Особенности эритроцитарной взвеси, приготовленной в системе длительного хранения с использованием нового добавочного раствора PAGGSM

Пролонгирование сроков хранения эритроцитсодержащих компонентов крови является ключевой задачей адекватной логистики донорских ресурсов и показательным организационным решением, направленным на успех менеджмента крови. В практике последних десятилетий такая задача поддерживалась за счет использования растворов расширенного хранения, химический состав которых подразумевает переливание донорских эритроцитов в течение 42 дней со дня заготовки крови. В настоящее время учреждения службы крови в разных странах начали рассматривать внедрение нового добавочного раствора для эритроцитов, позволяющего удлинить эти сроки до 49 дней. Что касается вопросов динамики их качества, то в мировой медицинской литературе уже накоплено десятки публикаций результатов исследований в отношении метаболики и протеомики эритроцитов в различных средах расширенного хранения в их критических сроках хранения.

Дизайн исследования определил результирующим показателем качество эритроцитов, приготовленных с использованием систем сбора и переработки крови с новой средой длительного хранения PAGGSM. Планировалось изучение дина- мики гемоглобина, гематокрита и степени гемолиза в дозах цельной крови во время ее сбора и процессинга, а также в полученных дозах эритроцитарной взвеси в их условных критических сроках хранения – день 1, 7, 21, 35, 42, 49. При этом контрольными образцами были назначены системы сбора и переработки крови с рутинной средой длительного хранения SAGM. Были разработаны и реализованы протоколы сбора и систематизации данных процессинга крови, данных визуального и лабораторного мониторинга полученных компонентов. Также дизайн исследования рассматривал рекрут только «Кell позитивных доноров» из электронной базы донорства, чтобы обеспечить снижение нагрузки на элективную и рутинную заготовку компонентов крови и бережное отношение к донорским ресурсам, поскольку заготовленные дозы эритроцитсодержа-щих сред исключаются из программы клинической трансфузии. Они подлежат визуальному и лабораторному мониторингу в течение их срока годности согласно предварительно установленной схемы с финалом 42 и 49 дней в зависимости от вида среды «расширенного хранения». Доноры привлекались на исследование с соблюдением принципов добровольности и в рам- ках прозрачной процедуры предоставления информации и получения согласия. Допуск доноров на донацию цельной крови осуществлялся согласно рутинной практики обследования и отбора, а также с учетом критериев включения и исключения. В исследовании эксплуатировались ресурсы учреждения службы крови в виде его рабочей платформы и оборудования с участием квалифицированного персонала в рамках их рутинного набора должностных и служебных обязательств без сверхнормативной трудовой нагрузки. Исследование разработано как саморегулируемый проект без каких-либо дополнительных затрат, связанных с аутсорсингом или еще каким-либо дополнительным сервисом. Проект исследования был рассмотрен на заседании локальной этической комисси и одобрен как приемлемый по всем пунктам требований.

Результаты исследования

Поскольку предоставляемый материал исследования включает результаты только 3 начальных критических сроков хранения эритроцитов, этот абстракт является промежуточным отчетом прикладного исследования функциональности новой системы длительного хранения эритроцитсодержа-щих сред с раствором PAGGSM.

В исследование включено 8 образцов системы сбора крови из основной группы с привлечением 8 выбранных доноров, а также 9 образцов системы сбора из контрольной группы с привлечением 9 выбранных доноров. Системы сбора крови как основной, так и контрольной группы имеют одинаковую конструкцию и одинаковый лейкофильтр цельной крови, за исключением добавочного раствора эритроцитов – PAGGSM и SAGM [1]. Операционные спецификации как основных, так и контрольных систем сбора крови на предмет обнаружения дефектов и болезненности от иглы при флеботомии протестированы как удовлетворительные. Донация крови проводилась с использованием гемомиксеров-весов «T-RAC» («Terumo BCT Europe», Belgium) [2] и во всех образцах крови был соблюден стандартный целевой объем крови 450 мл ±10%, кроме одного из контрольной группы, где по техническим причинам не состоялась донация. Поэтому на этом этапе количество исследований уравнялось в обоих группах – 8 / 8. Продолжительность времени донации крови в основной группе в среднем 9 минут, в контрольной 10 минут.

Все дозы цельной крови выдержаны минимум 2 часа на полочках при комнатной температуре. Взяты образцы крови на гематологическое исследование на гема-нализаторе «Sysmex XS-500i» («SYSMEX EUROPE SE», Germany) до и после лейко-редукции, а также на подсчет остаточных лейкоцитов в фильтрованной крови на проточном цитометре «BD FACSCalibur» («BD Biosciences», USA). Лейкофильтра-ция цельной крови прошла без блока, продолжительность времени фильтрации в основной группе в среднем 24 минут, в контрольной – 19 минут. Уменьшение объема крови после фильтрации в основной группе на 10%, в контрольной – 8%. Условия центрифугирования: аппарат «Sorvall RC 3 plus» («Thermo», USA), жесткий режим вращения, температура +220C, время 15 минут. Разделение компонентов на автоматическом фракционаторе крови «TАСЕ–II» («Terumo BCT Europe», Belgium). В основной группе объем эритроцитарной взвеси в среднем 305 мл, плазмы 266 мл, в контрольной – 302 мл и 265 мл соответственно. Были исключены от дальнейшего наблюдения и исследования образцы одной донации основной группы, а также образцы двух до-наций контрольной группы после стандартной процедуры выбраковки и квалификации. Таким образом, в графике визуального и лабораторного мониторинга в условиях холодильника с температурой хранения +4±20C остались дозы эритроцитарной взвеси в основной группе 7, а в контрольной 6.

Лейкоредукция цельной крови в обоих группах показало высокое качество – резидуальные клетки 0,025×106 и 0,08×106.

Таблица 1. Лабораторный мониторинг динамики гематологических параметров доз эритроцитарной взвеси в условно критические сроки хранения

Итак, в указанные сроки хранения отмечается незначительная редукция объема эритроцитов в обоих группах, которая связана с отбором лабораторных образцов. Гемоглобин и гематокрит остаются относительно стабильными. Степень гемолиза с незначительной динамикой, но на 21 день хранения в основной группе 1,5 раза ниже по сравнению с контрольной.

Выводы. Предварительные результаты лабораторного мониторинга экспериментальных образцов эритроцитарной взвеси в среде расширенного хранения PAGGSM в течение 21 дня позволяет ожидать удовлетворительную динамику гематологических параметров к концу обявленного срока хранения, соответствующие требованиям стандарта.