Особенности развития мирта мелколистного при микроклональном размножении

В настоящее время увеличивается спрос на здоровый, безвирусный посадочный материал для озеленения зимних садов, декорирования служебных помещений и т.д.

Метод культуры клеток, тканей и органов растений позволяет получить большое количество здорового растительного материала за короткие сроки, не занимая больших площадей. Успешное введение в культуру in vitro того или иного вида растений во многом зависит от правильного выбора экспланта [1, 2] .

Желательно, чтобы исходные растения не были повреждены грибковыми, бактериальными и вирусными болезнями и находились в состоянии интенсивного роста. Растения в состоянии покоя непригодны для этой цели. Для обеспечения максимальной генетической стабильности кло- нируемого материала и во избежание появления аномальных растений, в качестве исходного экспланта желательно использовать молодые, слабодифференцированные ткани. Для этой цели больше всего подходят апексы стеблей, боковые (пазушные) почки, зародыши или меристем-ные ткани [4]. Можно использовать молодые листья, черенки, соцветия и чешуйки луковиц, однако в этом случае необходим цитологический контроль [3].

В качестве объекта введения в культуру in vitro взяли экспланты растений мирта мелколистного.

Мирт Мелколистный – одно из самых полезных домашних растений, обладающее уникальными свойствами, принадлежит семейству Миртовые. Мирт мелколистный (рис. 1.) – разновидность мирта обыкновенного ( Myrtus communis L . ).

Рис. 1. Внешний вид Мирта мелколиственного

У древних греков Мирт считался сим-   Уже тогда было отмечено благотворное волом молодости, красоты и целомудрия.    действие эфирных масел. Водой, настоян- ной на мирте, умывались знатные горожане. Винный настой на плодах мирта использовали как эликсир здоровья и бодрости. Деревья или кустарники до 3-4 м высотой; побеги 4-гранные, мелковолосистые, округлые, голые. Листья супротивные, иногда собранные по 3, яйцевидные, ланцетные, 2-4 (до 5) см длиной и 1-2 см шириной, заостренные, кожистые, цельно-крайные, гладкие, голые, глянцевитые. Если рассмотреть листик мирта на просвет, то можно увидеть мелкие точечки, наполненные эфирным маслом, благодаря которому растение издает приятный аромат. Наиболее ароматны белые цветки растения. Они некрупные (до 2 см в диаметре), пятилепестковые, расположены по одному на длинных цветоножках. Многочисленные золотистые тычинки придают им особое своеобразие. В природе мирт достигает высоты 3-5 м. В культуре растение невысокое (около 60 см), редко достигает 1 м. В домашнем цветоводстве может выращиваться как пышный кустик, штамбовое деревце или сформирован в стиле бонсай. Устойчивость к болезням и вредителям средняя [5].

Для размножения в культуре ткани в качестве экспланта использовали боковые почки из средней части 1-летнего побега.

Побеги промывали мыльным раствором на магнитной мешалке в течение 15 минут, ополаскивая проточной водой. Далее проводили стерилизацию растительных эксплантов в растворе хлорамина в течение 7 минут. Трижды промывали стерильной дистиллированной водой. Срезы обновляли и части побегов переносили на агаризо-ванную питательную среду Мурасиге и Скуга в пробирки. В некоторых случаях экспланты переносят на свежую питательную среду, так как в среду выделяются полифенолы, затрудняя пробуждение зародышей. Культивирование проходило при температуре 18-25оС. Через 2,5 недели появлялись первые микропобеги, которые пересадили на новую гормональную питательную среду MS с добавлением гормонов цитокининового ряда. При использовании данного гормона наблюдалось увеличение микропобегов до 23 шт от одного исходного экспланта. В течение эксперимента обнаружили, что количество микропобегов Myrtus COMMUNIS при добавлении в состав питательной среды гормонов роста в концентрации 3 мг/л 6-БАП значительно увеличивается, в отличие меньшего содержания гормонов в составе питательной среды (рис. 2).

Рис. 2. Образование новых микроклонов мирта обыкновенного

Для укоренения побеги переносили на среду MS с добавлением 1 мг/л ИМК. Об- разование корней наблюдалось уже на 10 день после пассажа (рис. 3).

Рис. 3. Образование корней у мирта мелколистного

Также в качестве регуляторов роста в ходе эксперимента использовали кинетин. Как показал опыт, на образование новых микропобегов он воздействует менее эффективно, чем гормон 6-БАП, так как количество вновь образовавшихся микроклонов незначительное (43%).

В результате проведенных исследований было выявлено, что размножение мирта мелколистного при наличии 6-БАП в составе MS в больших концентрациях увеличивает образование дочерних побегов, в отличии от гормона кинетит в таких же дозах.