Перспективы разработки технологии гидрогеля с нативным прополисом для профилактики и лечения стоматологических заболеваний

Куль Ирина Яковлевна, кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармацевтической химии местный иммунитет полости рта. К таким экологическим факторам необходимо отнести прежде всего, климатические условия и сезоны года, химическое загрязнение среды, биотические и физические факторы, особенно такие, как электромагнитные волны, шумы, облучение и, наконец, стрессовые и психические травмы. Климатические условия создают известный иммунологический стереотип, и, соответственно, при переходе человека в другие климатические условия отмечается снижение реактивности организма и повышение частоты возникновения у этих людей кариеса, пародонтита и других заболеваний полости рта. Природные аллергены, содержащиеся в воде, почве, пище, попадая в желудочно-кишечный тракт, могут прямым или опосредованным путем воздействовать на уровень иммунологической реактивности организма. В условиях сложившихся биоценозов особое значение имеет содержание в организме микроэлементов (йод, железо, цинк, медь, молибден, фтор и т.д.), которые действуют через регуляторные механизмы иммуногенеза, благодаря их влиянию на синтез белка и клеточную энергетику. Всё вышеперечисленное приводит к снижению реактивности организма и более частому развитию различных заболеваний, в том числе и стоматологических[1].

В настоящее время для профилактики и лечения экологозависимых и связанных с ними различных осложнений применяют синтетические лекарственные средства, но их применение зачастую приводит к развитию целого ряда побочных эффектов. Кроме того, при росте анти-биотикорезистентности среди различных патогенов возникает необходимость поиска эффективных антимикробных средств природного происхождения. Фитопрепараты обладают мягким физиологически безопасным действием на организм. В пользу поиска антибактериальных средств растительного происхождения для профилактики и лечения стоматологических заболеваний свидетельствует наличие широкого спектра действия фитопрепаратов, что весьма важно для создания стоматологических лекарственных форм.

Объектом исследования нами был избран прополис. В стоматологической практике используют 2-4% спиртовой экстракт прополиса для лечения мягких тканей полости рта (афт, грибковых заболеваний, язвенных и абсциди-рующих процессов на деснах, для лечения повышенной чувствительности твердых тканей зубов; лечения альвеолитов, местного обезболивания во время препаровки зубов и после их экстракции; как антигеморрагическое средство после экстракции и др.) [2]. Прополис состоит из смоло-бальзамических веществ (50-55%), воска (30%), эфирномасличных компонентов (10%) и механических частиц (5-10%) [3]. Сложный комплекс полифенольных соединений включает флавоноиды, оксикоричные кислоты, феноло-кислоты, кумарины, некоторые дубильные вещества, кроме того, в состав прополиса входят различные полисахариды, ненасыщенные кислоты жирного ряда, сесквитерпеновые эфирномасличные вещества - преимущественно азуленовой природы. Прополис содержит более 50 органических компонентов и минеральных элементов, таких как калий, кальций, фосфор, натрий, магний, цинк, медь, кремний, селен и др, а также свыше 10 жизненно важных витаминов группы В, витамины А, Е, никотиновую и пантотеновую кислоты, аминокислоты. Такой химии-ческий состав и обусловливает широкий спектр действия прополиса. Импонирует и наличие противовирусной активности в отношении коронавирусов [4, 5].

Цель исследований: установление состава, разработка технологии и анализа гидрогеля с прополисом, определение антимикробной, ранозаживляющей активности.

В стоматологической практике используют ряд препаратов прополиса, которые представляют собой спиртовые извлечения или масс-ляные: масло прополисное «Промаст», «Пропосол» и другие [6, 7]. Применяются для лечения поражений слизистой ротовой полости - катаральных гингивитов, афтозных и язвенных стоматитов, осложнений кариеса и др. Принимая во внимание физико-химические свойства прополиса, в частности, его растворимость, исследования по разработке гидрогеля осуществляли с определения растворимости прополиса в различных полимерах, подбирая оптимальное количество полимера, позволяющего получить раствор прополиса и необходимую консистенцию геля. Установлено, что достаточно полно прополис растворяется в полиэтиленоксиде (ПЭО).

