Патология печени у крыс при свинцовой интоксикации и ее коррекция природными детоксикантами

Расширяющееся с каждым годом внедрение химических соединений в различные отрасли промышленности, науки и быта людей создает условия для развития патологических процессов в организме при воздействии на него потенциально токсичных химических веществ (ПТХВ) – соединения тяжелых металлов, ведущее место среди которых занимает свинец. Клиническая картина острого и хронического свинцового поражения характеризуется наличием ряда синдромов. Среди которых ведущее место занимают патологические изменения печени, которая первой при- нимает на себя «токсический удар». От состояния печени будет зависеть скорость и выраженность системных изменений организма, в первую очередь липидного обмена.

Вместе с тем лечение с помощью лекарственных препаратов имеет целый ряд противопоказаний и дает комплекс побочных реакций, ограничивающих их применение [1,2]. Поэтому гиполипидимическая немедикаментозная терапия рассматривается в настоящее время в качестве одной из основных задач здравоохранения [3].

Целью работы является выявление эффективности коррекции липидного уровня при свинцовой интоксикации путем включения в рацион крыс перепелиных яиц, отличающихся уникальностью биохимического состава и широким спектром лечебного действия.

Материалы и методы исследований. Исследование проводилось на белых беспородных крысах, самцах, массой 180 — 200 г. Животные делились на 3 группы: 1-ая – контрольная, рацион животных состоял из зерна и воды; 2-ая – помимо обычного кормления зерном крысы получали раствор ацетата свинца (100 мг/кг) в течение 14 и 21 суток; 3-я – после соответственного срока кормления зерном и свинцом крысы получали по одному перепелиному яйцу каждые сутки, также в течение 14 и 21 суток. Животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» [6]. Материалом для исследования служила кровь и печень. В сыворотке крови биохимическими методами определяли содержание общих липидов, холестерина, ТГ, ЛПНП, ЛНОНП, ЛПВП по общепринятого комплекса исследований. Для проведения гистологического исследования фрагменты печени крыс фиксировали в 10% растворе формалина, приготовленного на фосфатном буфере (рН 7,2 – 7,4), обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации и заливали в парафин. На санном микротоме готовили срезы толщиной 5-7 мкм. Окраску осуществляли гематоксилином и эозином. Микропрепараты просматривали в све- товой микроскоп (Topic-T), использовали малое (10х10х1,25) и большое увеличение (10х40х1,25). Фотосъемку препаратов производили цифровой камерой САМV200 (фирмы Vision Австрия).

Результаты исследования и их обсуждение. Как показали наши исследования, в 1-ой группе подопытных животных, находящихся на стандартном рационе вивария, концентрация ОХ равнялась 1,63±0,09 ммоль/л, ХС ЛПВП составила 1,09±0,07 ммоль/л, ТГ – 0,72±0,06 ммоль/л, содержание ХС ЛПОНП достигло 0,32±0,03 ммоль/л, а ХС ЛПНП – 0,22±0,08 ммоль/л. Индекс атеро-генности составил 0,49±0,08. Эти значения были использованы в качестве контроля, который обладает определенной вариабельностью в пределах различных популяций.

После введения в организм крысы (вторая группа) ацетата свинца в течение 14-и суток концентрация общего холестерина в крови возросла на 22 %, содержание атерогенных ЛПОНП и ЛПНП увеличилось на 21% и в 3,59 раза соответственно по отношению к контрольной группе. Концентрация антиатерогенных ЛПВП в плазме крови при свинцовой интоксикации понизилась на 34%, а количество ТГ повысилось на 20%. Индекс ате-рогенности составил 1,45±0,07, т.е. содержание атерогенных частиц по отношению к антиатеро-генным увеличилось почти в 3 раза.

У крыс получавших ацетат свинца в течение 21 суток (третья группа) показатель ОХ в плазме крови увеличился на 44%, содержание атероген- ных ЛПОНП и ЛПНП повысилось на 28% и в 5,54 раза соответственно. Концентрация антиатеро-генных ЛПВП в плазме крови при хронической свинцовой интоксикации понизилась на 49%, а количество ТГ повысилось на 26% по отношению к контрольной группе. Индекс атерогенности составил 2,23±0,05, т.е. содержания атерогенных частиц по отношению к антиатерогенным увеличилось в 4,55 раза.

Эти показатели указывают на достоверное нарушение липидного обмена при хронической свинцовой интоксикации, необходимое для последующей оценки холестеринснижающего эффекта перепелиных яиц.

У крыс после свинцовой интоксикации получавшие перепелиные яйца в течение 14 и 21 суток частично нормализуются различные показатели липидного обмена. Так концентрация ХС ЛПОНП и ЛПНП в плазме крови крыс через 14 суток снизилась на 5% и 8% по сравнению с показателями в сыворотке крови крыс, подвергшихся свинцовой интоксикации в течение такого же периода времени. Содержание общего холестерина и триглицеридов уменьшилось незначительно. Концентрация ХС ЛПВП повысилась в 1,18 раза. Индекс атерогенности составил 1,14, что ниже в 1,27 раза относительно аналогичного показателя 2-ой группы.

