Острая гипоксия самок крыс в периоды прогестации и органогенеза

Изменения спонтанной сократительной активности лимфатических сосудов (САЛС) и их реактивности на норадреналин являются одним из важнейших элементов общего адаптационного процесса организма. В ряде исследований [1, 2] была показана прямая зависимость между развитием стресса различной этиологии (общая вибрация, гипертермия, иммобилизация) и изменением моторики лим-фангионов.

Одним из мощных стрессорных воздействий, вызывающих глубокие патологические сдвиги в деятельности всех систем организма, является острая гипоксия. Особый интерес представляют последствия антенатальной гипоксии, приводящей к развитию патологических состояний в постнатальном периоде.

Целью настоящей работы явилось исследование влияния острой гипобарической гипоксии (ОГГ), осуществленной на разных сроках беременности, в частности, на стадии прогестации (4-5-e дни) и органогенеза (10-11-e дни) самок крыс по показателям индивидуальной устойчивости к гипоксии и по реакции ЛС на действие норадреналина (НА). Также изучали отдаленные последствия ОГГ, развивающиеся в потомстве от этих самок, достигшем 60-дневного возраста.

Моделирование ОГГ осуществляли в барокамере при разряжении атмосферы в 145 мм рт.ст., что соответствует высоте 11 500 м над уровнем моря. Подъем «на высоту» осуществляли за 1 минуту.

С целью оценки резистентности к ОГГ во время моделирования гипоксии у самок крыс регистрировали: время потери позы (с); время «жизни на высоте» (мин) – время от момента окончания «подъема» до остановки дыхания или первого агонального вдоха; время реституции (с) – время от прекращения дыхания до восстановления активной позы.

Сократительную активность лимфатических сосудов брыжейки анализировали как у самок, так и у потомства самок крыс, подвергнутых антенатальной гипоксии; контролем служило потомство, полученное от интактных самок. Эксперименты проводили раздельно на самках и самцах, достигших 60 дневного возраста.

Для исследования действия норадреналина на сократительную активность лимфатических сосудов был использован модифицированный метод прижизненной микроскопии сосудов брыжейки [4]. После лапаротомии животное помещалось на термостатированном (37оС) столике, а извлеченная петля кишечника вместе с брыжейкой располагалась на столике-световоде микроскопа. Брыжейка поддерживалась влажной и теплой при помощи постоянной суперфузии физиологического раствора. На поверхность выбранного участка брыжейки опускали объектив 30-кратной водной иммерсии так, что образовывалась влажная камера площадью 1,5 см2. В пределах этой «камеры» выбирался лимфатический сосуд диаметром от 60 до 150 мкм, не имеющий исходной моторной активности. Изображение выводилось на монитор промышленной телевизионной установки «Матрица» для визуального контроля и записывалось на видеомагнитофон для последующего анализа.

В установке были использованы микроскоп МБИ-11, выпрямитель ВСР-2, фотоумножитель ФЭУ35, фотометрические насадки ФМЭЛ-1Ф, самописец И-338-1П, телемонитор и видеомагнитофон.

Норадреналин (НА, фирмы Sigma) в концентрации 10-6 моль/л апплицировался на лимфатические сосуды брыжейки в объеме 0,2 мл, контролем служила аппликация физиологического раствора. Производилась регистрация частоты фазных сокращений (сокращений/мин), амплитуды (процент от исходной величины просвета несокращенного сосуда) и изменения базового тонуса (процент от исходной величины просвета несокращенного сосуда).

По резистентности к ОГГ все беременные самки разделились условно на три группы: низко (НУ), средне (СУ) и высокоустойчивые (ВУ). В 1-й, наиболее многочисленной (56,41%) группе «время жизни на высоте» составило, в среднем, 2,33 мин, во 2-й группе – от 7 до 10 мин (27,35%) и в 3-й группе – более 10 мин. (16,24%).

Оценка изменений частоты и длительности сокращений ЛС при действии НА проводилась раздельно в группах небеременных, беременных, не подвергавшихся ОГГ, и беременных, подвергав- шихся ОГГ. Во всех группах самок аппликация НА на ЛС брыжейки приводила к увеличению частоты сокращений ЛС с первой же минуты. Вместе с тем, в группах самок, подвергавшихся ОГГ, достоверно увеличивалась не только частота сокращений ЛС по сравнению с контрольными группами, но и вдвое увеличивалась продолжительность активации ЛС в ответ на аппликацию НА независимо от срока беременности. При разделении самок по коэффициенту индивидуальной устойчивости к гипоксии оказалось, что в группе высокоустойчивых к ОГГ самок положительный хронотропный эффект был достоверно (p<0,05) выше, достигая 150-170%, по сравнению с остальными группами. Максимальная частота сокращений ЛС в группе самок с низким уровнем гипоксической резистентности не имела достоверных отличий от таковой в контрольных группах. Латентный период (время до начала сокращения ЛС после аппликации НА), в среднем, составлял 10-15 с во всех группах.

