Оценка характера воздействия натурсила на обменные процессы в условиях эксперимента

Введение. Условия жизни в современном мире не способствуют улучшению здоровья и демографических показателей [1]. Воздействие различных по характеру, но повреждающих, по сути, факторов внешней среды – техногенной загрязненности, различных видов излучений, патогенной микрофлоры и других, вносит дисбаланс в процессы рецепции, связанные с восприятием и трансдукцией регуляторных сигналов, субстратное обеспечение органов и тканей, аккумуляцию и расходование энергии, нарушает оптимальный уровень жизнедеятельности организма [2]. Наиболее рациональным подходом в этом случае является использование в качестве протекторов и репарантов веществ растительного происхождения [3,4,5], поскольку вещества природного происхождения родственны организму и могут участвовать в обмене веществ в качестве естественных агентов [6].

Цель исследования. Определение влияния внутрижелудочного приема натурсила на процессы белкового, углеводного и липидного обмена.

Материалы и методы исследования. Эксперименты по определению характера влияния натурсила (РУ МЗ РФ № 96/185/5), который получают на основе липофильной фракции плодов расторопши пятнистой (Silybum marianum |L| Gaerth), на обменные процессы в организме проводили в течение 3-х месяцев на 130 лабораторных крысах линии Wistar (самцы и самки с первоначальной массой 200–230 г) при внутреннем применении. Животных содержали в клетках по 7–8 особей в условиях естественного освещения при температуре 20–22 ⁰С и относительной влажности 60–65 % на подстилке из древесных стружек, просте-рилизованных в сухожировом шкафу. Животные получали стандартный брикетированный корм, кормление проводили в одно и то же время, для питья использовали поилки. При проведении исследований животные были разделены на 2 группы: в опытной группе (20 крыс) животным ежедневно в желудок вводили натурсил в дозе 2 мл/кг; в контрольной группе (20 крыс) животным ежедневно внутрижелудочно вводили аналогичное количество подсолнечного масла. Введение препаратов осуществляли на протяжении трех месяцев.

До введения, а также через 1 и 3 месяца после начала введения натурсила оценивали вес животных с помощью электронных весов «Сарториус» (Германия), в крови определяли содержание гемоглобина гемоглобинцианидным методом, количество эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов подсчитывали на автоматическом счетчике крови «Пикоскель» (Венгрия); в сыворотке крови оценивали: содержание глюкозы с использованием набора реактивов фирмы «Labsystems» (Финляндия). Для определения содержания общего белка, креатинина, мо- чевины и общего билирубина, а также активности лактатдегидрогеназы и щелочной фосфатазы использовали наборы реактивов фирмы «Диаком-Синтеко» (Россия). Содержание общего холестерина и триглицеридов, а также активность ферментов аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы оценивали, используя наборы реактивов фирмы «Corway» (Польша). Исследования выполнены на полуавтоматическом анализаторе ФП -901 «Labsystems» (Финляндия). Для определения указанных показателей крови у крыс брали из хвостовой вены в объеме 2,0–2,5 мл.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием программ: MS Office 2000, MS Excel 7.0 for Windows. S-PLUS 2000 и Statistica 5,5.

Результаты исследования и их обсуждение. Полученные результаты показали, что при 3-месячном внутрижелудочном введении натурсила не произошло существенных изменений в поведении и внешнем виде животных: они имели гладкий шерстяной покров, охотно поедали корм, сохраняли обычную двигательную активность.

Масса тела крыс в опытной группе, получавших препарат в течение трех месяцев по сравнению с контрольной, возросла у самцов на 24,8 % (р<0,05), а у самок на 18,6 % (р<0,05). За 2 месяца (между 1 и 3 месяцами эксперимента) масса тела у самцов контрольной группы увеличилась на 40,9 %, тогда как в опытной – на 54,8 % (р < 0,05); а у самок – соответственно на 36,9 % и 45,27 % (р < 0,05). Таким образом, при введении на-турсила наблюдаемая прибавка в весе несколько больше у самцов, чем у самок (рис. 1).

Рис. 1. Динамика изменения массы тела (в % к исходной) при введении натурсила внутрь

Оценка на протяжении эксперимента динамики гематологических показателей свидетельствует о том, что в опытной группе как у самцов, так и у самок, происходит увеличение количества эритроцитов (табл. 1). По сравнению с контролем у самцов через 1 месяц их количество возрастает на 18,1 % (р<0,05), а через 3 месяца – на 19,2 % (р<0,05), а у самок соответственно на 13,7 % и 14,9 % (р<0,05). При этом в опытной группе по сравнению с исходными показателями у самцов через 1 месяц количество эритроцитов увеличивается на 23,2 % (р < 0,05), а к концу эксперимента на 26,1 % (р < 0,05); у самок соответственно на 16,9 % и 19,7 % (р < 0,05).