Концентрация ХС ЛПОНП и ЛПНП в крови крыс, получавших перепелиные яйца 21 сутки, снизилась в 1,17 и 2,77 раза по сравнению с по-

Рис. 1. Гистоструктура печени интактного животного. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 400.

казателями в сыворотке крови крыс, подвергшихся свинцовой интоксикации в течение такого же периода времени. Содержание общего холестерина и триглицеридов уменьшилось на 24% и 18% соответственно. Концентрация ХС ЛПВП повысилась в 1,5 раза. Индекс атерогенно-сти снизился в 3,14 раза относительно аналогичного показателя 3-ей группы.

Полученные результаты оказались максимально приближены к данным, полученным в контрольной группе, что достоверно свидетельствует о положительном корректирующем действии перепелиных яиц, включенных в пищевой рацион.

В результате проведенных исследований вы- явлены морфологические изменения в тканях печени, индуцированные свинцом. При исследовании на 14 день после воздействия металла наблюдалось значительное нарушение дольковой структуры и сосудистой системы органа. Гепатоциты были увеличены, их цитоплазма имела значительные просветления, что свидетельствует о развитии частичного внутриклеточного отека, клеточные границы слабо контурированы (рис.1, рис.2). Хроматиновые нити в ядрах становятся более грубыми, между ними отчетливо выступает парахроматин в виде бесцветных участков. Отдельные клетки приобретали вид пустотелых структур с эксцентрично расположенным пикно-тическим ядром. Что отражает параллельное развитие деструктивных процессов. Было отмечено разрастание соединительнотканной стромы, что может свидетельствовать о развитии процессов склеротизации с последующими цирротическими изменениями.

Выявлены изменения микроциркуляторного русла в виде обильного заполнения синусоидных капилляров эритроцитами. Поэтому можно косвенно судить о слабой циркуляции крови в системе внутридольковых синусоидных капилляров с возможным снижении ее дезинтоксикационных свойств. Это свидетельствует, по-видимому, о более выраженном напряжении дезинтоксика-ционных свойств гепатоцитов по сравнению с контрольной группой.

По истечении 21-х суток токсического воздействия наблюдалось

Часть желчных трактов триад также имели участки повреждения стенки. Липидная инфильтрация прослеживалась как внутри долек, так и в области триад. Это является одним из универсальных маркеров токсического воздействия и метаболических нарушений.

При воздействии ацетата свинца и употребления в пищу перепелиных яиц, в печени сохранялись дегенеративные изменения структуры. Однако при сравнении этой группы животных с животными 2-й группы, количество поврежденных клеток и степень их повреждения были меньше. Так уже на 14 сутки перипортальная лейкоцитарная инфильтрация была незначительной или даже отсутствовала. Наблюдалось некоторое уменьшение размеров гепатоцитов по сравнению с клетками печени крыс, подвергшихся свинцовой интоксикации в течение такого же периода времени (рис.3).

На 21 сутки трабекулярное строение и расположение внутридольковой паренхимы печени просматривается более чётко. Гепатоциты как центральных, так и периферических зон долек выглядели более сохранными. Среди них было очень мало «пустых», неокрашивающихся клеток, а степень вакуолизации цитоплазмы других поврежденных гепатоцитов была ниже. Встречались ядра гепатоцитов с более нежной структурой хроматиновой сети, размеры увеличились. Цитоплазма имеет более округлую форму. Соотношение площади цитоплазмы и ядра смещалось в сторону нарастание деструктивных изменений, как самих гепатоцитов, так и компонентов стенки кровеносных сосудов. Размеры клеток печени значительно увеличились по сравнению с контролем. Количество разрушенных гепатоцитов возрастало. Среди них появляются клетки с не окрашивающейся цитоплазмой. Ядра печеночных клеток уменьшаются, становятся бесструктурными, окрашиваются в темный цвет, ядрышек в них не видно (пикнотические изменения ядра). Количество двуядерных гепатоцитов увеличивалось, по сравнению с контролем. В области триад часто наблюдали разрушенные участки стенки междольковых вен.

Рис. 2. Изменения гепатоцитов при свинцовой интоксикации. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 400.

преобладания ядерного компонента. В ядрах можно видеть более отчетливо одно или два ядрышка. Подобные изменения морфо-функционального состояния гепатоцитов свидетельствуют о развитии компенсаторно-регенераторных процессов в печени. Они расположены относительно ком-

Рис. 3. Изменения гепатоцитов крыс под действием свинцовой интоксикации и после ее коррекции введением в рацион перепелиного яйца в течение 7 дней. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 400.

Рис. 4. Изменения гепатоцитов под действием свинцовой интоксикации и после ее коррекции введением в рацион перепелиного яйца в течение 21 дня. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 400.

пактно, плотно прилегают, друг к другу. Синусоидные капилляры становятся более широкими, в просветах видны единичные разрозненные эритроциты. Однако, центральные вены остаются полнокровными (рис. 4).

Таким образом, одним из главных достоинств включения перепелиных яиц в пищевой рацион является их комплексное действие на процессы, протекающие в организме, в частности, на нормализацию липидного обмена и состояния гепатоцитов.