Оптимальные параметры для изоляции протопластов мезофилла моркови in vitro

Выделение протопластов из различных видов растений является широко используемым методом. Целью данной работы является разработка эффективной системы выделения и очистки протопластов мезофилла Daucus сarota. Основные факторы, влияющие на качественные и количественные параметры процедур выделения протопластов, пытались оптимизировать, используя хорошо зарекомендовавшую себя технику слияния протопластов в качестве основы для всестороннего анализа, включая концентрацию сорбита на стадии предплазмолиза и продолжительность процесса ферментативной обработки. Эти ключевые переменные влияют на выход и выживаемость протопластов. В данном исследовании для выделения протопластов методом ферментативной обработки использовались листья моркови сорта «Vil-1» в качестве основного исходного материала. Полученные данные показали, что более высокая концентрация сорбита приводит к увеличению выхода протопластов, при этом оптимальной концентрацией является 0,5 М, что обеспечивает жизнеспособность до 95% протопластов. Кроме того, увеличение продолжительности ферментативной обработки с 2 до 6 часов максимально увеличивало как выход протопластов, так и их жизнеспособность. Наиболее благоприятными условиями для разделения протопластов были определены предварительная обработка 0,5 М сорбитом в течение одного часа в сочетании со смесью 1% целлюлазы, 0,1% пектиназы и 6-часовым периодом инкубации.