Особенности накопления хлорорганических пестицидов в лекарственном растительном сырье Воронежской области

Автор: Дьякова Н.А.

Журнал: Ульяновский медико-биологический журнал @medbio-ulsu

Статья в выпуске: 1, 2024 года.

Бесплатный доступ

Целью настоящего исследования являлось изучение особенностей накопления наиболее опасных хлорорганических пестицидов в лекарственном растительном сырье, произрастающем в агроценозах Воронежской области.

Воронежская область, лекарственное растительное сырье, хлорорганические пестициды

Короткий адрес: https://sciup.org/14129930

IDR: 14129930 | DOI: 10.34014/2227-1848-2024-1-115-129

Текст научной статьи Особенности накопления хлорорганических пестицидов в лекарственном растительном сырье Воронежской области

Введение. Актуальной эколого-гигиенической проблемой нашей страны являются ускоряющиеся темпы роста разнообразия и количества применяемых пестицидов. По данным ВОЗ, к пестицидам относятся различные химические средства, предназначенные для борьбы с любыми вредными организмами: гербициды, инсектициды, фунгициды, зоо-циды и др. К пестицидам также относятся химические вещества, используемые в качестве регуляторов роста растений, применяемые для обработки растительной продукции перед заготовкой или после нее, увеличения сроков хранения, а также десиканты и дефолианты. В документах ВОЗ также фигурирует понятие «остаточные пестициды», к которым относят специфические вещества в продуктах питания и кормах, образующиеся в результате использования пестицидов (метаболиты, гидролизаты и другие продукты их превращений). Остаточные пестициды могут накапливаться в лекарственном растительном сырье (ЛРС) при проведении различных видов сельскохозяйственной обработки семян растений, их выращивании и хранении [1, 2].

Наиболее опасными пестицидами в настоящее время заслуженно признаны хлорорга-нические в силу их высокой токсичности, медленного метаболизма в живых организмах, способности к биоаккумуляции и миграции по биологическим цепям. К данной группе пестицидов относятся дихлордифенилтрихлорэтан

(ДДТ), гексахлорциклогексан (ГХЦГ), гексахлоран, алдрин. Все они являются предшественниками еще более токсичных полиаро-матических углеводородов – веществ диоксиновой группы. При оценке и прогнозировании опасности хлорорганических пестицидов определяющими факторами являются их стабильность во внешней среде, кумулятивные свойства и отдаленные последствия их применения. Кроме того, хлорорганические пестициды достаточно летучи, способны переноситься на большие расстояния по воздуху, потоками воды и живыми организмами. Например, ледниковый панцирь Антарктиды, расположенный за десятки тысяч километров от территорий использования ДДТ, накопил более 2000 т данного пестицида [3, 4].

ДДТ является инсектицидом, используемым против комаров, саранчи и вредителей бобовых культур, хлопка. Пик мирового применения ДДТ пришелся на 60-е гг. ХХ в. В настоящее время запрещен к применению во многих странах, так как эффективно кумулируется в жировой ткани животных и человека. На территории России практически использовался до 80-х гг. прошлого столетия. Однако и сегодня выбрасывается в атмосферу промышленными предприятиями и используется в ряде развивающихся стран. ВОЗ одобряется применение ДДТ для борьбы с малярийными комарами. Большие количества ДДТ могут сбрасываться в гидросферу и атмосферу (остатки прошлого использования и продукты распада). ДДТ и его метаболиты обладают летучими свойствами, поэтому могут обнаруживаться в высоких концентрациях вдали от известных источников использования. Водные организмы более чувствительны к действию ДДТ, чем наземные. Так, в концентрации 0,1 мкг/л ДДТ полностью угнетает рост зелёных водорослей. ДДТ является возможным человеческим канцерогеном. Его изомеры проявляют антиандрогенные и эстрогенные свойства. Есть данные о нейротоксическом, иммуносупрессорном действии ДДТ, а также о подавлении им фертильности. Допустимая доза для человека составляет 0,01 мг/кг массы тела в сутки. При этом поступление ДДТ в организм с пищей может превышать данную допустимую дозу, осо- бенно в развивающихся странах, где пестицид применяют в санитарных целях [5–7].

