Оценка влияния экзополисахаридов молочнокислых бактерий рода Lactobacillus на фагоцитарную активность макрофагов белых мышей

разных стадиях фагоцитоза оценивали через 30 минут, 1 и 6 часов инкубации. Фагоцитарный индекс (ФИ), индекс завершённости фагоцитоза (ИЗФ) и индекс активации киллинга (ИАК) определяли по [2]. Статистическую обработку результатов проводили методами вариационной статистики с применением t-критерия Стьюдента [1].

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В процессе исследований было показано, что у контрольной группы мышей, которым не вводили внутрибрюшинно ЭПС бактерий активность АМФ в процессе фагоцитоза S. aureus 209-Р через 30 минут, 1 час и 6 часов составила 8, 19 и 24% соответственно. Значения ИЗФ (-0,26) свидетельствовали о не завершённости фагоцитарного процесса (табл.1). Наибольшая активность ПМФ контрольной группы мышей была отмечена через 1 час фагоцитоза бактерий и составляла 25%, а к 6 часам количество активных ПМФ снижалось до 9%, при этом ИЗФ был равен 0,64, что позволило говорить о частичном переваривании микробных клеток (табл. 1).

В опытной группе животных, которым вводили лаксаран 1596, было обнаружено изменение активности макрофагов. Через 1 и 3 суток эксперимента активность АМФ была максимальной через 1 час фагоцитоза in vitro бактерий и составила 72 и 81% соответственно, что было достоверно выше контроля (табл. 1). Значения ИАК составили 0,85 и 0,52 соответственно, что было выше, чем в контроле. Данные ИЗФ свидетельствовали о частичном переваривании микробных клеток. На 5 и 7 сутки эксперимента максимальная активность АМФ отмечена на начальных этапах фагоцитоза (через 30 минут), а значения ИАК (-0,11 и – 0,09) были ниже контрольных показателей, что свидетельствовало о снижении фагоцитарной активности на завершающих этапах фагоцитоза.

Активность ПМФ в опытной группе животных на 1 сутки эксперимента через 30 минут, 1 час и 6 часов процесса фагоцитоза S. aureus 209-Р составляла 43%, 47% и 46%, что достоверно выше кон- трольных значений. На 3 сутки после введения лак-сарана 1596 наибольшая активность ПМФ отмечена через 6 часов процесса фагоцитоза S. aureus 209Р. На 5 сутки эксперимента активность ПМФ у белых мышей была на всех этапах процесса фагоцитоза достоверно выше контрольных значений. Максимальная активность зафиксирована через 1

час процесса фагоцитоза. Наибольшая активность ПМФ отмечена на 7 сутки через 30 минут от начала фагоцитоза бактериальных клеток, процесс фагоцитоза был не завершен (табл. 1). Скорость фагоцитоза во все сроки исследования была ниже, чем у контрольных макрофагов, ИАК имел отрицательные значения.

Таблица 1. Влияние лаксарана 1596 на альвеолярные и перитонеальные макрофаги в процессе фагоцитоза S. aureus 209-Р

Примечание: * - достоверные различия по сравнению с контролем при p<0,05.

Таблица 2. Влияние лаксарана 1936 на перитонеальные и альвеолярные макрофаги в процессе фагоцитоза S. aureus 209-Р

Примечание: * - достоверные различия по сравнению с контролем при p<0,05.

Таблица 3. Влияние лаксарана Z на альвеолярные и перитонеальные макрофаги в процесса фагоцитоза S. aureus 209-Р

Примечание: * - достоверные различия по сравнению с контролем при p<0,05.

При изучении активности макрофагов, выделенных от животных, которым вводили лаксаран 1936 в концентрации 0,006 г/мл, показано, что на 1 сутки эксперимента к 6 часам фагоцитоза активность АМФ была равна 40%, что в 1,6 раз выше контрольных значений, процесс фагоцитоза был не завершён (табл. 2). На 3, 5 и 7 сутки наибольшая активность АМФ наблюдалась через 30 минут фагоцитоза S. aureus 209-Р. ИЗФ на 3 и 5 сутки иммуногенеза после введения животным лаксарана 1936

был равен 0,3, что позволило говорить о частичном переваривании микробных клеток. На 7 сутки ИЗФ имел отрицательные значения и процесс фагоцитоза был незавершённым. ИАК для АМФ у мышей, которым вводили лаксаран 1936, на 1 и 7 сутки имел отрицательные значения -0,16 и -0,24, соответственно. Скорость фагоцитоза S. aureus 209-Р была ниже контрольных значений, в отличие от 3 и 5 суток эксперимента, когда ИАК был выше контроля и равен 0,62 и 0,56, соответственно. Актив- ность ПМФ у мышей на 1 и 3 сутки достигла максимума через 30 минут процесса фагоцитоза S. aureus 209-Р, процесс фагоцитоза был не завершенным (-0,06 и 0,06). На 5 и 7 сутки через 1 час содержание ПМФ составляло 42% и 28%, соответственно и наблюдалось частичное переваривание микробных клеток также как и в контроле. ИЗФ был равен 0,85 и 0,46. ИАК имел отрицательные значения на 1, 3 и 7 сутки. На 5 сутки скорость фагоцитоза была выше, чем в контроле в 1,3 раза (ИАК равен 0,21).

При введении животным лаксарана Z максимальное число активных АМФ во все сроки исследований наблюдалось через 30 минут фагоцитоза S. aureus 209-Р, к 6 часам фагоцитоза S. aureus 209-Р количество активных АМФ снижалось, что говорило о частичном переваривании микробных клеток. Было отмечено, что активность ПМФ у белых мышей этой группы была максимальной через 30 минут фагоцитоза S. aureus 209-Р во все сроки исследований (табл. 3). ИЗФ на 1 сутки эксперимента имел отрицательные значения, фагоцитоз был не завершён. На 3, 5 и 7 сутки наблюдали частичное переваривание микробных клеток. По оценке активации киллинга показано, что скорость фагоцитоза АМФ была выше, чем ПМФ.

Таким образом, как показали экспериментальные данные, лаксараны 1596, 1936 и Z оказывают влияние на активность макрофагов при фагоцитозе S. aureus 209-P. Как видно из полученных результатов наибольшее воздействие на макрофаги оказывал лаксаран Z. Он приводил к увеличению числа активных макрофагов, как альвеолярных, так и перитонеальных, способствовал увеличению переваривания микробных клеток и повышению индекса активации киллинга. Ранее было показано [4], что лаксаран Z оказывает влияние на продукцию провосполительных цитокинов (ИЛ-1α, ФНО-α) в сыворотке крови мышей при стафилококковой ин- фекции. Вполне возможно предположить, что лак-саран Z влияет на активность макрофагов через стимуляцию продукции цитокинов и тем самым приводит к увеличению поглотительной функции макрофагов.