В связи с тем, что в исследованиях Масловой [3] было выявлено, что однократное интраназальное введение пептидной констелляции (семакса и бета-казоморфина-7, в дозах 0,001-0,1 мг/кг) самкам крыс за 15 минут до гипоксии оказывает коррегирующее действие как на течение беременности, так и на постнатальное развитие потомства, причем эффекты констелляции практически всегда были обусловлены собственными модулирующими влияниями, а не суммацией эффектов отдельных компонентов, нами были исследованы собственные влияния семакса и бета-казоморфина-7, а также их констелляции в указанных дозах на сократительную активность ЛС у беременных самок до и после гипоксии. Оба пептида и их констелляция оказывали активирующее влияние на САЛС, вовлекая спонтанно неактивные сосуды в сократительный акт. Причем эффекты пептидов на САЛС в указанных дозах не имели достоверных отличий у животных, подвергавшихся ОГГ от контрольных, хотя имелась некоторая тенденция снижения частоты сокращений лимфатических сосудов после гипоксии.

Таким образом, можно предположить, что гипоксия как, и любое другое стрессорное воздействие, сопровождающееся активацией симпато-адреналовой системы, может вызвать значительные нарушения адаптационных процессов у беременных самок, особенно с высоким уровнем гипоксической резистентности, что оказывает негативное влияние на потомство. Число неблагоприятного исхода беременности у высокоустойчивых к гипоксии крыс оказалось значительно выше по сравнению не только с контролем, но и с группой низкоустойчивых (таблица 1).

Таблица 1

Процент самок, имевших неблагоприятный исход беременности (неблагоприятный исход: не родили; умерли не разродившись; все потомство умерло в первые дни после родов)

Оценка изменений частоты и длительности сокращений лимфатических сосудов при действии норадреналина проводилась раздельно в группах мужского и женского потомства, достигшего 60дневного возраста и полученного от самок с низким уровнем резистентности к ОГГ, в связи с очевидным преобладанием данной группы беременных самок. Аналогичные измерения проводили в контрольных группах мужского и женского потомства такого же возраста и полученного от самок, не подвергавшихся ОГГ.

В группе самцов реакция лимфатических сосудов на действие норадреналина выражалась в значительном увеличении частоты сокращений лимфатических сосудов, начиная с первой же минуты после аппликации норадреналина. Кроме того, отмечалось достоверное двух-трехкратное увеличение длительности этого эффекта. Изменения амплитуды сокращений сосудов не имели достоверных отличий в группах контрольных и опытных животных. Латентный период ответа, в среднем, составлял 10-15 с в обеих группах.

В группе самок реактивность лимфатических сосудов на норадреналин достоверно не отличалась от таковой контрольной группы по следующим параметрам: частота и амплитуда сокращений и латентный период. Однако отмечалось увеличение длительности времени реакции на норадреналин в 1,5 раза.

Таким образом, на основании этих данных и полученных ранее данных (резкое увеличение летальности, отставание в физическом развитии, рост тревожности, снижение способности к обучению,

С.Е. Санжиева, Н.В. Мантатова. Изменения морфологического и биохимического статуса крови серебристо-черных лисиц в условиях доместикации нарушение вегетативного баланса по данным ЭКГ) можно заключить, что острая гипобарическая гипоксия нарушает процесс нормального развития потомства.

В связи с тем, что интраназальное введение пептидной констелляции за 15 минут до начала острой гипоксии практически всегда устраняло негативные последствия гипоксии в постгипоксическом периоде у беременных самок крыс и в потомстве, мы исследовали влияние интраназального введения этих пептидов на реактивность ЛС на НА потомства. Профилактическое однократное интраназальное введение семакса и бета-казоморфина-7 беременным самкам как в период прогестации, так и в период органогенеза за 15 минут до моделирования ОГГ изменяло параметры САЛС потомства.

На основании полученных нами данных мы предполагаем, что в основе защитного действия пептидов и их констелляций лежит их способность положительно влиять на нарушенный гомеостаз организма за счет корригирующего влияния на процесс каскадных реакций, патологически измененный на стадии раннего эмбриогенеза под влиянием острого пренатального гипоксического воздействия.