ГХЦГ используется для культивирования ряда овощей, ягод и фруктов, обработки семян, очень активно – в лесном хозяйстве. В России его применение запрещено с 90-х гг. ХХ в. Однако производные ГХЦГ часто встречаются в экологических пробах из-за прошлого использования в качестве инсектицида. В связи с высокой токсичностью масштабы применения ГХЦГ уменьшаются. Применение γ-изомера ГХЦГ (линдана) возможно при внесении в верхние слои почвы, протравливании семян, обработке древесины, без использования самолетов, не ближе 2-километровой зоны от водоемов, в быту в закрытых помещениях. α- и γ-изомеры ГХЦГ растворимы в воде, при попадании в организм человека хорошо выводятся почками и не обладают способностью к биоконцентрации. Линдан часто определяется в морской воде и почве, но в живых организмах его концентрации невысоки. Остатки ГХЦГ встречаются в пробах воды и воздуха повсеместно, при этом в северных широтах чаще и больше, чем в средних, где расположены основные источники загрязнения Частой примесью линдана является β-изо-мер ГХГЦ. Он малорастворим в воде, его накопление в живых организмах значительно выше. До 90 % изомеров ГХЦГ поступает в организм человека с пищей, другие механизмы их воздействия возможны при обработке мест проживания населения инсектицидами. ГХЦГ относится к токсикантам кожнорезорбтивного действия, вызывает гиперемию кожи с появлением пузырьков, раздражение конъюнктивы глаза. ГХЦГ является возможным канцерогеном, способен накапливаться в жировой ткани, оказывать гематотоксическое действие, поступать в молоко кормящих женщин. Концентрация β-изомера ГХГЦ в грудном молоке составляет 0,1–0,69 мг/кг, а линдана – не более 0,1 мг/кг. Допустимая доза для человека – 0,001 мг/кг массы тела в сутки [5, 6, 8].

Алдрин – хлорорганический чрезвычайно токсичный и стойкий контактный и кишечный инсектицид, гербицид, применяемый для борьбы с комарами и саранчой, протравки семян, борьбы с сорняками хлопчатника. Биохи- мически не разлагается, относится к одним из самых опасных пестицидов, широко применяемым в 70-е гг. прошлого века, в настоящее время запрещен во многих странах мира. Ал-дрин объединяет в себе группу соединений, включающую его производные. В СССР и РФ применение алдрина всегда было под запретом. Накапливается в почве, долго сохраняясь в ней и частично превращаясь в более токсичный диелдрин, из песчаных почв может испаряться. Аккумулируется в растениях, особенно в злаковых, легко мигрирует по трофическим цепям. Может легко проникать в подземные воды. Липофилен, легко проникает через кожу, кумулируется в жировой ткани, наиболее опасен при ингаляционном воздействии: ЛД100 составляет 12 мг/кг массы тела в сутки [7, 9].

Гептахлор – хлорорганический высокотоксичный инсектицид контактного действия, с 1953 г. используемый США в сельском хозяйстве для выращивания кукурузы, сахарного тростника, подсолнечника сорго, а также для протравки семян. Эффективен против жуков-вредителей и их личинок. С 2001 г. его производство и применение запрещено. Устойчив к биохимическому разложению. Накапливается и долго сохраняется в почве, превращаясь в эпоксид гептахлора, отличающийся более высокой токсичностью. Липофилен, легко всасывается кожей, в организме теплокровных превращается в эпоксидную форму, кумулируется в жировой ткани, наиболее опасен при ингаляционном воздействии: ЛД 50 составляет 20 мг/кг массы тела в сутки [7, 10].

