Патоморфологические изменения матки крыс при алиментарном дефиците магния и его фармакологической коррекции сульфатом магния

Проблема возникновения алиментарного дефицита магния в настоящее время актуальна в различных сферах медицины: урология, кардиология, акушерство и гинекология, эндокринология и т.д. [Каладзе Н. Н., Бабак М. Л.,2009; Спасов А. А. с соавт., 2011; Takaya J., Kaneko K., 2011]. Являясь универсальным регулятором биохимических и физиологических процессов, клиническое значение магния отмечено в развитии таких состояний как артериальная гипертония и болезни сердца, бронхиальная астма, инсулино-резистентность и сахарный диабет, осложнения беременности и родов [Серов В. Н. с соавт., 2010; Maynard S. E., Karumanchi S. A., 2011]. Особое влияние магний оказывает на репродуктивную систему, отвечая за морфофункциональное состояние эндометрия и миометрия обеспечивая адекватное течение беременности и родов [Царькова М. А., 2010; Dullo P., Vedi N., 2008]. С этих позиций актуальным представляется изучение влияния дефицита магния на репродуктивную систему и возможности его фармакологической коррекции.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Целью данного исследования являлось установление закономерностей развития патоморфо-логических изменений в матке в условиях алиментарного дефицита магния и определение эффективности фармакологической коррекции сульфатом магния.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проводилось на 70 белых крысах-самках массой 200—230 г. Для моделирования гипомагнезиемии использовали специальную магний-дефицитную диету, аналогичную диете, производимой фирмой MP Biomedicals (США). Весь рацион готовился на деионизированной воде, эту же воду в ходе эксперимента использовали в качестве питьевой воды для животных, находящихся на диете. Скорость и глубину развития гипомагнезиемии контролировали, определяя содержание магния в плазме и эритроцитах животных, спектрофотометрическим методом по цветной реакции с титановым желтым [Меньшиков В. В., 1987]. При снижении концен- трации магния ниже 1,4 ммоль/л в эритроцитах и ниже 0,7 ммоль/л в плазме считалось, что у животных развилась гипомагнезиемия средней тяжести. После этого часть животных продолжала получать магний-дефицитную диету, остальным крысам перорально через зонд вводили магния сульфат в дозе 50 мг/кг массы тела в течение 3 недель. На 90-е сутки животные выводились из эксперимента с фиксацией материала в 10 % р-ре формалина и последующим стандартным гистологическим исследованием. При морфологическом исследовании были использованы следующие окраски: гематоксилином и эозином, по ван Гизону [Коржевский Д. Э., Гиляров А. В., 2010]. Морфометрическое исследование проводилось с использованием программы «PhotoM» с определением следующих показателей: толщина эндометрия и миометрия, высота однослойного столбчатого эпителия, объемная доля (ОД) ядер однослойного столбчатого эпителия, ОД маточных желез, высота эк-зокриноцитов маточных желез, ОД ядер экзокрино-цитов маточных желез, ОД ядер гладких миоцитов, толщина сосудистой стенки, а также степень эозинофильной инфильтрации по подсчету числа эозинофилов в эндометрии и миометрии в полях зрения [Ма-лакшинова Л. М., 2008; Банин В. В., Быков В. Л., 2009; Шкурупий В. А., 2010]. Группой сравнения служили животные с фармакологической коррекцией дефицита магния. Для определения фазы эстрального цикла производили цитологическое исследование влагалищного содержимого с выведением животных из эксперимента в фазу эструса.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

У животных, получавших магнийдефицитную диету, отмечалось снижение концентрации магния в плазме (на 51 %) и эритроцитах (на 56 %) (p < 0,05 по сравнению с интактной группой). У животных, получавших магния сульфат, наблюдалось восстановление концентрации магния до контрольных значений.

При патоморфологическом изучении матки животных, находившихся на безмагниевой диете, было установлено, что эндометрий соответствовал фазе эструса с базальным расположением ядер, овальной формы, неравномерным распределением хроматина и преимущественно одним ядрышком. Со стороны цитоплазмы отмечалась незначительная зернистость за счет равномерного распределения белковых гранул. Однако были выявлены участки дистрофических изменений в виде набухания и массивной вакуолизации клеток со смещением ядер к центру и их более светлым прокрашиванием. Подлежащая эндометриальная строма плотная, отечная с незначительным количеством маточных желез, которые имели более плотное расположение при коррекции сульфатом магния. Микроскопически экзок-риноциты маточных желез претерпевали те же изменения что и однослойный столбчатый эпителий.

Миометрий характеризовался наличием дистрофических изменений миоцитов с вакуолизацией цитоплазмы, отеком межмышечного пространства и полнокровием сосудов микроциркуляторного русла (эндотелиоциты с эозинофильной зернистостью). Ядра миоцитов с четко определяемыми ядрышками (преимущественно пара, единичные клетки с тремя ядрышками). В строме по сравнению с контрольной группой отмечалось снижение числа эозинофилов в 10,7 раз с наличием единичных лимфоцитов (рис.). В прилежащих нервных сплетениях наблюдался умеренный периневральный отёк и вакуольная дистрофия отдельных нейронов. Периметрий сохранен и представлен одним слоем мезотелиоцитов.

Рис. А — матка контрольной крысы; Б — незначительное количество маточных желез с секреторными эпителиоцитами в состоянии вакуольной дистрофии, отек эндометриальной стромы с единичными эозинофилами при наличии алиментарного дефицита магния. Окр. гематоксилином и эозином.

Ув. 10 х 20

При исследовании сосудов миометрия было установлено, что при развитии алиментарного дефицита магния отмечался выраженный периваскулярный отек с участками дезорганизации соединительной ткани и выраженным отеком сосудистой стенки. Мышечная стенка сосудов характеризовалась неравномерным прокрашиванием и фокусами перинуклеарного просветления цитоплазмы миоцитов. Волокна соединительной ткани стенки сосудов рыхло расположены, что свидетельствует о наличии ее дезорганизации и отеке.

Гистологическое исследование матки самок, находившихся на безмагниевой диете с фармакологической коррекцией сульфатом магния, показало, что в теле и рогах матки отмечаются менее выраженные патоморфологические изменения по сравнению с таковыми в группе животных с моделируемым алиментарным дефицитом магния. Однако, в области рогов матки по всей толщине миометрия и частично эндометрия обнаруживались гранулы гемосидерина.

В эндометрии отмечался незначительный периваскулярный и перигландулярный отёк стромы с незначительной лимфоцитарной инфильтрацией. Маточные железы эндометрия были сохранны с наличием призматического эпителия с нормохромными округлыми ядрами и единичными ядрышками. Со стороны сосудов матки отмечался менее выраженный периваскулярный отек и уплотнение сосудистой стенки. Отмечались уплощенные ядра эндотелия, расположенные параллельно к базальной мембране.

При морфометрическом исследовании ткани матки было установлено, что толщина эндометрия при дефиците магния значимо уменьшалась по сравнению с показателями контрольной группы, и при коррекции сульфатом магния.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, влияние дефицита магния вызывает морфологические изменения в матке, которые были неспецифическими и характеризовались отеком и дистрофией клеток, а также различной степенью выраженности лимфоцитарной и эозинофильной инфильтрации. При оценке эктоцервикса была обнаружена очаговая отслойка клеток и выявлены единичные структуры подобные акантотическим.

При фармакологической коррекции сульфатом магния обнаруживалось развитие компенсаторно-приспособительных реакций со стороны эндометрия и миометрия, которые характеризовались изменением толщины миометрия (за счет отека стромы) и восстановлением количества эндометриальных желез.