Новые мутации в гене-супрессоре опухолевого роста TP53 у больных раком молочной железы

Актуальность. Наиболее универсальным генетическим изменением в опухолях человека являются соматические мутации в гене ТР53. Белок р53, являющийся своего рода «стражем генома», поддерживает генетическую стабильность и удаляет потенциально опасные в плане злокачественного перерождения клетки. Мутации в гене ТР53 значительно модифицируют активность белка р53, что в целом отражается на запуске р53-опосредованных процессов, таких как репарация ДНК, апоптоз, клеточный арест и т.д. Опухоли с мутантным р53 характеризуются повышенной пролиферацией, усиленным ангиогенезом, способностью к метастазированию и устойчивостью к химио- и лучевой терапии. В настоящее время идентифицировано около 3 тыс. мутаций гена ТР53, встречающихся в 30–50% случаев рака молочной железы (РМЖ). Однако на территории Российской Федерации спектр мутаций гена ТР53 у больных РМЖ охарактеризован слабо (база данных мутаций гена ТР53, версия R14; Petitjean A. et al., 2007).

Целью настоящего исследования явилось изучение спектра мутаций в гене-супрессоре опухолевого роста ТР53 в опухолях молочной железы.

Материал и методы. В качестве исследуемого материала использовали опухолевую ДНК больных РМЖ (n=22), проходивших лечение в клинике НИИ онкологии СО РАМН. Анализ мутаций гена ТР53 проводился в 5-м и 8-м экзонах с помощью секвенирования. Секвенирование ДНК осуществляли в Межинститутском центре секвенирования ДНК ru/, созданном на базе Института цитологии и генетики СО РАН и Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, г. Новосибирск. Пакет прикладных программ DNAdynamo (Blue Tractor Software Ltd.) использовали для анализа хроматограмм секвенирования.

Результаты. У больных РМЖ в опухолевой ткани нами выявлены следующие мутации гена ТР53: c.426T>A (p.P142P) и c.488A>G (p.Y163C) в 5-м экзоне, c.827C>A (p.A276D), c.837G>T (p.G279G) и c.856G>A (p.E286K) в 8-м экзоне. Мутации c.488A>G, c.827C>A и c.856G>A ранее уже были идентифицированы при РМЖ (Davidoff A.M. et al., 1992; Hartmann A. et al., 1995; Kandioler-Eckersberger D. et al., 2000). Однако на территории РФ данные нарушения показаны впервые. Кроме того, мутации c.426T>A и c.837G>T прежде не детектировались у больных РМЖ. Функциональный эффект мутаций гена ТР53 различен. В большей степени он обусловлен типом нуклеотидной замены, отражающейся либо не отражающейся на изменении аминокислотного состава в структуре белка р53. Выделяют несколько типов мутаций. Наиболее часто встречающиеся (до 75%) -миссенс-мутации (несинонимичные замены), приводящие к замене аминокислоты в структуре белка. Мутации типа фреймшифт, нонсенс, сайленс (синонимичные) и сплайс встречаются много реже. В нашем исследовании мутации c.488A>G, c.827C>A, c.856G>A относятся к группе миссенс-мутаций и приводят к замене аминокислот Tyr>Cys, Ala>Asp, Glu>Lys соответственно. Мутации c.426T>A и c.837G>T являются сайленс-мутациями. Миссенс- и сайленс-мутации значительно различаются между собой по функциональным свойствам. Показано, что большая часть миссенс-мутаций приводит к потере связывающей способности белка р53 с ДНК и инактивации мутантным белком р53 белка р53 дикого типа. Все это позволяет отнести данную группу мутаций к генетическим нарушениям с ярко выраженными онкогенными свойствами (Brosh R., Rotter V., 2009). В отношении функциональной значимости сайленс-мутаций гена ТР53 однозначного мнения в настоящее время не выработано (Strauss B.S., 2000; Gorlov I.P., Amos C.I., 2004).

Таким образом, в ходе настоящего исследования у больных РМЖ были идентифицированы новые мутации гена-онкосупрессора ТР53 , ранее не встречавшиеся как на территории Российской Федерации, так и при самом заболевании. Функциональный эффект и роль в развитии РМЖ идентифицированных мутаций является предметом будущих исследований.