Таблица 1

Гематологические показатели животных, получавших натурсил внутрь

Периоды наблюдения	Группы животных
	Самцы		Самки
	Контроль	Опыт	Контроль	Опыт
Эритроциты, 1012/л
Исходно	7,2±0,3	6,9±0,2	7,2±0,3	7,1±0,4
1 месяц	7,2±0,2	8,5±0,3*	7,3±0,2	8,3±0,3*
3 месяца	7,3±0,3	8,7±0,4*	7,4±0,3	8,5±0,2*
Лейкоциты, 10 9 /л
Исходно	11,2±0,4	10,3±0,4	11,4±0,6	11,3±0,5
1 месяц	10,3±0,5	10,7±0,5	10,9±0,3	12,1±0,6
3 месяца	10,3±0,4	9,8±0,6	10,7±0,5	12,2±0,5
Тромбоциты, 10 9 /л
Исходно	497±31	498±28	507±32	503±26
1 месяц	510±29	505±25	511±27	521±23
3 месяца	507±25	507±27	491±31	497±19
Гемоглобин, г/л
Исходно	111±9	109±8	107±6	111±7
1 месяц	106±9	122±8*	109±5	123±5*
3 месяца	107±8	124±9*	111±7	126±6*

*р<0,05

Определение уровня гемоглобина показало, что в опытной группе у животных обоего пола происходит увеличение его количества. По сравнению с контролем у самцов через 1 месяц уровень гемоглобина возрастает на 15,1 % (р<0,05), а через 3 месяца – на 15,9 % (р<0,05), а у самок соответственно на 12,8 % и 13,5 % (р<0,05). При этом в опытной группе по сравнению с исходными показателями у самцов через 1 месяц содержание гемоглобина увеличивается на 11,9 % (р<0,05), а через 3 месяца на 13,8 % (р<0,05); у самок соответственно на 10,8 % и 13,5 % (р<0,05). Таким образом, максимальное влияние на эритропоэз осуществляется в первый месяц, в последующем достигнутые эффекты меняются незначительно. Что касается количества лейкоцитов и тромбоцитов, то на протяжении эксперимента существенных изменений этих показателей не выявлено.

Таблица 2

Содержание белка (г/л) в сыворотке крови животных, получавших натурсил

Периоды наблюдения	Контроль	Опыт
	Самцы
Исходно	51,5±1,3	50,2±1,6
1 месяц	53,3±1,9	59,4±1,8*
3 месяца	52,5±1,9	62,1±1,5**
	Самки
Исходно	52,9±1,6	51,7±2,1
1 месяц	53,1±1,9	58,9±1,9*
3 месяца	52,4±2,1	61,7±1,8**

*р<0,05, **р<0,01

В условиях хронического эксперимента выявлено увеличение общего белка в сыворотке крови, как у самцов, так и у самок (табл. 2). По сравнению с контролем у самцов через 1 месяц его количество возрастает на 11,4 % (р<0,05), а через 3 месяца - на 18,3 % (р< 0,01), а у самок соответственно на 10,9 % (р<0,05) и 17,7 % (р < 0,01).

При этом в опытной группе по сравнению с исходным уровнем белка у самцов через 1 месяц его количество увеличивается на 18,3 % (р<0,05), а к концу эксперимента на 23,7 % (р<0,01); у самок соответственно на 13,9 % (р<0,05) и 19,3 % (р<0,01). Как видно, наблюдаемое анаболизирующее действие натурсила несколько в большей степени проявляется у самцов.

Уровни содержания конечных продуктов белкового обмена - мочевины и креатинина в сыворотке крови животных, подвергавшихся воздействию компонентов, содержащихся в липидной фракции из расторопши, представлены в таблице 3.

Полученные данные свидетельствуют о том, что в ходе эксперимента в опытной группе у животных обоего пола выявлено снижение в сыворотке крови уровня мочевины. По сравнению с контролем у самцов через 1 месяц ее количество уменьшалось на 31,2 % (р<0,01), а через 3 месяца - на 39,3 % (р<0,01), а у самок соответственно на 29,8 % и 35,6 % (р <0,01). При этом в опытной группе (по сравнению с исходным уровнем данного показателя) у самцов через 1 месяц количество мочевины снижалось на 35,6 % (р<0,05), а к концу эксперимента на 43,4 % (р<0,01); у самок соответственно на 31,3 % (р<0,05) и 39,9 % (р<0,01).