С целью увеличения экспортного потенциала сельскохозяйственной отрасли количество вносимых в почву удобрений и ядохимикатов ежегодно возрастает в геометрической прогрессии. Так, по официальным данным, в 2015 г. применение только минеральных удобрений отмечалось на уровне 2 млн т в год, в 2020 г. – 4 млн т, а к 2025 г., по прогнозам, достигнет отметки в 8 млн т. В Воронежской области при общей площади пахотных земель 3,0 тыс. га использование химических средств защиты составляет более 1,5 тыс. т в год. По данным за прошедшее десятилетие, наивысший уровень химизации в сельском хозяйст- ве выявлен в Лискинском районе области (36,2 кг/га). Также высокий ее уровень (более 30 кг/га) отмечен в Верхнехавском, Ольховат-ском, Хохольском, Подгоренском, Россошанском, Репьевском, Панинском районах, преимущественно находящихся на северо-западе и западе области [11].

В Воронежской области имеется свыше 700 сельскохозяйственных растениеводческих объектов, использующих пестициды и агрохимикаты. Важной проблемой в обороте ядохимикатов является утилизация непригодных агропрепаратов. В области функционирует программа «Экология и природные ресурсы Воронежской области», в рамках которой проводится утилизация пестицидов, в т.ч. ликвидация несанкционированных свалок. Всего за последнее десятилетие на спецполи-гонах для захоронения утилизировано более 100 т бесхозных пестицидов. Несмотря на это, ежегодно в Воронежском регионе фиксируются новые случаи обнаружения несанкционированных свалок ядохимикатов [12, 13].

По данным ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии Воронежской области» на 2013 г., после исследования более 5800 проб объектов окружающей среды в регионе выявлялось превышение предельно допустимых концентраций пестицидов в 2,1 % исследуемых проб почв и 1,6 % проб атмосферного воздуха. В наибольшей степени неблагополучными по концентрации данной группы поллютантов признаны пробы воздуха и почв, отобранные в Лис-кинском районе. Превышение гигиенических нормативов отмечено для следующих пестицидов: ДДТ и его метаболиты, α-, β-, γ-изомеры ГХЦГ, банкол, децис, малатион. Наиболее часто выявлялось превышение допустимых норм содержания производных ГХЦГ [4, 12, 13].

Известно, что пестициды могут загрязнять как культивируемое, так и дикорастущее ЛРС. Исследования дикорастущего ЛРС Курской области, проведенные на основе изучения химического состава листьев крапивы двудомной, травы зверобоя продырявленного, листьев мать-и-мачехи, листьев подорожника большого, показали его загрязнение фосфорорганическими и хлорорганическими пестицидами. Так, содержание γ-ГХЦГ (линдана) до- стигало 0,61 мг/кг, что существенно превышает его предельно допустимую концентрацию [14].

Таким образом, в настоящее время из хло-рорганических пестицидов в почве чаще всего обнаруживают ГХЦГ и его изомеры, а также ДДТ и его метаболиты. Данная группа пестицидов является самой токсичной и устойчивой в окружающей среде. Хлорорганические пестициды способны эффективно накапливаться в живых организмах. Несмотря на запрет применения отдельных соединений данной группы, их остаточные количества ежегодно находят в различных объектах окружающей среды, в т.ч. и лекарственных растениях. Эколого-гигиенический контроль содержания остаточных пестицидов в ЛРС чрезвычайно важен с точки зрения безопасности пациентов. Наличие остаточных пестицидов может быть причиной развития побочных эффектов в результате приема препаратов, их содержащих [15, 16].

Анализ зарубежных фармакопей (Европейской, Британской, США, Японской, Белорусской, Украинской) показал, что выявление пестицидов в ЛPC основано на общем принципе: экстракция, очистка и определение. При этом требования большинства фармакопей сходны. Так, фармакопея США, а также Европейская, Британская, Белорусская фармакопеи предлагают одинаковую методику определения пестицидов, в соответствии с которой экстракцию проводят ацетоном, а для качественного и количественного определения используют метод газовой хроматографии. Требования отечественной ОФС.1.5.3.0011.15 «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» имеют аналогичные принципы [1, 5, 14, 15].

Цель исследования. Изучение особенностей накопления наиболее опасных хлорорга-нических пестицидов в лекарственном растительном сырье, произрастающем в агроценозах Воронежской области.

