Особенности экспрессии белков Ki-67 и p53 в различных молекулярно-генетических подтипах рака молочной железы

Актуальность. Рак молочной железы (РМЖ) является одной из основных проблем клинической онкологии конца ХХ и начала ХХI века. Несмотря на активную разработку вопросов профилактики, диагностики и лечения РМЖ занимает ведущую позицию в структуре злокачественных заболеваний всего населения и остается на 1-м месте среди женщин. Ежегодно в Казахстане регистрируется 3100 новых случаев РМЖ, пятилетняя выживаемость составляет 49,5%.

В 2000 году Perou et al. была предложена новая молекулярно-генетическая классификацию РМЖ, базирующаяся на полном кластерном анализе 1753 генов. В результате авторами выделены 4 подтипа РМЖ: люминальный, базальный, HER2-позитивный и нормально-подобный. В последующие годы Mervi Laakso et al. опубликовали схематическую классификацию РМЖ, основанную на определении цитокератинового профиля опухолевых клеток РМЖ.

Цель исследования. Изучение экспрессии белка Ki-67 и белка P53 в различных молекулярно-генетических подтипах РМЖ.

Материал и методы – образцы ткани РМЖ (трепан-биоптаты и операционный материал) 164 женщин, находившихся на стационарном лечении в Казахском НИИ онкологии и радиологии МЗ РК в 2007-08 гг. Гистологическое исследование проводилось по стандартной методике. Определяли гистологический тип опухоли согласно классификации ВОЗ (Лион, 2003). Иммуногистохимическое исследование проведено с использованием моноклональных антител фирмы DAKO (Дания). При оценке экспрессии рецепторов стероидных гормонов пользовались полуколичественным методом по D.C. Allred (1998). Оценка экспрессии HER2neu проводилась в соответствии со стандартами, утвержденными FDA для HercepTest™. Экспрессию Ki67 в ядрах опухолевых клеток оценивали в %. При окрашивании менее 20% опухолевых клеток пролиферативная активность считалась низкой, при экспрессии Ki67 более чем в 20% клеток опухоли пролиферативная активность считалась высокой. Экспрессия белка Р53: высокий уровень - положительная реакция на более 10% ядер опухолевых клеток, низкий уровень – менее 10% ядер.

На основании двух классификаций нами был использован метод суррогатного выделения подтипов РМЖ, основанный на иммуногистохимическом исследовании рецепторов эстрогена (РЭ), рецепторов прогестерона (РП) и белка HER2neu. Полученные данные были занесены в созданную реляционную базу данных, с проведением последующего компьютерного анализа.

Результаты. Все больные разделены на 4 группы: люминальный А подтип (РЭ+ПР+HER2neu-) составил 46%, люминаль- ный Б (РЭ+ПР+HER2neu+) составил 18%, HER2neu+ подтип (РЭ-ПР-HER2neu+) составил 17%, базальный подтип (РЭ-ПР-HER2neu-) составил 19%. В люминальном А подтипе средний возраст составил 50±1.08 года (от 31 до 82 лет, интервал возраста 51 год), люминальном Б подтипе – 48±1.55 года (от 35 до 67 лет, интервал возраста 32 года), базальном подтипе - 48±2,14 года (от 25 до 71 лет, интервал возраста 46 лет), в подтипе HER2neu+ - 50±1,89 года (от 31 до 69 лет, интервал возраста 38 лет).

Во всех исследуемых подтипах РМЖ преобладал инвазивный протоковый вариант РМЖ и составлял от 64 до 89%. Инвазивная дольковая карцинома встречалась в среднем в 7% случаев, карцинома прозрачных клеток, – богатая гликогеном, в 4% случаев, прочие редко встречаемые формы составили 16% в совокупности. При распределении больных по этническим группам в группе с люминальным Б подтипом РМЖ выявлена 4-кратная разница между больными азиатской и европейской групп, тогда как в других трех подтипах соотношение не превышало 2 раз.

Наиболее высокий уровень пролиферативной активности опухолевых клеток (Ki-67) наблюдался в базальном подтипе РМЖ (54, 9%), наименьший – в люминальном А (24,2%), что в 2,3 раза меньше (r = –0,946). Положительная экспрессия апоптотического белка р53 чаще встречалась в базальном подтипе РМЖ (74%), что в 2,2 раза выше, чем в люминальном А подтипе (r = –0,286). Установлена положительная корреляционная зависимость между экспрессией p-53 в базальном и HER2neu+ подтипах, r = 0,288 и отрицательная корреляционная зависимость – в люминальном А и HER2neu+ подтипах, r = –0,286. Получены достоверные результаты отрицательной корреляционной зависимости между уровнями экспрессии Ki-67 и р-53 в люминальном А подтипе (r = –0,555) и положительной корреляционной зависимости базальном подтипе РМЖ (r = 0,285).

Выводы. Установленная высокая пролиферативная активность и высокий уровень апоптоза опухолевых клеток в базальном подтипе РМЖ и относительно низкий уровень этих же показателей в люминальном А подтипе свидетельствует о более злокачественном течении и согласуется с литературными данными.