Оценка связи экспрессии рецепторов прогестерона (PR), эстрадиола (ER), HER2/Neu с особенностями внутриклеточного распределения белка теплового шока 27 КДА (Hsp27) в опухолевых клетках рака молочной железы

• ¹НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск, Россия

• ²НИ Томский ГУ, г. Томск, Россия

• ³Сибирский ГМУ, г. Томск, Россия

Рак молочной железы (РМЖ) устойчиво занимает лидирующие позиции в структуре заболеваемости и смертности женского населения во всем мире. В настоящее время для оценки особенностей клинического течения, возможного исхода заболевания и выбора адекватной тактики лечения помимо описания клинико-морфологических характеристик оценивают молекулярно-биологические свойства первичного опухолевого узла. К одним из таких показателей, отражающих биологические характеристики РМЖ, относят рецепторный статус опухоли, например, исследование экспрессии рецепторов прогестерона (PR), эстрогенов (ER) и эпидермального фактора роста (Her2/neu).

Согласно литературным данным в регуляции активности и экспрессии рецепторов могут участвовать представители семейства белков теплового шока (heat shock proteins, Hsp). Hsp участвуют в регуляции различных клеточных процессов (апоптоза, метастазирования, пролиферации, дифференцировки, клеточного цикла и т.д.). Основной функцией Hsp, как молекулярных шаперонов, является связывание новообразую-щихся белков и контроль корректного формирования их третичной структуры (фолдинг) [3].

Одним из представителей Hsp является белок теплового шока 27 кДа (Hsp27), который сверхэкспресси-руется во многих опухолевых клетках [1]. Шапиронная активность Hsp27 регулируется посттрансляционной модификацией. Так фосфорилирование Hsp27 обуславливает олигомеризацию шаперона, связывание его с белками-субстратами и как следствие реализацию внутриклеточных процессов. Например, фосфорилированная форма Hsp27 в цитоплазме клеток (перинуклеарной зоне) связывает рецептор к эстрогену β. При этом гиперэкспрессия Hsp27 подавляет 17β-эстрадиол-опосредованную транскрипцию генов [2].

Предполагается, что одним из механизмов, лежащих в основе отсутствия терапевтического эффекта герцептина при РМЖ, является участие Hsp27 в стабилизации Her2/neu. Так ингибирование Hsp27 потенцирует эффект герцептина, приводит к снижению уровня экспрессии Her2/neu и подавлению пролиферативной активности в опухолевой линии РМЖ в эксперименте [4].

Таким образом, можно предположить, что внутриклеточная локализация и особенности фосфорилированного статуса Hsp27 в опухолевых клетках РМЖ будут определять особенности экспрессии его белков-субстратов, в частности, рецепторов ER, PR и Her2/neu.

Цель исследования: оценить взаимосвязь функционального состояния Hsp27 с уровнем экспрессии рецепторов к половым гормонам (ER, PR) и Her2/neu на мембране опухолевых клеток рака молочной железы.

Материал и методы. В исследование были включены образцы биопсийного материала опухолевой ткани 81 пациентки с верифицированным диагнозом РМЖ (T 1-4 N 1-3 M 0 ). Определение уровня экспрессии фосфорилированной (p-Ser78) и нефосфорилированной формы Hsp27, рецепторов ER, PR и Her2/neu осуществляли иммуногистохимическим методом. Статистическая обработка данных проводилась SPSS Statistics 19.

Результаты и обсуждение. При проведении корреляционного анализа было выявлено наличие обратной зависимости уровня экспрессии Her2/neu и ко- личества клеток с ядерной локализацией Hsp27 (как с фосфорилированной (rS= – 0,52; p<0,001), так и с не-фосфорилированной формой шаперона (rS= – 0,48; p<0,05)). Данная зависимость, позволяет предположить о возможной координирующей функции Hsp27 в деградации мРНК Her2/neu. Установлена положительная зависимость общего количества клеток экспрессирующих нефосфорилированную форму Hsp27 с количеством клеток позитивно экспрессирующих ER (rS=0,30; p<0,05), что позволяет предположить о шаперонной роли Hsp27 в экспрессии данного рецептора, при этом связь между экспрессией RP и Hsp27 в опухолевых клетках РМЖ отсутствовала.

Выводы. Особенность фосфорилированного статуса и внутриклеточного распределения молекулярного шаперона Hsp27 в опухолевых клетках рака молочной железы имеет зависимость с уровнем экспрессии Her2/neu и ER, что открывает перспективы его дальнейшего исследования при различных молекулярных подтипах РМЖ.

Работа выполнена в рамках гранта Президента № МД-168.2014.7 и № МД-491.2013.7.