Материалы и методы. В качестве объектов исследования использовали фармакопейные виды ЛРС, широко распространенные в средней полосе России, являющиеся характерными представителями как естественных растительных сообществ, так и синантропной растительности: листья крапивы двудомной (Urtica dioica L.), листья подорожника большого (Plantago major L.), цветки пижмы обыкновенной (Tanacetum vulgare L.), цветки липы сердцевидной (Tilia cordata Mill.), траву пустырника пятилопастного (Leonurus quinque-lobatus Gilib.), траву полыни горькой (Artemi-sia absinthium L.), траву тысячелистника обыкновенного (Achillea millefolium L.), траву горца птичьего (Polygonum aviculare L.), корни лопуха обыкновенного (Arctium lappa L.), корни одуванчика лекарственного (Taraxacum officinale F.H. Wigg.) [17]. Также отбирали пробы верхних слоев почв (0–10 см от поверхности).

Содержание остаточных пестицидов, как правило, определяют в культивируемом лекарственном растительном сырье и получаемых из него лекарственных растительных препаратах. Поэтому для оценки экологического состояния верхних слоев почв и лекарственного растительного сырья Воронежской области в отношении загрязнения пестицидами были выбраны основные точки отбора образцов, лежащие в агроценозах области с высоким уровнем химизации в сельском хозяйстве. Для отбора образцов использовали агроценозы Лискинского, Ольховатского, Подгорен-ского, Петропавловского, Грибановского, Хо-хольского, Новохоперского, Репьевского, Во-робьевского, Панинского, Эртильского, Россошанского районов [13].

Отбор проб ЛРС для определения остаточных пестицидов проводили в соответствии с требованиями ОФС.1.1.0005.15 «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» в условиях, исключающих дополнительное загрязнение сырья. Пробы верхних слоев почвы на исследуемой пробной площадке отбирали в соответствии с ГОСТ Р 58595-2019 «Почвы. Отбор проб» и ГОСТ 17.4.4.02 «Охрана природы. Почвы. Методы отбора и подготовки проб для химического, бактериологического, гельминтологического анализа». Пробоподго-товка включала в себя измельчение образца с целью его гомогенизации и последующего взятия не менее двух параллельных навесок. Метод определения хлорорганических пестицидов в пробах почвы и ЛРС предусматривал извлечение определяемых соединений из воды н-гексаном, очистку полученного экстракта концентрированной серной кислотой, нейтрализацию раствором натрия гидрокарбоната, упаривание извлечения, растворение сухого остатка в ацетоне с последующим количественным определением поллютантов в ацетоновом растворе. Для повышения надежности идентификации при определении с помощью газожидкостной хроматографии использовали анализ на двух неподвижных фазах различной полярности. Содержание пестицидов рассчитывали методом внешнего стандарта, в качестве которого использовали растворы стандартных веществ определяемых соединений. Исследования проводили на газовом хроматографе «Цвет 500М» с микрошприцевым доза- тором, стеклянными капиллярными разделительными колонками и пламенно-ионизационным детектированием [18, 19, 20].

Результаты и обсуждение.

ОФС.1.5.3.0011.15 «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» регламентирует пределы допустимого содержания ГХЦГ и его изомеров (в сумме) и ДДТ и его метаболитов (в сумме) не более 0,1 мг/кг для обоих поллютантов при отсутствии алдрина и гептахлора. Предельно допустимые концентрации ГХЦГ и ДДТ в почве также составляют 0,1 мг/кг, гептахлора – 0,05 мг/кг, содержание в почве алдрина в настоящее время не нормируется [18, 19].

Таблица 1

Table 1

Содержание хлорорганических пестицидов в верхних слоях почв и ЛРС агроценозов Воронежской области, мг/кг

Content of organochlorine pesticides in the upper soil layers and medicinal plant raw materials of agrocenoses of the Voronezh region, mg/kg

Я я

о я

H де

я ?

