Особенности молекулярного профиля и клеточного цикла линий MCF-7 и MCF-7/Dox под влиянием свободной и липосомальной форм доксорубицина

Среди многих цитостатических препаратов, используемых для лечения рака молочной железы (РМЖ), важное место занимают антраци-клиновые антибиотики. Наряду с этим, одной из проблем, возникающих при лечении РМЖ антрациклинами является их высокая кардиотоксичность, а также развитие устойчивости опухоли к этим препаратам в ходе лечения.

Клинические наблюдения последних лет показали, что одним из перспективных способов преодоления данных проблем является использование антрациклиновых антибиотиков, инкапсулированных в липосомы. Вместе с тем в доступной нам литературе практически отсутствуют данные, посвященные изучению механизмов действия липосомальных антрациклинов на клетки с фенотипом лекарственной резистентности.

Цель исследования – изучить особенности влияния свободной и липосомальной форм доксорубина на молекулярный профиль и клеточный цикл чувствительных и резистентных линий РМЖ.

Методы. Культивирование клеток в системе in vitro , МТТ-тест, иммуноцитохимический, проточная цитофлюорометрия.

Результаты. Согластно данным, полученным нами ранее, формирование фенотипа лекарственной устойчивости к доксорубицину в клетках РМЖ человека линии MCF-7 сопровождалось изменением рецепторного статуса, повышением адгезивных свойств клеток и снижением их пролиферативной активности (за счет изменения уровня экспресии белков-регуляторов клеточного цикла). Следует отметить, что чувствительные и резистентные к доксорубицину клетки РМЖ человека характеризовались одинаковым распределением клеток по фазам клеточного цикла. Культивирование чувствительных клеток линии MCF-7 со свободной формой доксорубицина приводило к значительному снижению их пролиферативной активности, уровня экспрессии рецепторов сте- роидных гормонов и металлотионеинов. Кроме того, влияние свободной формы доксорубицина вызывало в чувствительных клетках изменения экспрессии белков-регуляторов клеточного цикла (снижение циклина D1, pR, c-myc и повышение р-21), что приводило к задержке клеток в G0/ G1-фазе. Культивирование клеток резистентной линии M. CF-7/Dox с доксорубицином не приводило к изменениям экспрессии молекулярних маркеров и не вызывало изменений распределения клеток по фазам клеточного цикла.

При культивировании MCF-7, MCF-7/Dox с липосомальной формой доксорубицина наблюдалось снижение пролиферативной активности и изменения экспрессии белков-регуляторов клеточного цикла, что приводило к блокировке клеточного цикла в G0/G1. Однако следует отметить, что влияние липосомальной формы доксорубицина способствовало снижению экспрессии металлотионеинов лишь в клетках чувствительной линии и не вызывало в них изменений экспрессии рецепторов стероидных гормонов.

Выводы. Свободная форма вызывает изменения молекулярного профиля и клеточного цикла только в клетках исходной линии MCF-7. В противоположность этому, липосомальная форма доксорубицина приводит к идентичным изменениям экспрессии белков-регуляторов клеточного цикла и к остановке клеток в фазе G₀/G₁ как в исходной, так и в резистентной линии. Полученные данные свидетельствуют о необходимости дальнейших исследований, направленных на изучение действия липосомальных форм противоопухолевых препаратов на молекулярно-биологические особенности злокачественных клеток.