Остаточное количество нитритов в органах и тканях белых крыс

В настоящее время ассортимент азотных удобрений в нашей стране достаточно широк и разнообразен. К важнейшим, разрешенным для применения в сельском хозяйстве, относятся нитратные, аммонийные, аммиачно-нитратные, амидные удобрения, комбинированные или полные удобрения, включающие азот, фосфор, калий.

В условиях высокого содержания нитратов и нитритов не исключена возможность образования и накопления в почве и растениях нитрозаминов, многие из которых обладают не только высокой токсичностью, но и выраженной мутагенной и канцерогенной активностью [В.Н. Жуленко, 2004].

Хроническое отравление животных нитратами и нитритами приводит к нарушению белкового и углеводного обменов, понижению воспроизводительной функции, снижению резистентности организма молодняка и возникновению дистрофических явлений во внутренних органах [Н.Н. Жестков, М.Я. Тремасов, 2004].

При остром и хроническом отравлении нитратами и нитритами животных иногда вынужденно убивают, поэтому возникает вопрос о наличии остаточных количеств этих токсических соединений в органах и тканях.

Целью нашей работы является изучение остаточных количеств и влияния нитритов на гистологические показатели органов и тканей белых крыс при хроническом отравлении.

Материалы и методы. Исследования проводили на белых крысах разного пола массой тела 95-100 г. При определении хронической токсичности, по принципу аналогов сформировано 4 группы белых крыс, по 12 в каждой. Первая группа служила контролем и получала обычную питьевую воду. Опытным животным задавали внутрь натрия нитрит в виде 0,2-1%-ных растворов ежедневно при помощи зонда в дозах: второй группе – 62,8 (1/5 ЛД 50 ), третьей – 6,28 (1/50 ЛД 50 ), четвертой – 3,14 (1/100 ЛД 50 ) мг/кг. Препарат вводили крысам в течение 60 суток, убой совершали на 30 и 60 сутки. В ходе эксперимента отмечали поведенческие реакции, оценивали общее состояние, определяли остаточные количества нитрит иона в органах и тканях по ГОСТу 29299-92. Гистопрепараты окрашивали гематоксилином и эозином, увеличение х 100.

Результаты исследований. При вскрытии белых крыс на 30 сутки обнаруживали плохо свернувшуюся и нередко гемолизированную темного цвета кровь. В просвете бронхов наблюдается скопление пенистой жидкости с примесью крови, легкие отечны, участками гиперемированы. Сердце увеличено, под эпикардом и эндокардом видны множест- венные точечные кровоизлияния. Наблюдаются дистрофические изменения в печени и почках, мышцы на вскрытии светло-красной окраски.

Установили, что в органах и тканях павших или вынужденно убитых животных при нитритном токсикозе обнаруживается неравномерность распределения этого токсиканта. Результаты эксперимента представлены в таблице 1.

Остаточные количества натрия нитрита (мг/кг)

Таблица 1

в органах и тканях белых крыс при хроническом отравлении (n=12)

Орган и ткань	Контроль	Доза натрия нитрита, мг/кг
		62,8	6,28	3,14
30 сутки
Почки	не обнаружен	1,17***±0,008	0,194***±0,0016	0,027***±0,0016
Печень	не обнаружен	0,61***±0,004	0,194***±0,0016	0,013***±0,0004
Селезенка	не обнаружен	0,58***±0,005	0,165***±0,0012	0,013***±0,0008
Легкие	не обнаружен	0,71***±0,01	0,184***±0,002	0,012***±0,004
Сердце	не обнаружен	0,55***±0,003	0,157***±0,0012	0,012***±0,0012
Мышцы	не обнаружен	0,510***±0,008	0,145***±0,005	0,011***±0,0016
60 сутки
Почки	не обнаружен	-	0,0116***±0,0008	не обнаружен
Печень	не обнаружен	-	0,0100***±0,0004	не обнаружен
Селезенка	не обнаружен	-	не обнаружен	не обнаружен
Легкие	не обнаружен	-	0,0100***±0,0004	не обнаружен
Сердце	не обнаружен	-	не обнаружен	не обнаружен
Мышцы	не обнаружен	-	не Обнаружен	не обнаружен

Примечание: ***-Р<0,001; На 60 сутки при дозе 62,8 мг/кг натрия нитрита все крысы пали.

Из результатов, приведенных в таблице, видно, что при введении крысам в течение 30 суток натрия нитрита в дозе 62,8 мг/кг наибольшая концентрация яда содержится в почках - 1,17 мг/кг, затем в легких - 0,71 мг/кг и в печени - 0,61 мг/кг массы тела, в селезенке, в сердце и в мышцах - 0,58 мг/кг; 0,55 мг/кг и 0,51 мг/кг соответственно.

При введении натрия нитрита животным в дозе 6,28 мг/кг, содержание токсиканта на 30 сутки составило в почках и печени 0,194 мг/кг, в других органах в эти же сроки было выявлено убывание концентрации нитрита, и составило: в легких - 0,184 мг/кг; в селезенке - 0,165 мг/кг; в сердце - 0,157 мг/кг, в мышцах - 0,145 мг/кг.

При введении животным натрия нитрита в дозе 3,14 мг/кг в течение 30 суток максимальная его концентрация была обнаружена в почках (0,027 мг/кг). В печени и селезенке было выявлено одинаковое количество нитрита (по 0,013 мг/кг), меньше токсиканта содержалось в легких и сердечных мышцах по 0,012 мг/кг, в мышцах 0,0016 мг/кг.

У контрольной группы крыс в органах и тканях следовых количеств натрия нитрита обнаружено не было.

При введении дозы 62,8 мг/кг крысы второй группы до 60 суток не доживали. У животных, получавших натрия нитрит в дозе 6,28 мг/кг, содержание его в почках и печени составляло 0,0116 и 0,01 мг/кг, в остальных органах следов нитрит иона обнаружено не было.

Из результатов приведенных исследований видно, что в органах и тканях крыс, получавших в течение 60 суток натрия нитрит, обнаруживался он в следовых количествах.

Внутрижелудочное введение натрий нитрита белым крысам в дозе 62,8 мг/кг вызывает выраженные изменения гистоструктуры внутренних органов, которые представлены в виде рисунков (рис. 1-5).

Рис. 1. Изменения гистоструктуры печени

В печени наблюдается белковая дистрофия, кариопикноз, кариорексис, очаговый некробиоз гепатоцитов, лимфоцитарная инфильтрация вокруг сосудов, многочисленные микрофаги в синусоидах.

Рис. 2. Изменения гистоструктуры легких

В легких утолщение межальвеолярных перегородок, инфильтрация лимфоцитами, отек, очаговая эмфизема.

Рис. 4. Изменения гистоструктуры сердца

Сердце, сократительные нарушения, фрагментация кардиомиоцитов, исчезновение поперечной исчерченности.

Рис. 5. Изменения гистоструктуры селезенки

Полнокровие и кровоизлияния в красной пульпе, фолликулы многочисленные, мелкие, в центре содержат разрушающиеся лимфоциты.

Выводы

Следовательно, хроническое поступление натрия нитрита в организм белых крыс приводит не только к изменениям клинических, гематологических, биохимических показателей крови, но и сопровождается изменением гистоструктуры тканей внутренних органов.