Оценка токсичности в экстракте травы буквицы

Бюллетень науки и практики / Bulletin of Science and Practice

УДК 615.322:543.422.3                           

Буквица лекарственная (Betonica officinalis L.) – многолетнее травянистое растение семейства Яснотковые ( Lamiaceae ), широко распространенное на территории Евразии и традиционно используемое в народной медицине при различных заболеваниях [1].

В литературных источниках встречаются данные о ее антибактериальных, противовоспалительных, антиоксидантных и ранозаживляющих свойствах [5, 7].

Эти фармакологические эффекты связывают с содержанием в траве буквицы биологически активных соединений, таких как фенольные соединения, флавоноиды, иридоиды и тритерпеноиды [5, 9].

Несмотря на длительную историю применения буквицы лекарственной в народной медицине, современная научная оценка ее безопасности и токсичности остается недостаточно изученной. Перед широким внедрением растительных препаратов, особенно предназначенных для длительного применения, необходимо всестороннее изучение их потенциальной токсичности.

Целью данного исследования является оценка острой, подострой и хронической токсичности экстракта из травы буквицы лекарственной на экспериментальных животных. Полученные данные позволят оценить потенциальные риски, связанные с применением препаратов на основе буквицы лекарственной, и определить возможность для дальнейшего изучения ее фармакологических свойств и разработки лекарственных средств на ее основе. Исследование является актуальным, поскольку предоставляет важную информацию для обеспечения безопасности использования буквицы лекарственной в медицине и фармации.

Материал и методы исследования

Для получения сухого экстракта было использовано сырье буквицы лекарственной, выращенной в Ботаническом саду им. И. И. Спрыгина Пензенского государственного университета. Собранное сырье (трава) было высушено на воздухе без доступа прямых солнечных лучей. Извлечение из сырья буквицы было получено с использованием спирта этилового 70% методом мацерации при соотношении серье — экстрагент 1:200, температуре 90°С и продолжительности 90 мин. Упаривание жидкого экстракта проводили на ротационном испарителе IKA RV 10 digital V (IKA, Германия). Количественное определение суммарного содержания флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-глюкозид и гидроксикоричные кислоты и в пересчете на хлорогеновую кислоту проводили методом дифференциальной спектрофотомерии [4, 8].

Оптическую плотность определяли на спектрофотометре СФ-102 (ЗАО «НПКФ Аквилон», Россия). Суммарное содержание флавоноидов в сухом экстракте составило 0,74%. Биофармацевтические исследования по изысканию рациональной основы проводили со следующими гелеобразователями: Карбопол, Натрия карбоксиметилцеллюлоза (Натрия КМЦ), Гидроксипропилметилцеллюлоза (ГПМЦ).

Сравнительное изучение высвобождения проводили методом диффузии в желатиновый гель в опытах in vitro . Максимальное высвобождение наблюдалось у лабораторного образца мягкой лекарственной формы (10,0): действующее вещество — сухой экстракт буквицы — 10%; основа — натрий карбоксиметилцеллюлоза (l.r., ACROS, ЕС) — 3%; вспомогательные вещества: натрий метилпарабен (ACROS, ЕС); натрий пропилпарабен (ACROS, ЕС), вода очищенная.

Изучение острой токсичности проводили на 18 белых нелинейных крысах обоего пола в возрасте 14-15 недель, самцы массой 240-280 г., самки 190-220 г. Подопытные животные были разделены на 3 группы (по 3 самцов и 3 самок): 1 группа — вводимая доза 1000 мг/кг; 2 группа — вводимая доза 2000 мг/кг, 3 группа — вводимая доза 5000 мг/кг. Исследуемый экстракт, предварительно был растворен в 1,5 мл дистиллированной воды. Наблюдения и оценка состояния за животными проводили в течение 14 дней после однократного введения образца [2, 6].

Исследование подострой токсичности проводилось на 30 белых нелинейных крысах обоего пола в возрасте 6-7 недель на момент начала эксперимента (указать точную начальную дату эксперимента, если возможно), самцы массой 150-180 г., самки 130-160 г. Животные были рандомизированы на 5 групп (по 3 самца и 3 самки в каждой):

Группа 1 (контрольная): Пероральное введение дистиллированной воды (эквивалентный объем растворителя, использованного для разведения экстракта).

