О. Производство вешенки путем мультибиоконверсии отходов производства шиитаке. В сб.: Современная микология в России. М., 2017, т. 7: 389-391.
  • Титова Ю.А., Долгих В.В., Богданов А.И. Особенности биоконверсии компонентов растительных субстратов штаммами-продуцентами биопрепаратов. Вестник защиты растений, 2014, 3: 46-49.
  • Новикова И.И. Биологическое разнообразие микроорганизмов - основа для создания новых полифункциональных биопрепаратов для фитосанитарной оптимизации агроэкосистем. Вестник защиты растений, 2016, 87(3): 120-122.
  • Титова Ю.А. Методология получения мультиконверсионных биопрепаратов для защиты растений. Мат. III Всероссийского съезда по защите растений. СПб, 2013, 2: 396-400.
  • Segarra G., Aviles M., Casanova E., Borrero C., Trillas I. Effectiveness of biological control of Phytophthora capsici in pepper by Trichoderma asperellum strain T34. Phytopathologia Mediterranea, 2013, 52(1): 77-83 ( ).
  • DOI: 10.14601/Phytopathol_Mediterr-11242
  • Федоренко В.Ф., Мишуров Н.П., Коноваленко Л.Ю. Современные технологии производства пестицидов и агрохимикатов биологического происхождения. М., 2018.
  • Новикова И.И., Бойкова И.В., Павлюшин В.А., Зейрук В.Н., Васильева С.В., Деревягина М.К. Биологическая эффективность препаративных форм на основе микробов-антагонистов для защиты картофеля от болезней при вегетации и хранении. Вестник защиты растений, 2015, 86(4): 12-19.
  • Зейрук В.Н., Васильева С.В., Новикова И.И., Бойкова И.В. Перспективы развития экологически безопасной защиты картофеля. Защита картофеля, 2018, 1: 23-28.
  • Новикова И.И., Титова Ю.А., Бойкова И.В., Зейрук В.Н., Краснобаева И.Л. Биологическая эффективность новых биопрепаратов на основе микробов-антагонистов в контроле возбудителей болезней картофеля при вегетации и хранении клубней. Биотехнология, 2017, 33(6): 68-76 ( ).
  • DOI: 10.21519/0234-2758-2017-33-6-68-76
  • Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. М., 1979.
  • Методы экспериментальной микологии: Справочник /Под ред. В.Н. Билай. Киев, 1982.
  • Методические указания по регистрационным испытаниям фунгицидов в сельском хозяйстве. СПб, 2009.
  • Иванов А.И., Корягин Ю.В., Анохин Р.В. Использование отработанного субстрата в качестве органического удобрения - важнейшее звено безотходной технологии выращивания грибов. XXI век: итоги прошлого и проблемы настоящего плюс, 2015, 27(5): 120-128.
  • Фомин И.В., Кшникаткин С.А. Производство органического удобрения в виде гранул из отработанного субстрата вешенки. Концепт, 2016, 11: 2791-2795.
  • Польских С.В., Мелькумова Е.А., Федюкина Ю.А., Одиловна Х.К. Влияние отдельных агроприемов и отработанных субстратных блоков вешенки обыкновенной Pleurotus ostreatus Fr. Kumm на формирование урожая поздних сортов картофеля. Вестник Мичуринского ГАУ, 2015, 2: 31-36.
  • Segarra G., Casanova E., Bellido D., Odena M.A., Oliveira E., Trillas I. Proteome, salicylic acid, and jasmonic acid changes in cucumber plants inoculated with Trichoderma asperellum strain T34. Proteomics, 2007, 7(21): 3943-3952 ( ).
  • DOI: 10.1002/pmic.200700173
  • Yoshioka Y., Ichikawa H., Naznin H.A., Kogure A., Hyakumachi M. Systemic resistance induced in Arabidopsis thaliana by Trichoderma asperellum SKT-1, a microbial pesticide of seedborne diseases of rice. Pest Management Science, 2012, 68(1): 60-66 ( ).
  • DOI: 10.1002/ps.2220
  • Singh V., Upadhyay R.S., Sarma B.K., Singh H.B. Trichoderma asperellum spore dose depended modulation of plant growth in vegetable crops. Microbiological Research, 2016, 193: 74-86 ( ).
  • DOI: 10.1016/j.micres.2016.09.002
  • Zhang F., Ruan X., Wang X., Liu Z., Hu L., Li C. Overexpression of a chitinase gene from Trichoderma asperellum increases disease Resistance in transgenic soybean. Applied Biochemistry and Biotechnology, 2016, 180(8): 1542-1558 ( ).
  • DOI: 10.1007/s12010-016-2186-5
  • Su S., Zeng X., Bai L., Williams P.N., Wang Y., Zhang L., Wu C. Inoculating chlamydospores of Trichoderma asperellum SM-12F1 changes arsenic availability and enzyme activity in soils and improves water spinach growth. Chemosphere, 2017, 175: 497-504 ( ).
  • DOI: 10.1016/j.chemosphere.2017.02.048
  • Asad S.A., Ali N., Hameed A., Khan S.A., Ahmad R., Bilal M., Shahzad M., Tabassum A. Biocontrol efficacy of different isolates of Trichoderma against soil borne pathogen Rhizoctonia solani. Polish Journal of Microbiology, 2014, 63(1): 95-103.
  • Mahmoud H.E.K., Amgad A.S., Anas E., Younes Y.M. Characterization of novel Trichoderma asperellum isolates to select effective biocontrol agents against tomato Fusarium wilt. The Plant Pathology Journal, 2015, 31(1): 50-60 ( ).
  • DOI: 10.5423/PPJ.OA.09.2014.0087
  • Li Y., Sun R., Yu J., Saravanakumar K., Chen J. Antagonistic and biocontrol potential of Trichoderma asperellum ZJSX5003 against the maize stalk rot pathogen Fusarium graminearum. Indian Journal of Microbiology, 2016, 56(3): 318-327 ( ).
  • DOI: 10.1007/s12088-016-0581-9
  • Qiong W., Ruiyan S., Mi N., Jia Y., Yaqian L., Chuanjin Y., Kai D., Jianhong R., Jie C. Identification of a novel fungus, Trichoderma asperellum GDFS1009, and comprehensive evaluation of its biocontrol efficacy. PLoS ONE, 12(6): e0179957 ( ).
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0179957
Еще
Статья научная