В А

Я о

’§

я. 8 й и

* ©

ч £ ^я ©

& 8

й и

1- ©

^в я

В f

Я -Я

а ©

я ^й

^С ©

Н О

я Л я а я -Я

9 а

В я я я

ч и

* ©

Я Я

9 Я

S «

я .я

Я О

5 9

8 £ и Я

“1

я ¥

я 5 я Л

Й 75

Б де

И Q

& ^

я ^

<72

Ю о

<0,001

« Q «а

<0,007

Я © © «

Я 9 = я UK

H де

Я "О

П См

Я я

'St

я. 8 о о й и

ч £

& 8

й и

§1

^в '.я

§5

5 £

£ я

я 1

н и

Е Й

я я а £

^с ©

1'5

S я

1 Я и £ я Г

яЬ

Ч 43

X о

К а о “

1н И

Р.Я g £

о о

* И

<0,001

н н « Q «О

<0,007

Ч 43

X о

К а о “

1н И

³S у, &Я g и й

м .23

< <

* И

<0,001

н н « Q «О

<0,007

П 43

X о

К а о “

1н И

CM © © «

Я 9 = я UK © « H де

Я "О

П См

Я я

^ се

§ §

я. 8 о о й и

я £

& 8

й и

§1

^в '.я

§5

5 -я

5 £

£ я о

я 1 н и

§ 5

3 ев

св св н о

1'5 ^в я я ©

§ ©

Св 9 СМ Я * Я

я © 1=5 U

s «

яЬ

СМ

св Я

о .2

О 5

Й о

<0,001

н н « Q «о

<0,007

Я 43

X О

К я о “ я И

и . й

о ®

«2

о Р

< <

<0,001

н н « Q «а

<0,007

^& Й

Я 43

X о d

К я

я И

Я a

Я 9 = я UK © « H де

3 "О

П См

о 2

Я я

я. 8 о о й и

ч £

ri Я © ri

& в й и

5©

§1

^в '.я

ri н ^

§5

5 £

£ я о

я 1 и и

я я

& © 3 ri

^с © ri

д © $

|«

я я

§ ©

ri 9 а я * я

S я

1 Я и £

яЬ

§ ©

Д ri я 2

Б де

д о

< <

<0,001

н н « Q «о

<0,007

Д 43

X о ri ri

К а о “

1н И

ri ^&

Д x >

К о

Д о д о ч

< <

<0,001

н н « Q «а

<0,007

^й ri

Д 43 X о ri ri

к а

1н И

CM © © «

Я 9 = я UK © « H де

Я "О

П См

о 2

Я я

'St

я. 8 о о й и

см

& 8

й и

§1

^в '.я

н ^

§5

5 2

Й я

я 1

и и

§ 5

я я

^С ©

1'5

я я

4 и

S я

1 Я и £

яЬ

CM © 2

й *

Сц о

<0,001

н н « Q «о

<0,007

Ч 43

X О

К а о “

1н И

о ±3

s 2

О 1

И О

< <

<0,001

н н « Q «а

<0,007

ч 43 X о

к а о “

1н И

Я a © © « Я 9 = я UK де	© "О	© © Я я 'St я. 8 о о й и	© © * © ч £ я а 8 й и	ЭЯ © ^в '.я н ^	© © §5 hl	© © © © я я 5 £ а £ я о я 1 и и	© © н © © © я в а £ ^с ©	© © 1'5 © a ^в я	© Я © 3 2 * я я ©	© Я © 4 s « яЬ	© Я я 2	9
< <	^	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001
	н н « Q «о	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007
	^	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
	Ч 43 X о d Й К а о “ 1н И	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
S - х £ и &> К И ^s о а^	^	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001	<0,001
	н н « Q «а	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007	<0,007
	к ^	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
	Ч 43 X о d d к а о “ 1н И	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-

CM © © «

Я "О

П См

о 2

Я я

'St

я. 8 о о й и

ч £

я я ©

& 8

й и

§1

^в '.я

н ^

§5

5 £

й £ я

я 1 а о и и

§ 5

я я

^с ©

1'5

я я

S Я

1 Я

яЬ

CM © 2

я 2

О Л

5.2

<0,001

н н « Q «О

<0,007

Ч 43

X о

К а о “

1н И

О я

о о

8 *

О "и я о

О о

< <

<0,001

н н « Q «а

<0,007

Ч 43

X о d Й

1н И

Я a

s s h

ft c

U ft

Я я

я. 8 й и

* ©

ч £

° §

& 8

й и

^в '.я

н ^

§5

5 £

£ я о

я 1 н и

* ©

я я

^С ©

н о

« > 1'5 я я

я ©

§ ©

я ©

ч и

S Я

1 Я

яЬ

□ (Л

ГХЦГ HCH

0,1

ДДТ DDT

0,1

Алдрин Aldrin

Не допускается Harmful

Гептахлор Heptachlor

Не допускается Harmful

0,05

Исследования выполнены при поддержке Российского научного фонда (проект № 24-27-00272).