Что касается содержания креатинина в сыворотке крови опытной и контрольной группы (табл. 3), то в ходе проведения эксперимента существенных колебаний данного показателя не отмечалось.

Таблица 3

Содержание конечных продуктов обмена белков в сыворотке крови животных, получавших натурсил внутрь

Периоды наблюдения	Группы животных
	Самцы		Самки
	Контроль	Опыт	Контроль	Опыт
Мочевина, моль/л
Исходно	10,23±0,47	9,87±0,86	9,61±0,49	9,46±0,71
1 месяц	9,24±0,76	6,36±0,79*	9,26±0,58	6,50±0,83*
3 месяца	9,21±0,53	5,59±0,76*	8,83±0,61	5,69±0,64*
Креатинин, мкмоль/л
Исходно	97,8±5,3	98,3±4,6	82,7±3,9	81,6±4,1
1 месяц	94,2±4,7	89,7±5,2	91,6±4,8	87,7±5,3
3 месяца	89,8±5,8	92,5±5,4	84,1±5,7	81,4±5,2

*р<0,01

Ферментативный спектр, оцениваемый в ходе проведения исследования, включал определение активности в сыворотке крови следующих ферментов: аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы и лактатдегидрогеназы (табл. 4).

Определение активности трансаминаз показало, что в опытной группе у животных независимо от пола происходит снижение их активности. Так, активность аланинаминотрансферазы уменьшилась по сравнению с контрол ем у самцов через 1 месяц на 13,8 %, а через 3 месяца - на 15,9 % (р < 0,05), а у самок соответственно на 14,6 % и 20,8 % (р<0,05). При этом в опытной группе по сравнению с исходным уровнем активности аланинаминотрансферазы 51

через 1 месяц у самцов активность снизилась на 20,4 %, а через 3 месяца на 21,5 % (р < 0,05); у самок соответственно на 18,4 % и 20,4 % (р < 0,05).

Таблица 4

Характер изменений показателей активности ферментов в сыворотке крови животных, получавших натурсил

Периоды наблюдения	Группы животных
	Самцы		Самки
	Контроль	Опыт	Контроль	Опыт
Щелочная фосфатаза, Е/л
Исходно	538,8±28,4	546,7±25,8	553,2±31,7	547,3±25,4
1 месяц	539,7±25,7	542,3±27,7	542,7±26,4	538,7±26,8
3 месяца	567,4±23,5	539,6±22,5	539,9±25,3	542,3±24,7
Аланинаминотрансфераза, Е/л
Исходно	67,5±6,4	71,2±7,7	69,7±7,3	67,3±5,7
1 месяц	65,8±6,7	56,7±6,5*	64,3±6,9	54,9±7,6*
3 месяца	67,5±6,5	55,9±4,2*	67,7±5,8	53,6±6,1*
Аспартатаминотрасфераза, Е/л
Исходно	154,4±13,6	156,3±12,6	144,3±12,6	141,7±13,4
1 месяц	151,5±12,5	122,8±12,8*	139,7±11,5	109,5±11,8*
3 месяца	142,3±10,6	113,9±12,4*	141,4±12,3	105,6±14,1**
Лактатдегидрогеназа, Е/л
Исходно	859,5±28,4	826,6±26,7	759,4±36,8	776,9±31,3
1 месяц	813,8±24,8	936,7±26,5*	741,9±26,3	861,3±26,3*
3 месяца	799,7±29,6	989,2±25,3*	736,4±25,7	888,9±21,9*

*р<0,05, **р<0,01

Характеризуя изменения активности аспартатаминотрансферазы, следует отметить, что по сравнению с контролем у самцов через 1 месяц ее активность снижалась на 18,9 % (р<0,05), а через 3 месяца - на 23,2 % (р<0,05), а у самок соответственно на 21,6 % (р<0,05) и 25,3 % (р<0,01). При этом по сравнению с исходными значениями активность аспартатаминотрансферазы в опытной группе у самцов через 1 месяц уменьшалась на 21,4 % (р<0,05), а к концу эксперимента на 27,1 % (р<0,01); у самок соответственно на 22,7 % и 25,5 % (р<0,01). Анализируя полученные данные, можно отметить, что при введении натур-сила активность аспартатаминотрансферазы снижается в большей степени, чем аланинаминотрансферазы.

Что касается активности щелочной фосфатазы у животных, получавших натурсил в течение всего эксперимента, то она существенно не отличалась от соответствующих показателей в контрольной группе.