Далее осуществляли выбор состава гидрогеля. С этой целью были приготовлены модельные образцы геля с использованием полимеров в различных количественных и качественных сочетаниях: полиэтиленгликоль (ПЭГ) с М.м. 1500, ПЭГ с М.м. 4000; коллаген, ПЭГ с М.м. 6000, ПЭО с М.м. 400. Выбор синтетических полимеров обусловлен их основным свойством: выраженное дегидратирующее действие на ткани. В силу высокой способности к гидратации полиэтиленоксидный гель активно абсорбирует раневой экссудат; а вместе с ним и микробные токсины, продукты распада тканей, а также различные биологически активные вещества - липосомальные ферменты и другие медиаторы воспалительного процесса, «обрывая» таким образом его прогрессирующее течение. Модельные образцы гелей включали 5,0 прополиса. Из 7 модельных композиций были избраны для дальнейших исследований 4. Составы композиций: №1 - ПЭО 400 - 70,0+ПЭГ 1500-20,0+глицерин 10,0; №2 - ПЭО 400 80,0+ПЭГ 4000-15,0 + глицерин 5,0; №3 - ПЭГ 6000-15,0+ПЭО 400-70,0+глицерин-15,0; №4-ПЭО 400-75,0+ПЭГ 6000-15,0+глицерин 10,0, воды очищенной до 100,0 массы основы.

Технология геля: прополис расплавляли на водяной бане, вносили ПЭО 400, перемешивали до полного его растворения и получения однородной смеси. Осуществляли горячее фильтрование. Расплавляли ПЭГ и вносили горячий профильтрованный раствор прополиса, перемешивали до получения однородной массы. Выбор оптимальной основы геля осуществляли методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану. Модельной средой для диализа служил 95% спирт этиловый (с учетом растворимости полифенолов). Критерием оценки степени высвобождения прополиса был избран полифенольный комплекс. Количественное определение суммы полифенольных веществ в диализатах осуществляли спектрофотометрически при длине волны 290 нм [8]. Результаты представлены в табл. 1. Данные таблицы 1 свидетельствуют о том, что наибольший процент высвобождения полифенольных веществ обеспечивает гидрогель состава ПЭГ 6000-15,0+ПЭО-400-75,0+глицерин-10,0.

Таблица 1. Зависимость степени высвобождения суммы полифенольных веществ от используемой основы

Следующим этапом исследований было определение осмотической активности геля с прополисом. В результате проведенных экспериментальных исследований установлено, что дренажная способность гидрогеля с прополисом составляет свыше 300% через 4 часа, затем постепенно снижается.

Определение антимикробной активности стоматологического геля с нативным прополисом проводили методом диффузии в агар (способ «колодцев»). В качестве тест-культур были использованы: 1 – Staphylococcus aureus (209), 2 – Staphylococcus aureus (Макаров); 3 – Staphylococcus aureus (Type); 4 – Staphylococcus epider-midis Wood-46; 5 – Escherichia coli 675; 6 – Salmonella gallinarum; 7 – Bacillus anthracoides-96; 8 – Baccillus subtilis L 2 ; 9 – Proteus vulgaris. Полученные результаты представлены в табл. 2.

Таблица 2. Антимикробная активность геля

Результаты микробиологического исследования показали, что стоматологический гель с прополисом обладает выраженным антибактериальным действием в отношении всех используемых в эксперименте штаммов (широкий спектр антимикробного действия). Но в отношении кокковой и спорообразующей флоры гель полностью подавляет рост тест-культур и имеет бактерицидное действие (б/ц), а в отношении кишечных (Escherichia coli 675, Salmonella gallinarum) бактерий, протея наблюдается неполное просветление зон вокруг колодца – бактериостатическое действие (б/ст).

Изучение репаративной активности гидрогеля с прополисом проводили на белых крысах-самках, в осенне-зимний период на модели линейных ран. Препаратом сравнения был «Пропосол». В динамике воспаления наблюдали следующее: на 8-ой день у всех крыс, которых лечили гелем с прополисом, отмечали отторжение корочек, на их месте – сухую, розовую, нежную ткань, без следов кровотечения, полностью восстановившуюся к 16 дню наблюдений. В других группах к этому времени были единичные случаи отторжения корочек, а к 16 дню единичные случаи эпителизации. При применении «Пропосола» воспалительный эффект протекал в некоторых случаях гнойно, в серии животных, которым наносили гель с нативным прополисом – раны были чистыми. В контрольной группе у большинства крыс раны были более глубокими, с грубыми корочками, дважды насыхающими, с ярко выраженным гнойным воспалением. Их самозаживление наблюдали на 24-й день. На фоне «Пропосола» полная эпителизация была на 18-й день. Эпителизация раны на фоне геля с прополисом наблюдалась быстрее на 2-3 дня, чем при применении стандарта – «Пропосола», и на 8 дней раньше, чем в группе нелеченных животных. Таким образом, в ходе эксперимента была установлена высокая ранозаживляющая активность геля.

Выводы: разработаны состав, технология, методика анализа стоматологического гидрогеля. Установлена высокая осмотическая активность геля, выраженное антимикробное действие и репаративная активность геля, что позволяет рекомендовать его использование в стоматологии, как с целью профилактики, так и лечения ряда воспалительных заболеваний.