Список литературы Особенности накопления хлорорганических пестицидов в лекарственном растительном сырье Воронежской области

Великанова Н.А., Гапонов С.П., Сливкин А.И. Экооценка лекарственного растительного сырья в урбоусловиях г. Воронежа. LAMBERT Academic Publishing; 2013.
Дьякова Н.А., Самылина И.А., Сливкин А.И., Гапонов С.П., Кукуева Л.Л., Мындра А.А. Анализ загрязненности лекарственного растительного сырья Воронежской области наиболее опасными пестицидами. Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2015; 3: 112-115.
Гравель И.В., Иванова Е.А. Требования зарубежных фармакопей к качеству лекарственного растительного сырья по содержанию пестицидов. Фармация. 2010; 7: 50-53.
Дьякова Н.А. Методические рекомендации по заготовке лекарственного растительного сырья в Воронежской области. Воронеж: Издательский Дом ВГУ; 2022. 160.
Дьякова Н.А. Экологическая оценка сырьевых ресурсов лекарственных растений Воронежской области. Воронеж: Цифровая полиграфия; 2022. 264.
Мельников Н.Н. Пестициды. Химия, технология и применение. Москва: Химия; 1987. 712.
Agency for Toxic Substances and Disease Registry. URL: https://www.atsdr.cdc.gov (дата обращения: 06.10.2021).
Тулакин А.В., МехантьеваЛ.Е., Куролап С.А. Гигиена окружающей и производственной среды предприятий минеральных удобрений. Москва: Истоки; 2007. 220.
Чубирко М.И., Мамчик Н.П., Механтьев Л.Е. Гигиенические проблемы применения пестицидов. Гигиена: прошлое, настоящее, будущее. 2001; 1: 239-240.
Лазарев Н.В., Левина Э.Н. Вредные вещества в промышленности. Справочник для химиков, инженеров и врачей: в 3 т. Т. 1. Органические вещества. Ленинград: Химия; 1976. 592.
Управление Роспотребнадзора по Воронежской области. URL: http://36.rospotrebnadzor.ru/key-areas/sanitary/14645 (дата обращения: 26.04.2021).
Заряева Е.В. Анализ данных регионального мониторинга содержания пестицидов в объектах окружающей среды Воронежской области. Вестник новых медицинских технологий. 2011; 2: 476-478.
Куролап М.С., Мамчик Н.П., Клепиков О.В. Медико-экологический атлас Воронежской области. Воронеж: Издательство им. Е.А. Болховитинова; 2010. 167.
Терешкина О.И., Гуськова Т.А., Рудакова И.П., Самылина И.А. Нормирование остаточных пестицидов в растительном сырье и лекарственных растительных препаратах. Фармация. 2011; 2: 3-5.
Терешкина О.И. Нормирование остаточных пестицидов в растительном сырье зарубежными фармакопеями. Фармация. 2012; 1: 50-54.
Делова О.В., Денисенко В.И. Гигиеническая оценка факторов окружающей среды и риска для здоровья населения. Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2010; 4: 810-813.
Куркин В.А. Фармакогнозия. Самара: Офорт; 2004. 1180.
СанПиН 1.2.3685-21. Гигиенические нормативы и требования к обеспечению безопасности и (или) безвредности для человека факторов среды обитания. URL: https://docs.cntd.ru/document/ 573500115 (дата обращения: 15.04.2021).
Государственная фармакопея Российской Федерации. Изд-е XIV. Т. 2. Москва: ФЭМБ; 2018. 1423.
Клисенко М.А. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Москва: Колос; 1983. 123.

Еще

Статья научная