Изменения активности лактатдегидрогеназы в ходе эксперимента по введению натурси-ла внутрь сводятся к следующему. В опытной группе у животных (как у самцов, так и у самок) происходит увеличение активности фермента. Она возрастала по сравнению с контролем у самцов через 1 месяц на 15,1 % (р<0,05), а к концу эксперимента - на 17,8 % (р<0,05), а у самок соответственно на 16,4 % и 19,1 % (р<0,05). При этом в опытной группе по сравнению с исходными показателями активность лактатдегидрогеназы через 1 месяц у самцов возрастала на 13,3 %, а через 3 месяца на 19,7 % (р<0,05); у самок соответственно на 10,9 % и 14,4 % (р<0,05). Повышение активности лактатдегидрогеназы при введении препарата может быть связано с усилением процессов катаболизма глюкозы.

В связи с этим для оценки влияния масла расторопши на углеводный обмен в условиях 3месячного хронического эксперимента определяли содержание глюкозы в сыворотке крови подопытных животных. Как показали проведенные исследования, при длительном введении препарата отмечена тенденция к некоторому снижению уровня глюкозы в крови как у самцов, так и у самок (табл. 5). Так, в опытной группе содержание глюкозы уменьшилось по сравнению с контролем у самцов через 3 месяца на 14,5 %, а у самок за тот же период на 13,9 % (р=0,05).

Таблица 5

Содержание глюкозы (ммоль/л) в сыворотке крови животных, получавших натурсил внутрь

Периоды наблюдения	Контроль	Опыт
	Самцы
Исходно	7,6±0,4	7,2±0,5
1 месяц	7,7±0,8	6,3±0,7
3 месяца	6,9±0,6	5,8±0,5
	Самки
Исходно	7,6±0,4	7,3±0,5
1 месяц	7,7±0,9	6,5±0,7
3 месяца	7,2±0,6	6,2±0,6

Для выявления возможного воздействия в условиях хронического эксперимента биологически активных веществ расторопши, содержащихся в натурсиле, на липидный обмен было исследовано содержание в сыворотке крови животных общего холестерина и триглицеридов. Полученные при этом данные представлены в таблице 6.

Выявлено снижение уровня триглицеридов в сыворотке крови в опытной группе, как у самцов, так и у самок. По сравнению с контролем у самцов через 1 месяц их содержание снижается на 25,0 % (р<0,05), а к концу эксперимента - на 33,9 % (р<0,05), а у самок соответственно на 24,1 % и 35,6 % (р<0,05).

При этом в опытной группе (по сравнению с исходным уровнем триглицеридов) у самцов через 1 месяц их количество снижается на 13,5 %, а через 3 месяца на 21,2 % (р<0,05); у самок соответственно на 28,1 % (р<0,05) и 33,3 % (р<0,01). В целом, отмеченное снижение уровня триглицеридов несколько более выражено у самок, что соответствует отмечаемому увеличению массы тела животных.

Таблица 6

Динамика содержания холестерина и триглицеридов в сыворотке крови животных, получавших натурсил внутрь

Периоды наблюдения	Группы животных
	Самцы		Самки
	Контроль	Опыт	Контроль	Опыт
Холестерин, моль/л
Исходно	1,46±0,16	1,32±0,16	1,32±0,15	1,26±0,17
1 месяц	1,48±0,18	1,29±0,19	1,24±0,12	1,42±0,21
3 месяца	1,38±0,16	1,44±0,17	1,37±0,18	1,21±0,14
Триглицериды, моль/л
Исходно	0,58±0,11	0,52±0,07	0,61±0,08	0,57±0,07
1 месяц	0,60±0,06	0,45±0,07*	0,54±0,06	0,41±0,04*
3 месяца	0,62±0,08	0,41±0,06*	0,59±0,08	0,38±0,06*

*р<0,05

Определяемые в ходе эксперимента показатели содержания уровня холестерина в сыворотке крови контрольной и опытной групп (самцы и самки) не выявили значимых закономерностей их изменений.

Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что длительное (в течение 3 месяцев) введение натурсила внутрь хорошо переносится животными и не вызывает отрицательных изменений в основных процессах обмена в организме интактных до начала эксперимента животных. Отмечена положительная динамика прибавки массы тела, возрастание количества эритроцитов и гемоглобина в крови, увеличение содержания в сыворотке крови общего белка, при этом уровень мочевины снижается, несколько уменьшается активность трансаминаз и увеличивается лактатдегидрогеназная активность, снижается содержание в сыворотке крови триглицеридов.