Группа 2: Пероральное введение экстракта буквицы лекарственной в дозе 500 мг/кг массы тела.

Группа 3: Пероральное введение экстракта буквицы лекарственной в дозе 1000 мг/кг массы тела.

Группа 4: Пероральное введение экстракта буквицы лекарственной в дозе 2000 мг/кг массы тела. Исследуемый экстракт, предварительно был растворен в 1,5 мл дистиллированной воды.

Введение осуществлялось ежедневно, однократно в день, в течение 28 дней с помощью зонда для перорального введения [2, 6].

Исследование хронической токсичности проводилось аналогичным образом, как и исследование подострой токсичности, но с некоторыми изменениями: исследование проводилось на 40 белых нелинейных крысах обоего пола в возрасте 6-7 недель, самцы массой 150-180 г., самки 130-160 г. Животные были рандомизированы на 4 группы (по 5 самцов и 5 самок в каждой). Дозы экстракта буквицы лекарственной: 100 мг/кг, 300 мг/кг и 900 мг/кг. Продолжительность введения: 180 дней [2, 6].

Статистическая обработка результатов исследования проведена в соответствии с ОФС.1.1.0014 «Статистическая обработка результатов определения специфической фармакологической активности лекарственных средств биологическими методами» Государственной Фармакопеи РФ XV издания [3] с использованием компьютерных программ Microsoft Office Excel 2019.

Результаты и обсуждение

В ходе проведенных исследований по оценке острой, подострой и хронической токсичности экстракта из травы буквицы лекарственной ( Betonica officinalis L.) на экспериментальных животных (указать вид животных и количество в группах, если необходимо), были получены следующие результаты.

Определение острой токсичности. Пероральное введение раствора экстракта в дозах 1000, 2000 и 5000 мг/кг не привело к гибели животных в течение 2 недель наблюдения. После введения раствора экстракта не наблюдали снижение двигательной активности, замирания и диареи, спустя сутки токсических эффектов не наблюдали. За период наблюдения не отмечено достоверного изменения массы тела. Опытные группы самцов и самок не имели значимых отличий в проявлении токсических эффектов. На основании полученных данных, LD50 (летальная доза, вызывающая гибель 50% животных) экстракта буквицы лекарственной при пероральном введении для крыс превышает 5000 мг/кг.

Определение подострой токсичности. При ежедневном пероральном введении экстракта буквицы лекарственной крысам в дозах 500, 1000 и 2000 мг/кг массы тела в течение 28 дней не было выявлено статистически значимых изменений в общем состоянии, поведении, массе тела, потреблении пищи и воды по сравнению с контрольной группой. Гематологические и биохимические показатели крови существенно не отличались от контрольных значений. При патоморфологическом исследовании внутренних органов животных не было обнаружено каких-либо патологических изменений, связанных с введением экстракта.

Определение хронической токсичности . При ежедневном пероральном введении экстракта буквицы лекарственной крысам в дозах 100, 300 и 900 мг/кг массы тела в течение 180 дней также не было выявлено признаков токсического действия. Гематологические и биохимические показатели крови оставались в пределах физиологической нормы на протяжении всего периода исследования. Не было выявлено статистически значимых отклонений в морфологическом составе внутренних органов по сравнению с контрольной группой. Репродуктивная функция животных также не была нарушена.

Таким образом, проведенные исследования показали отсутствие острой токсичности экстракта буквицы лекарственной.

Заключение

На основании полученных данных, экстракт из травы буквицы лекарственной ( Betonica officinalis L.) не проявляет признаков острой, подострой и хронической токсичности при пероральном введении в исследованных дозах. Установлено, что LD50 для крыс превышает 5000 мг/кг массы тела. Длительное применение экстракта в дозах до 900 мг/кг не оказывает негативного влияния на общее состояние, гематологические и биохимические показатели, морфологическую структуру внутренних органов и репродуктивную функцию животных.

Финансирование : Исследование выполнено за счет средств гранта Российского научного фонда, проект № 24-25-20155.